Диссертация (1141124), страница 18
Текст из файла (страница 18)
индекс85,8 ± 2,784,2 ± 2,583,9 ± 2,180,7 ± 2,882 ± 1,8ЩФ107 ± 10,592,7 ± 9,8105,4 ± 7,7119,6 ± 9,9111,6± 6Глюкоза6,9 ± 0,56,6 ± 0,56,0 ± 0,46,5 ± 0,56,3± 0,3Примечание: *- достоверность различий в сравнении с моноинфекциями (р ≤ 0,05);# - достоверность различий с S.aureus (р ≤ 0,05);$ - достоверность различий с S.epidermidis и/или S.saprophyticusи/или S.saprophyticus. По другим показателям клинического анализа крови и побиохимическим показателям крови значимых различий между группами не найденоПолученные данные свидетельствуют об усилении воспалительной реакции убольных в случае присутствия S.aureus на коже в области очага местного воспаления91в сравнении с таковой у больных с высевом S.epidermidis и/или S.saprophyticus илибез высева стафилококков.8.3.
Возрастные особенности выявления микроорганизмов и характера течениярожи8.3.1. Структуравыявляемых микроорганизмов убольных рожейразныхвозрастных групп.В двух группах больных, сформированных в зависимости от возраста (до 60 лет истарше 60 лет), была проанализирована частота выявлениямикроорганизмов двумяметодами - методом ПЦР-РВ и бактериологическим методом (Таблица 40).Таблица 40. Структура выявляемых микроорганизмов у больных рожей в возрастедо 60 и старше 60 летВозраст больныхВозраст больныхдо 60 летстарше 60 лет392184,6%76,2%Всего выявлено м/о:6424Среднее число м/о у больного1,61,1S.aureus39,1 %19,0 %др.
стафилококки21,9 % #61,9, % * #стрептококки29,7 %28,6%другие м/о9,4 %4,8 %Моноинфекция23,1 %23,8 %Микстинфекция61,5 %52,4 %ПоказателиВсего больныхВсего больных с выявленнымимикробами:Выявленные микроорганизмы:Примечание: * - достоверность различий между группами больных (р0,01);# - достоверность различий с частотой выявления S.aureus (р0,01).Как видно из таблицы, число больных с выявленными микроорганизмами в этихдвух группах больных практически не различалось. Общее число выявленных микробов92была выше в группе более молодых людей, как и среднее число выявленныхмикроорганизмов в расчете на больного.S.pyogenes выявлены с одинаковой частотой, однако, в группе больных до 60 летS.pyogenes составлял только 63% из числа всех выявленных стрептококков, еще быливыявлены S.dysgalactiae equisimilis, S.pneumoniae, Streptococcus spp.
В группе больныхстарше 60 лет все выявленные стрептококки были S.pyogenes.Другие микроорганизмы, кроме вышеперечисленных, встречались в единичныхслучаях, с одинаковой частотой в этих группах больных. Также не отличалась частотавыявления моно- и микстинфекций в данных группах больных.
Подробные данные овыявленных возбудителях представлены в следующей таблице, где результаты анализоврассмотрены в зависимости от того, при исследовании какой биопробы они былиполучены.8.3.2. Микробный пейзаж очага местного воспаления у больных рожей разноговозраста по данным ПЦР-РВ и бактериологического исследования.Представляло интереспроанализировать микробный пейзаж очага местноговоспаления у больных рожей разного возраста.
Анализировались результаты ПЦР-РВ ибактериологическогоисследования по выявлению различных микроорганизмоввотдельных биопробах материалов, полученных от больных (Таблица 41).Изтаблицывидно,чтоисследованиемазковсповерхностиочагабактериологическим методом дает идентичные результаты у больных обследованныхвозрастных групп (включая число микст)При анализерезультатов исследованияпунктата из очага и пунктата вне очага в ПЦР и, особенно, булл, обращает на себявниманието, чторазличныемикроорганизмы, в том числе, в составемикстов,обнаруживаются преимущественно у больных до 60 лет, в то время как у больныхстарше 60 лет в буллах с помошью ПЦР и бактериологического методавыявленытолько S.pyogenes.Таким образом, представленные данные свидетельствуют о значимости микробногопейзажаместного(преимущественновоспалительногоочагабуллезно -геморрагическойугоспитализированных больныхформы) рожидляформированияособенностей клинического течения и исхода заболевания.Присоединение стафилококковой флоры, в первую очередь, S.aureus, а такжеMRConSусиливает общую интоксикацию,воспалительныетормозит репарацию тканей местного воспалительного очага.реакцииорганизма,93Таблица 41.
Выявление микроорганизмов у больных рожей разного возраста методомПЦР-РВ и бактериологическим методом в разных биопробах.Вид исследования ибиорпоба< 60 лет (n=38)микроорганизмМазок сS.dysgalactiae equisimilisповерхностиS.aureusочага(бак.исследо S.epidermidisвание)S.saprophyticus≥ 60 лет (n=22)микроорганизмn7S.aureus25S.epidermidis94S.saprophyticus1n1Acinetobacter baumanii2Klebsiella pneumoniae1Включая миксты:Пунктат изочага (ПЦР)Acinetobacter baumanii +S.aureus1S.epidermidis+ S.aureus1Klebsiella pneumoniae+S.aureus1S.epidermidis+S.saprophyticus1Pseudomonas aeruginosa2Staph.spp.3Staph.spp.1MRCoNS2MRCoNS1MRSA1MSSA1MSSA1S.pyogenes9S.pyogenes5Strept.spp2Strept.spp1S.dysgalacticeae equisimilis2Klebsiella1S.pneumoniae1Включая миксты:MSSA+Str.spp:pyogenes+Pseudomonas aeruginosaMRSA+MRCoNS1Staph.spp+Klebsiella spp11MRCoNS+Str.pyogenes1Staph.spp+Str.pyogenes2Пунктат внеPseudomonas aeruginosa1Klebsiella1очага (ПЦР)MSSA5MRCoNS194MRCoNS1MRSA1Staph.spp.1S.pyogenes6Strept.spp1S.pneumoniae1Включая миксты:MRSA+MRCoNS1Staph.spp + S.pyogenes +1S.pyogenes1-MSSAПунктатыбулл (ПЦР)MSSA + S.pyogenes2Strept.spp + MSSA1MRCoNS4MSSA2Staph.spp.1S.pyogenes3Strept.spp3Proteus1ПунктатыВключая миксты:MRCoNS+ Str.pyogenesMRCoNS+Str.pyogenes+ProteusMSSA+MRCoNS + Str.sppStr.spp+ Staph.spp.MSSA+ Str.sppS.pyogenesбулл (Бак.S.dysgalacticeae equisimilis1исследован.S.aureus1S.pyogenes4S.pyogenes111111195ГЛАВА 9.
Результаты изучения крови, мазков-отпечатков с поверхности очага,пунктата булл методами сканирующей и трансмиссионной электронной микроскопии.Анализ ультратонких срезов посевов мазков из раны и содержимого булл в областиместного воспалительного очага у больных рожей показал, что в ряде случаеводновременноопределялисьмикроорганизмыразныхморфологическихгруппграмположительных бактерий - и стафилококки стрептококки (Рисунок 7).СтафилококкиСтрептококкиРисунок 7 . Первый пассаж культуры (содержимое буллы )Методом СЭМ внативных препаратах содержимого экссудата булл былиобнаружены окруженные аморфным веществом кокковидные бактерии и кристаллы соли,поморфологииидентичныекристалламNaCl,чтобылоподтвержденовэнергодисперсионном химическом анализе. (Рисунок 8а).
После инкубации содержимогобулл с полиэтиленгликолем при просмотре препаратов было выявлено большоеколичество кокковидныхбактерий.По морфологическим характеристикам группыкокков отличались друг от друга: первая группа более крупных клеток (более 1 мкм) приделении образовывала тетракокки, другая группа была представлена более мелкимиклетками (500-700 нм), характер деления которых соответствовал стафилококкам, а такжесопоставимые по размерам кокки, но формирующие цепочки, характерные длястрептококков. (Рисунок 8 б). Кроме этого обнаруживались и палочковидные бактерии,покрытыеэкзополиматриксом(Рисунок8в).Вконтрольномпрепаратеполиэтиленгликоля контаминирующие бактерии обнаружены не были (Рисунок 8 г).96в – палочковидные бактерии↑а – бактерии, покрытые аморфнымвеществом экссудата↑, кристаллысоли (NaCl ) ↑↑б – тетракокки ↑ и стафилококки ↑↑ г – в полиэтиленгликолеконтамигациямикроорганизмами невыявленаРисунок 8.
Экссудат (содержимое буллы), а – нативный препарат экссудата б инкубированный с ПЭГ (полиэтиленгликолем молекулярный вес 60 кDa)в течение 12 часпри +4оС в – препарат полиэтиленгликоля молекулярный вес 60 кDa (контроль)Методом СЭМ в нативном препарате плазмы крови также были обнаруженывключения, контуры которых и размеры соответствовали бактериальным клеткам(коккам) (Рисунок 9).КоккиПалочковидные бактерииКокки5 мкмРисунок 9. Препарат плазмы крови, приготовленный для исследования в сканирующемэлектронном микроскопе, с использованием полиэтиленгликоля (СЭМ)97500 нмКокковидные бактерии в составе циркулирующего иммунного комплекса ↑500 нмабв500 нма,б – делящиеся бактерии в – лизированная бактерияРисунок 10.
Препарат циркулирующего иммунного комплекса (ТЭМ)Методом ТЭМ в препарате ультратонких срезов циркулирующих иммунныхкомплексов были обнаружены кокковидные бактерии разной степени сохранности – отбактерий, идентичных по строению вегетативным формам кокков, причем в стадииделения, до лизированных клеток, полностью утративших клеточную стенку сразрушенным рибонуклеопротеидным комплексом (Рисунок 10).Кроме этого в препаратах циркулирующих иммунных комплексов, в которыхобнаруживались кокки, были выявлены вирусоподобные частицы (Рисунок 11).
Этичастицы локализовались вне бактериальных клеток и внутри лизированных бактерий.Локализация частиц, их размеры ( 50 - 60 нм), характер вызываемых ими поврежденийбактерий (лизис цитоплазмы, рибонуклеопротеидного комплекса, разрыв клеточнойстенки) позволяет считать эти частицы фагами.Фаговые частицы также были обнаружены в бактериях (кокках) при первомпассажекультур на питательных средах из содержимого булл имазках из очагавоспаления. В первом пассаже подавляющее большинство бактериальных клеток можнобыло охарактеризовать как лизированные, и среди них встречались группы сохранныхвегетативных клеток с толстой клеточной стенкой, плотной цитоплазмой, резистентных кциркулирующему в бактериальной культуре фагу (Рисунок 12).98Лизированные бактерииФаговые частицыФаговые частицы500 нм500 нмРисунок 11. Вирусоподобные (фаговые) частицы внутри лизированных бактерий (кокков)и вне бактериальных клетокФагорезистентные бактерииФаговые частицы внутрилизированныхбактерийФаговыечастицы внутрилизированных бактерийРисунок 12.
![](https://s.studizba.com/z.php?f=/templates/si/i/noavatar.png&w=100&h=100&t=1"){kind=avatar}
