Диссертация (1141124), страница 20
Текст из файла (страница 20)
(у двух больных), у одногобольного получен высев стрептококков (S.dysgalactiae subspp.equisimilis) в смыве споверхности очага и в пунктате буллы, а S.pyogenes удалось обнаружить только у двух106больных в пунктатах булл в виде монокультуры. В составе выявленных микстов отмеченысочетаниястафилококковсграмотрицательнымимикробамиисдругимистафилококками и, таким образом, выявленные сочетания микроорганизмов (8%) невключали S.pyogenes.Следует отметить, что трудности высева S.pyogenes у больных рожей отмечалисьмногими авторами [8, 44, 65], в связи с этим бактериологические исследования у больныхрожей обычно не проводятся. Между тем, в наших исследованиях бактериологическимметодом выявлено достаточное число стафилококков, роль которых при заболеванияхкожи и мягких тканей постоянно возрастает.Преобладание выявления S.epidermidis и S.saprophyticus над выявлением S.aureus(в 2 раза) на поверхности воспалительного очага можно расценивать как относительнуюсохранность микробиоценоза кожи у больных рожей (в 40,8% случаев), частично с этимможет быть связано практическое отсутствие высева S.pyogenes (2,04%) с поверхностикожи очага.
Однако, у 20,45% больных, в отсутствие S.epidermidis и S.saprophyticusвыявлены монокультуры S.aureus, .Впервые установлено, что присутствие S.aureus у больных рожейнижнихконечностей на поверхности кожи местного воспалительного очага сопровождаетсяболеевысокойлихорадочной реакциейлейкоцитозом, повышениеморганизма больного, более высокимчисла палочкоядерных лейкоцитов, ускорением СОЭ,повышением лейкоцитарного индекса интоксикации (по Кальф-Калиф), щелочнойфосфатазы и мочевины в крови, снижением числа лимфоцитов, большим количествомэритроцитов в моче, чем у больных с отсутствием высева S.aureus с поверхности очага (р≤0,05).Этосвидетельствуетотом,чтовыявляемыйS.aureusусиливаетобщеинтоксикационные синдром и воспалительные реакции в организме больных рожейнижнихконечностей, что отражается на изменении соответствующих показателей.Высев S.aureus с поверхности кожи в области местного воспалительного очага может бытьадекватным признаком выраженной воспалительной реакции и общей интоксикации убольных рожей нижних конечностей, преимущественно буллезно-геморрагических форм.Относительное число больных с эритематозными формами рожи, у которых быливыявлены микроорганизмы (13,46%), значительно уступало числу больных буллезногеморрагическими формами рожи (наиболее частой форме среди обследованныхгоспитализированных больных) (59,62%).При этом в области местного очага воспаления стрептококки найдены только прибуллезно-геморрагической роже (7,6%), стафилококки – достоверно чаще при буллезно-107геморрагической роже, чем при эритематозной (89,66% и 11,54% , соотв.), при этомподавляющими (до 50 %) были выявлены S.aureus.Впервые установлено, что наибольшая частота осложнений отмечена у больныхрожей с отрицательными результатами посевов с кожи в области очага, в то время какприсутствиеS.epidermidis и/или S.saprophyticus (резидентных стафилококков кожи)сопровождается наименьшим числом осложнений (17,7%).
Это может быть обусловленопроявлением антагонистических свойств эпидермальных стафилококков, наиболеезначимых представителей сапрофитов кожи, по отношению к стрептококкам [255], чтоприводит к меньшему числу осложнений. При отсутствииэтих стафилококков наповерхностипатогенный потенциалкожи,вероятно, полностью проявляетсястрептококков, что приводит к сравнительно большему числу осложнений.Между тем, в различные сроки от начала заболевания общее число выявленныхстрептококков,стафилококковипрочихмикроорганизмов,поданнымбактериологического исследования, практически не различалось.Таким образом, впервые с использованием широкого спектра тест-систем длясовременных методик бактериологического исследования охарактеризован пейзажмикроорганизмов, присутствующих в тканях местного воспалительного очага и крови убольных рожей нижних конечностей.Проведенное бактериологическое исследование сиспользованиемширокогоспектра тест-систем и современных методик позволило у госпитализированных больныхрожей нижних конечностей охарактеризовать пейзаж микроорганизмов, присутствующихв тканях местного воспалительного очага и крови, установить важное клиническоезначение присутствия разных видов стафилококков на коже в области очага, усилениеобщеинтоксикационного синдрома и воспаления по клинико-лабораторным показателямв случае присутствия на коже в области очага культивируемых S.aureus.
Эти данныеимеют большое значение для оценки клиники и диагностики сопутствующеймикрофлоры при роже в области очага и прогноза возможных осложнений.Спектр антибиотикорезистентности выявленных стафилококков по данным ПЦРсвидетельствует, что в настоящее время имеются резервные возможности в лечениирожи нижнихконечностейбуллезно-геморрагическихформ, отличающихся, какизвестно, большей тяжестью по сравнению с эритематозными формами и требующихболее интенсивной терапии.Такимобразом,анализданных,полученныхприизученииразличногобиологического материала (пунктатов из местного воспалительного очага и на расстоянииот него, содержимого булл, крови) методом ПЦР с гибридизационно-флуоресцентной108детекцией, подтвердил ведущую роль β-ГСА в развитии буллезно-геморрагической рожи.Наряду с гемолитическим стрептококком в развитии инфекционного процесса в рядеслучаев, вероятно, участвуют и другие микроорганизмы, такие как Staph.aureus MSSA,MRSA и MRCoNS,S.
dysgalactiae subspp. equisimilis, S.pneumoniae, , S.epidermidis,S.saprophyticus, S.hominis, S.capitis. В редких случаях обнаруживаются C. normanense,C.mucifaciens, P.aeruginosa, Klebsiella spp., Proteus spp.Наибольшее число микст-инфицирования выявлено у больных при осложненномтечениизаболевания(56,3%)ввидеформированиеабсцессов(44%),гнойно-некротических ран (44%), острых флебитов (22%). Эти данные частично согласуются сданными литературы о выявлении у больных рожей S.aureus и других стафилококков, атакже возбудителей других видов (единичные наблюдения) [150, 177, 227, 252, 255, 276].Результаты бактериологического исследования свидетельствуют о более скудномсоставе и количестве выявляемых микроорганизмов, в сравнении с ПЦР.
Однако, чистотавыявления стрептококков, в том числе S.pyogenes, в очаге была достоверна выше прииспользовании ПЦР, чем бактериологического метода (40,82% и 2,04%, р ≤ 0,05), а разныхстафилококков - достоверно выше при использовании бактериологического метода, чемПЦР (63,27% и 16,33%, р0,05), хотя частота выявления S.aureus не различалась.Бактериологическим методом значительно реже выявлены микст, только в смывах споверхности очага, и не выявлены микст в крови и буллах. Совпадение результатов этихдвух методов по виду выявляемого микроорганизма отмечено, в целом, у 36,67% больных.В области местного воспалительного очага совпадения в выявляемом микроорганизмеотмечено в 25,64% случаев. Несовпадение результатов бактериологического метода иПЦР отмечено за счет высева S.epidermidis и S.saprophyticus с кожи в области очага(приблизительно половина всех несовпадающих результатов – 38,46%) при отсутствии ихДНК в пробах, исследованных ПЦР.
Остальные случаи несовпадения – за счет выявленияПЦР, в основном, ДНК Streptococcus (в т.ч. S.pyogenes).Частота выявления различных микроорганизмов значительноразличаласьприиспользовании бактериологического метода и ПЦР. В смывах с поверхности местноговоспалительного очага наибольшейинформативностьюобладал бактериологическийметод, который позволял выявлять живые культивируемые микроорганизмы, в то времякакв пунктатахочага,внеегомикроорганизмов, тем не менее,стафилококков, стрептококковибуллах, прис высокойинекоторыхчастотойдругихневысокойвысеваемостиобнаруживалисьДНКмикроорганизмов. Этосвидетельствовало, о том, что в целом ПЦР является более чувствительным методом,позволяющим выявлять ДНК микроорганизмов в тех субстратах, где культивируемые109микроорганизмы трудно или невозможно обнаружить (ткани воспалительного очага,детриты тканей и др.).Выявление ДНК микроорганизмов в очаге при остутствиивысева микроорганизмов объяснялось гибелью возбудителей в очаге воспаления, в товремя как для использования ПЦР присутствие жизнеспособных возбудителей необязательно.
Это предположение подтвердилось данными электронной микроскопии,где в очаге воспаления были выявленыкак сохранные клетки микробов, так ичастично разрушенные, с включениями фагов, а в части препаратов - окруженныевнеклеточным матриксом, что свидетельствует о формировании биопленок в очаге.Представляло интереспроанализировать микробный пейзаж очага местноговоспаления у больных рожей разного возраста. Анализировались результаты ПЦР-РВ ибактериологическогоотдельныхисследования по выявлению различных микроорганизмовбиопробахвматериалов, полученных от больных.
Полученные данныесвидетельствуют о значимости микробного пейзажа местного воспалительного очага угоспитализированных больных (преимущественно буллезно -геморрагической формы)рожи для формирования особенностей клинического течения и исхода заболевания.Присоединение стафилококковой флоры, в первую очередь, S.aureus, а такжеMRConSусиливает общую интоксикацию,воспалительныереакцииорганизма,тормозит репарацию тканей местного воспалительного очага.
При исследовании мазковс поверхности очага бактериологическим методом у больныхразных возрастныхгрупп (до 60 и после 60 лет) были получены похожие результаты – по числу выявленныхмикроорганизмов и микст. При анализе результатов исследования пунктата из очага ипунктата вне очага в ПЦР и, особенно, булл, обращает на себя внимание то, чторазличныемикроорганизмы, в том числе, в составемикстов,обнаруживаютсяпреимущественно у больных до 60 лет, в то время как у больных старше 60 лет вбуллах с помошью ПЦР и бактериологического метода выявлены только S.pyogenes.Таким образом, представленные данныесвидетельствуюто значимостимикробного пейзажа местного воспалительного очага у госпитализированных больных(преимущественноособенностейбуллезно-геморрагическойклиническоготеченияиформы) рожиисходадлязаболевания.стафилококковой флоры, в первую очередь, S.aureus, а такжеформированияПрисоединениеMRConSусиливаетобщую интоксикацию, воспалительные реакции организма, тормозит репарацию тканейместного воспалительного очага.При сравнении частоты обнаружения у больных рожей в различных биосредахстафилококков бактериологическим методом и их ДНК методом ПЦР были выявленыопределенные особенности в характере течения заболевания.
![](https://s.studizba.com/z.php?f=/templates/si/i/noavatar.png&w=100&h=100&t=1"){kind=avatar}
