Диссертация (1141124), страница 16
Текст из файла (страница 16)
Перечень осложнений у больных рожей в зависимостиот выделенной из пробы ДНКВыявляемыймикроорганизм, nИтого:Осложнения(abs, %)Стафилококкимоно (6)Гн.-некр. раны – 1Абсцесс – 3Целлюлит - 1Стрептококкимоно (14)Гнойные16,7%Другие16,%-50%-40%50% *Гн.-некр. раны – 3Другие м/о моно (8)Абсцесс – 1Инфильтрат – 1Трофическая язва - 137,5%25%Микст-инфекции сучастиемстафилококков (13)Абсцесс – 2Флегмона – 1Гн.-некр. раны – 1Пневмония – 1Эрозии, язвы - 253,8% *38,5%15,4%Анализ на ДНКотрицательный (19)Трофическая язва - 1Эрозии, язвы - 15,3%05,3%Итого осложнений:2033,3%25%8,3%12,5%Примечание: * - достоверность различий с больными без выявленияДНК микроорганизмов (р ≤ 0,05)стрептококков (моно) - все осложнения были гнойные, а также гнойными были всеосложненияпривыявленииДНКстафилококков.Привыявлениидругихмикроорганизмов (моно) и микстинфекции с участием стафилококков гнойными былиболее половины осложнений, а при отсутствии выявления ДНК микроорганизмов гнойныеосложнения не выявлены.Таким образом, частота возникновения осложнений напрямую зависела отвыявления ДНК определенных микроорганизмов в виде единичных или сочетанныхвариантов (моно-микстинфекция),Совпадение положительных и отрицательных результатов выявления ДНК в кровии в пунктатах очага отмечено в 39,6% случаев, у преимущественного остальных больных81(50,0%) выявлены ДНК микроорганизмов в очаге, при их отсутствии в крови, а у 16,67%больных – в крови, при отсутствии ДНК микроорганизмов в пунктатах очага (Таблица 35).Таблица 35.
Совпадение положительных и отрицательных результатов выявления ДНКмикроорганизмов в ПЦР в крови и пунктатах очага.Результат анализа%Совпадение результатов39,6%Несовпадение результатов60,42%Дополнительно выявление ДНК в крови16,67%Дополнительно выявление ДНК в пунктате очага50,0% *Примечание: * - достоверные различия в сравнении с кровью (р = 0,001)Совпадение положительных и отрицательных результатов выявления ДНКмикроорганизмов в пунктатах очага и вне его отмечено в 76,92% случаев, а в 23,1%случаев отмечалось выявление ДНК других микроорганизмов как в пунктате очага, так ивне его (поровну) ( р0,05). Совпадение положительных и отрицательных результатоввыявления ДНК микроорганизмов в ПЦР в пунктатах очага и вне его представлено втаблице 5-7 (Таблица 36).Таблица 36. Совпадение положительных и отрицательных результатов выявления ДНКмикроорганизмов в ПЦР в пунктатах очага и вне егоРезультат анализа%Совпадение результатов76,92%Несовпадение результатов23,1% *Дополнительно выявление ДНК в очаге12,82% *Дополнительно выявление ДНК вне очага12,82% *Примечание: * - достоверные различия в сравнении с числом совпадающих результатов( р = 0,05 ).Совпадение результатов исследования пунктатов булл с результатами другихбиопроб не оценивалось ввиду малого количества первых.7.6.
Диагностическая значимость ПЦР у больных рожей.Полученные данные исследования различных биопроб от больных рожей методомПЦР свидетельствует, что в крови ДНК микроорганизмов обнаруживаются относительноредко (5,26% - стрептококки и 14,04% - стафилококки).82При рассмотрении результатов исследования биопроб в следующем порядке«кровьпунктат в области очага местного восспаления-пунктат булл», - частотавыявления ДНК микроорганизмов резко и достоверно возрастает, причем какстрептококков, так и стафилококков.Наряду роста числа выявляемых ДНК микроорганизмов увеличивывается числомикст и разнообразие их состава, но, в основном, за счет сочетания разных стафилококкови сочетаний стафилококков со стрептококками.При расчете числа положительных результатов ПЦР было установлено, чтонаиболее высокий процент выявленияДНК микроорганизмов отмечается приисследовании у больных рожей (в виде одной пробы) пунктата булл (61,11%) и пунктатаочага (53,06%), на третьем месте (по убыванию) – пунктат вне очага (46,67%); а изкомбинаций биопроб – исследование пунктатов в очаге и булл (87,5%), крови + пунктаточага+пунктат вне очага (73,9%) и кровь+пунктат очага (70,2%).
(Таблица 37).Таблица37.ЧастотаположительныхрезультатовПЦРсгибридизационно-флуоресцентной детекцией у больных рожей ( n = 60 ).Вид материалаЧисло(число больных)больныхположительных ОбщеечисловыявленныхДНКмикроорганизмовКровь (57)21,05%24,56%Пунктате очага ( 49 )53,06%63,27%Пунктат вне очага ( 30 )46,67%66,67%Пунктат булл ( 18 )61,11%94,44%Кровь + очаг ( 47 )70,2%91,5%Очаг + вне очага ( 29 )55,2%113,8%Очаг + буллы ( 8 )87,5%187,5%Кровь+очаг+вне очага ( 23 )73,9%169,6%Сочетание биопроб:Однако, учитывая, что не у всех больных протекает в виде буллезных форм,наиболее информативным является исследование крови в сочетании с пунктатами очага (+пунктатами вне очага )Такимобразом,анализданных,полученныхприизученииразличногобиологического материала (пунктатов из местного воспалительного очага и на расстоянииот него, содержимого булл, крови) методом ПЦР с гибридизационно-флуоресцентнойдетекцией, подтвердил ведущую роль β-ГСА в развитии полимикробного инфицирования83при буллезно-геморрагической роже.
Наряду с гемолитическим стрептококком в развитииинфекционного процесса в ряде случаев, вероятно, участвуют и другие микроорганизмы,такие какS.aureus (MSSA, MRSA), MRCoNS, S.dysgalactiae subspp. equisimilis,S.pneumoniae, S.epidermidis, S.saprophyticus, S.hominis, S.capitis. В редких случаяхобнаруживаются C.normanense, C.mucifaciens, P.aeruginosa, Klebsiella spp., Proteus spp.Наибольшее число микст-инфицирования выявлено у больных при осложненномтечениизаболевания(56,3%)ввидеформированиеабсцессов(44%),гнойно-некротических ран (44%), острых флебитов (22%).Полученные нами данные частично согласуются с данными литературы овыявлении у больных рожей S.aureus и других стафилококков, а также возбудителейдругих видов (единичные наблюдения) [194,221, 281, 304, 305, 325].Наибольшее число осложнений, в основном, гнойные отмечены при обнаружении втканяхместноговоспалительногоочагасочетанийстафилококковсдругимимикроорганизмами (микстинфекция) или (меньшее число осложнений) при обнаруженииДНК стрептококков.
При отсутствии ДНК микроорганизмов из числа тестированныхгнойных осложнений не отмечено. Это подчеркивает важность микробного пейзажа вочага местного воспаления в формировании характера течения заболевания ипоследствий.Результаты бактериологического исследования свидетельствуют о более скудномсоставе и количестве выявляемых микроорганизмов, в сравнении с ПЦР. Однако, чистотавыявления стрептококков, в том числе S.pyogenes, в очаге была достоверна выше прииспользовании ПЦР, чем бактериологического метода (40,82% и 2,04%, р = 0,00), а разныхстафилококков - достоверно выше при использовании бактериологического метода, чемПЦР (63,27% и 16,33%, р 0,05), хотя частота выявления S.aureus не различалась.Бактериологическим методом значительно реже выявлены микст, только в смывах споверхности очага, и не выявлены микст в крови и буллах.
Совпадение результатов этихдвух методов по виду выявляемого микроорганизма отмечено, в целом, у 36,67% больных.Вобластимикроорганизмеместногоотмеченовоспалительногов25,64%очагаслучаев.совпадениявНесовпадениебактериологического метода и ПЦР отмечены за счет высевавыявляемомрезультатовS.epidermidis иS.saprophyticus с кожи в области очага (приблизительно половина всех несовпадающихрезультатов – 38,46%) при отсутствии их ДНК в пробах, исследованных ПЦР.
Остальныеслучаи несовпадения – за счет выявления в ПЦР, в основном, ДНК Streptococcus (в т.ч.S.pyogenes).84ГЛАВА 8. Значимость микробного пейзажа тканей местного воспалительногоочага в формировании особенностей клинического течения рожи у госпитализированныхбольных8.1. Сравнение бактериологического метода и ПЦР по выявлению микроорганизмову больных рожей.Как представлено выше, частота выявления различных микроорганизмов значительноразличалась при использовании бактериологического метода и ПЦР.В смывах синформативностьюповерхностиместноговоспалительного очага наибольшейобладал бактериологический метод, который позволял выявлятьживые культивируемые микроорганизмы, в то время как в пунктатах очага, вне его ибуллах, приневысокойвысеваемости микроорганизмов, тем не менее,с высокойчастотой обнаруживались ДНК стафилококков, стрептококков и некоторых другихмикроорганизмов.
Это свидетельствовало, о том, что в целом ПЦР является болеечувствительнымметодом,позволяющимвыявлятьДНК микроорганизмов в техсубстратах, где культивируемые микроорганизмы трудно или невозможно обнаружить(ткани воспалительного очага, детриты тканей и др.) (Рисунок 4).100%%500КровьПосев с кожиПунктат изочагаБакпосевПунктат внеочагаПосев буллПунктат буллПЦРРисунок 4 .
![](https://s.studizba.com/z.php?f=/templates/si/i/noavatar.png&w=100&h=100&t=1"){kind=avatar}
