Диссертация (1141124), страница 15
Текст из файла (страница 15)
В пунктатах области воспалительного очага в сравнении срезультатами исследования крови достоверно чаще выявлены стрептококки (40,82% и5,26%, соотв., р ≤ 0,01), особенно S.pyogenes ( 28,57% и 1,75% соотв., р ≤ 0,01).В пунктатах на расстоянии от очага в ПЦР («вне очага») выявлены стрептококки в30%, стафилококки - с такой же частотой в 30% и у единичных больных – Ps.aeruginosa иKlebsiella spp. Микст найдены у 6 больных - S.pyogenes+ S.aureus MSSA (3 больных), атакже Strept spp.
+ S.aureus MSSA, Strept.spp.+ Klebsiella и S.aureus MRSA+MRCoNS.73(Таблица 28). И, таким образом, частота выявления различных микро-организмов впунктатах вне очага достоверно не отличалось от таковой в пунктатах в очаге, как и числовыявленных микст.В пунктате содержимого булл у больных рожей методом ПЦР микроорганизмы быливыявлены с наибольшей частотой в сравнении с другими биоматериалами (94,44%),причем стрептококки и стафилококки - с одинаковой частотойв 61,11% и 38,89%,соотв.
(Таблица 29).Таблица 28. Частота выявления ДНК микроорганизмов в пунктатах на расстоянии отместного воспалительного очага у больных рожей (n=30)МикроорганизмЧисло положительных пробStreptococcus spp.9 (30,0%)в том числе:S.pyogenesStr.dysgalactiae equisimilisS.pneumoniaeStaphylococcus spp.в том числе:7 (23,33%)1 (3,33%)1 (3,33%)9 (30,0%)S.aureus MSSA5 (16,67%)S.aureus MRSA1 (3,33%)MRCoNS2 (6,67%)Staph.spp.1 (3,33%)Klebsiella spp.1 (3,33%) *Pseudomonas aeruginosa1 (3,33%) *Итого:20 (66,67%)В том числе микст:S.pyogenes+ S.aureus MSSA3 (10,0%)Strept spp.
+ S.aureus MSSA1 (3,33%)S.aureus MRSA+ MRCoNS1 (3,33%)Staph.spp.+ Klebsiella spp.1 (3,33%)Примечание: * достоверность различия в сравнении со стhептококкамии стафилококками (р = 0,015).Подавляющими микроорганизмами были S.pyogenes и S.aureus, лишь в одном случаевыявлен Proteus.74Миксты в том числе отмечены у 5 больных при исследовании пунктата булл:S.pyogenes + MRCoNS, Strep spp.+ S.aureus MSSA, Strept spp. + Staph spp., Strep spp.+S.aureus MSSA + MRCoNS и Strep spp.+ MRCoNS + Proteus.Таблица 29. Частота выявления ДНК микроорганизмов в пунктатах буллу больных рожей (n=18)МикроорганизмStreptococcus spp.в том числе:S.pyogenesStrept spp.Staphylococcus spp.в том числе:S.aureus MSSAЧисло положительных проб11 (61,11%)6 (33,33%)4 (22,22%)7 (38,89%)2 (11,11%)MRCoNS4 (22,22%)Staph.spp.1 (5,56%)Итого:17 (94,44%) *В том числе микст:Strep spp.+ MRCoNS+ Proteus1 (5,56%)S.pyogenes + MRCoNS1 (5,56%)Strep spp.+ S.aureus MSSA1 (5,56%)Strep spp.+ S.aureus MSSA + MRCoNSStrept spp.
+ Staph spp.1 (5,56%)1 (5,56%)Примечание: * - достоверные различия в сравнении с кровью, пунктатами из очагаи вне очага (р0,01).Сводные данные по выявлению стрептококков, стафилококков и их микстпредставлены в Таблице 30 и Рисунке 3.Как видно из таблицы и рисунка, наибольшая частота выявления стрептококковотмечено в очаге, а стафилококки выявлены приблизительно с одинаковой частотой.Частота выявления стрептококков была минимальная в крови, достоверно выше - внеочага и в буллах. Наряду с ростом числа выявляемых ДНК микроорганизмовувеличивается число микст и разнообразие их состава, но, в основном, за счет сочетанияразных стафилококков и сочетания стафилококков со стрептококками.75Таблица 30. Сводные данные по выявлению стрептококков, стафилококков и их микстметодом ПЦР с гибридизационно-флуоресцентной детекцией (%)ВыявленныебактерииБиопробы (n = 154)ПунктатПунктатПунктатв очаге (49)вне очага (30)булл (18)5,2640,82 *30,0 *61,11 *1,7628,57 *23,33 *33,33 *10,5316,3230,0 *38,89 *в т.ч.S.aureus-8,1620,0 *11,11*MSSA-6,1216,6711,11MRSA-2,043,33-MRCoNS1,756,126,6722,2Staph.spp.8,782,043,335,561,758,16 #20,0 *27,78 *S.aureus.+S.pyogenes+S.pyogenes+S.epiderm.Staph.sppMSSA (3)S.pyog+MSSAMSSA+S.pyogenes++ P.aeruginosaMRCoNSMRCoNSS.pyogenes+MSSA+MSSA+MRCoNSStrep.spp.Strep.spp.MSSA+Klebs.spp.+MSSA+MRCoNSStaph.sppMRCoNSКровь (57)Стрептококкив т.ч.S.pyogenesСтафилококкиМиксты (%)Состав микста уотдельныхбольныхProteus+MRCoNS+Strep.spp.Staph.spp.+Strep.spp.Примечание: * - достоверность отличий в сравнении с кровью (р0,05)# - достоверность отличий в сравнении с пунктатом булл (р = 0,042)7680,00%61,11%*60,00%40,82%*30,00% 20,00%30,00%*40,00%20,00%14,04%5,26%1,75%*38,89%*27,78%*16,33%8,16% #0,00%кровь n=57очаг n=49Streptococcus spp.вне очага n=30булла n=18Staphylococcus spp.Примечание: * - достоверность отличий в сравнении с кровью (р 0,05)# - достоверность отличий в сравнении с пунктатом булл (р = 0,042)Рисунок 3.
Сводные данные по частоте выявления стрептококков истафилококков в различных биоматериалах.7.2. Частота выявления ДНК микроорганизмов в различные сроки заболевания.Нами были проанализированы данные об идентификации ДНК микроорганизмов взависимости от сроковвзятия биологического материала. Количество выявленныхстрептококков несколько увеличивалось к 4 – 5 д.б., а после 6 д.б.
– снижалось до уровня2-3 д.б. Число выявленных стафилококков несколько снижалось к 4-5 д.б., а после 6 д.б.они не выявлялись. Прочие микроорганизмы наиболее часто выявлены на 2-3 д.б. Вслучае с буллезно-геморрагичекими формами рожи было выявлено достоверное снижениеобщего числа положительных результатов выявления ДНК микроорганизмов после 6 дняболезни в сравнении с 2-3 д.б. (р=0,044). ( Таблица 31).Таблица 31.
Частота выявления ДНК микроорганизмов по дням болезни убольных буллезно-геморрагической рожей в очагеДеньболезниЧислопробВыявлено микроорганизмов:Str.spp.Staph.spp.ПрочиеВсего40%10%80%23,8%4,76%80,95%2-31030%4-52152,38%61625%06,25%31,25% *38,29%19,1%6,38%63,82%ИТОГО47* - достоверность различий в сравнении с 2-3 д.б. (р=0,044)777.3. Частота выявления ДНК микроорганизмов у больных различными формамирожи.Подавляющее число обследованных больных имели буллезно-геморрагическую формурожи (86,67%), эритематозные формы рожи мы наблюдали редко (13,33%) (Таблица 32).Таблица 32.
Выявление ДНК микроорганизмов при различных формах рожи (n=60)МикроорганизмЭритематозн.Буллез-геморраг.Итого:(n=8)(n=52)(n=60)Streptococcus spp.2 (25%)37 (71,15%) *38 (63,33%)в том числе:1 (12,5%)29 (55,8%)30 (50%)Str.dysgal. equisimilis-2 (3,8%)2 (3,3%)S.pneumoniae-3 (5,8%)3 (5%)1 (12,5%)3 (5,8%)3 (5%)5 (62,5%)29 (55,8%)34 (56,67%)2 (25%)13 (25%)15 (25%)MSSA-10 (19,2%)10 (16,7%)MRSA2 (25%)3 (5,8%)5 (8,3%)MRCoNS3 (37,5%)8 (15,4%)11 (18,3%)S.hominis-4 (7,7%)4 (6,8%)S.epidermidis-1 (1,9%)1 (1,7%)S.capitis-1 (1,9%)1 (1,7%)Staph.spp.-2 (3,8%)2 (3,3%)Klebsiella spp.-2 (3,8%)2 (3,3%)C. mucifaciens1 (12,5%)-1 (1,7%)P. aeruginosa-3 (5,77%)3 (5%)S.pyog.Strep.sppStaphylococcus spp.в том числе S.aureus:Итого:8 (100%)71 (139%) #78(130%)Примечание: * достоверность различий в сравнении с эритематозными формами рожи(р0,05); # - у некоторых больных найдено более одного микроорганизмаПри сравнении пейзажа микрофлоры в очаге местного воспаления установлено, что прибуллезно-геморрагических формах рожи в ПЦР выявляется большое количествострептококков, достоверно у большего числа рожей, в сравнении с эритематознымиформами рожи.
Частота выявления стафилококков достоверно не отличалось при этихформах рожи.78Интересно отметить, что при высеве S.aureus с поверхности очага частотавыявления других видов стафилококков и S.pyogenes методом ПЦР в очаге и кровисоставила 83,87%, что было достоверно выше частоты положительных результатов ПЦРпри высеве с поверхности очага S.epidermidis и S.saprophyticus (кроме S.aureus) (47,06%, р= 0,002) и при отсутствии высева микроорганизмов (47,69%, р = 0,002).
Из этого можнозаключить, что именно обсеменение кожи очага S.aureus сопровождается значительнымприсутствием в пунктате очага ДНК микроорганизмов (S.pyogenes и стафилококковдругих видов).7.4. Клинико-лабораторные особенности рожи в зависимости от выявления S.aureusв ПЦР.Согласнополученнымданным,вторымпочастотевыявлениявПЦРсгибридизационно-флуоресцентной детекцией, после гемолитического стрептококка,оказался S.aureus. В связи с этим были проанализированы особенности клиническоготечения заболевания в зависимости от выявления S.aureus.Согласно данным,приведенным в таблице, больные с выявлением золотистого стафилококка по даннымПЦРв биопробах не отличаются по клинико-лабораторным даннымот больных, укоторых золотистый стафилококк не был выявлен (Таблица 33).Таблица 33.
Клинико-лабораторные показателиу больных рожей в зависимости отвыявления S.aureus методом ПЦР в различных биопробах.Симптомы и лабораторные показателиДНК S.aureus выявленДНК S.aureus не выявлен(n = 11)(n = 9)39,03±0,2438,56±0,1559,36±0,9710±1,191,34±0,412,22±0,288,0±0,748,56±1,17День появления булл2,9±0,503,67±0,55День разрешения булл6,25±0,887,71±1,21Лихорадка:- макс.-длительностьЭритема: -день возникн.-длительностьОбщий анализ крови:Лейкоциты16,9±2,315,6±1,2Эритроциты4,3±0,174,3±0,08Тромбоциты320,3±69,4314,3±27,1Гемоглобин127,5±5,31129,1±2,679СОЭИндекс Кальф-Калиф57,1±12,855,6±5,34,7±0,94,9±0,5Общий анализ мочи:Лейкоциты10,1±4,689,7±2,4Эритроциты10,7±5,469,6±2,7Белок0,55±0,111,04±0,14Биохимический анализ крови:Общий белок69,1±2,765,8±1,1Мочевина4,21±2,249,7±1,17Креатинин136,8±27,6128,2±13,9Билирубин22,3±7,5414,9±1,3АЛТ47,2±13,435,5±3,5АСТ59,9±13,635,6±2,5Холестерин4,6±0,364,5±0,2Протромбин83,2±3,183,6±1,7121,4±16,1103,0±4,666,3±0,76,6±0,2Щелочная фосфатазаГлюкозаПримечание: значимых различий не выявлено.Таким образом, присутствиезолотистого стафилококкау больных рожей вбиопробах не отражалось на клинико-лабораторных параметрах, что могло быть связанос исчезновением из организма к началу исследованияпровоспалительных факторовпатогенности стафилококков при сохранении присутствия генетических маркеров.7.5.ЧастотаосложненийрожипривыявленииубольныхДНКразныхмикроорганизмов.У больных рожей общее число осложнений было наибольшим при выявлении ДНКнескольких микроорганизмов (микстинфекции с участием стафилококков) (53,8%), атакже стрептококков (моно) (50%) и ДНК других микроорганизмов (моно); чтодостовернопревышалочислоосложненийприотсутствиивыявлениямикроорганизмов у больного (5,3%, р ≤ 0,05) (Таблица 34).Число гнойных осложнений было наибольшим при выявлении ДНК толькоДНК80Таблица 34.