Диссертация (1141124), страница 14
Текст из файла (страница 14)
(у двух больных), у одногобольного получен высев стрептококков (S.dysgalactiae subspp.equisimilis) в смыве споверхности очага и в пунктате буллы, а S.pyogenes удалось обнаружить только у двухбольных в пунктатах булл в виде монокультуры. В составе выявленных микстов отмеченысочетаниястафилококковсграмотрицательными микробами и с другимистафилококками и таким образом выявленные сочетания микроорганизмов (8%) невключали S.pyogenes.Следует отметить, что трудности высева S.pyogenes у больных рожей отмечалисьмногими авторами в связи с этим бактериологические исследования у больных рожейобычно не проводятся.Преобладание выявленияS.aureusS.epidermidisиS.saprophyticusнад выявлением(в 2 раза) на поверхности воспалительного очага можно расценивать какотносительную сохранность микробиоценоза кожи у больных рожей (в 40,8% случаев),частично с этим может быть связано практическое отсутствие высева S.pyogenes (2,04%)с поверхности кожи очага. Однако, у 20,45% больных, в отсутствие S.epidermidis иS.saprophyticus выявлены монокультуры S.aureus.Впервые установлено, чтоприсутствие S.aureus у больных рожейнижнихконечностей на поверхности кожи местного воспалительного очага сопровождаетсяболеевысокойлихорадочной реакциейлейкоцитозом, повышениеморганизма больного, более высокимчисла палочкоядерных лейкоцитов, ускорением СОЭ,повышением лейкоцитарного индекса интоксикации (по Кальф-Калиф), щелочнойфосфатазы и мочевины в крови, снижением числа лимфоцитов, большим количествомэритроцитов в моче, чем у больных с отсутствием высева S.aureus с поверхности очага (р≤0,05).Этосвидетельствуетотом,чтовыявляемыйS.aureusусиливаетобщеинтоксикационные синдром и воспалительные реакции в организме больных рожейнижнихконечностей, что отражается на изменении соответствующих показателей.Высев S.aureus с поверхности кожи в области местного воспалительного очага может бытьадекватным признаком более выраженной воспалительной реакции и общей интоксикацииу больных рожей нижних конечностей, преимущественно буллезно-геморрагическихформ.69Относительное число больных с эритематозными формами рожи, у которых быливыявлены микроорганизмы (13,46%), значительно уступало числу больных буллезногеморрагическими формами рожи (наиболее частой форме среди обследованныхгоспитализированных больных) (59,62%).При этом в области местного очага воспаления стрептококки найдены только прибуллезно-геморрагической роже (7,6%), стафилококки – достоверно чаще при буллезногеморрагической роже, чем при эритематозной (89,66% и 11,54% , соотв.), при этомподавляющими (до 50 %) были выявлены S.aureus.Впервые установлено, что наибольшая частота осложнений отмечена у больныхрожей с отрицательными результатами посевов с кожи в области очага, в то время какприсутствиеS.epidermidis и/или S.saprophyticus (резидентных стафилококков кожи)сопровождается наименьшим числом осложнений (17,7%).
Это может быть обусловленопроявлением антагонистических свойств эпидермальных стафилококков, наиболеезначимых представителей сапрофитов кожи, по отношению к стрептококкам [254], чтоприводит к меньшему числу осложнений. При отсутствииповерхностикожиполностьюпроявляется, вероятно,этих стафилококков напатогенныйпотенциалстрептококков.В различные сроки от начала заболевания число выявленных стрептококков,стафилококков и прочих микроорганизмов по данным бактериологического исследованияпрактически не различалось.Таким образом, впервые с использованием широкого спектра тест-систем длясовременных методик бактериологического исследования охарактеризован пейзажмикроорганизмов, присутствующих в тканях местного воспалительного очага и крови убольных рожей нижних конечностей.Проведенное бактериологическое исследование сиспользованиемширокогоспектра тест-систем и современных методик позволило у госпитализированных больныхрожей нижних конечностей охарактеризовать пейзаж микроорганизмов, присутствующихв тканях местного воспалительного очага и крови, установить важное клиническоезначение присутствия разных видов стафилококков на коже в области очага, усилениеобщеинтоксикационногосиндромаивоспаленияпоклинико-лабораторнымпоказателям в случае присутствия на коже в области очага культивируемых S.aureus.Эти данные имеют большое значение для оценки клиники и диагностикисопутствующей микрофлоры при роже в области очага и прогноза возможныхосложнений.70ГЛАВА 7.
Выявление ДНК микроорганизмов методом ПЦР с гибридизационнофлуоресцентной детекцией в режиме реального времениу больных рожейнижнихконечностейВыявлениеДНК микроорганизмов(Streptococcus sp., S.pyogenes, S.pneumonia,S.dysgalactiae subsp. equisimilis, Staphylococcus sp., S.aureus (MSSA, MRSA), MRCoNS,S.capitis, S.hominis, Enterococcus sp., H.influenzae, Proteus sp., E.coli, Klebsiella sp.,P.aeruginosa, Corynebacterium sp., Corynebacterium mucifaciens, Cloacibacterium normanense,E.coli) проводили в крови, в пунктатах изочага местного воспаления и вне очагаместного воспаления, а также в пунктатах содержимого булл у больных рожей.7.1.
Частота выявления микроорганизмов в различных биопробах больных рожей.ДНК тех или иных микроорганизмовиз числа исследованныхметодом ПЦР сгибридизационно-флуоресцентной детекцией в 4 биосредах найдены у 66,67% больных. Внекоторых пробах выявленные ДНК более 1 микроорганизма. В общей сложности в 4биопробах число выявлено 79 культур микроорганизмов, общее число положительныхпроб составило 40,91%.
В крови число положительных результатов составляло 22,81%, впунктатах из очага местного воспаления – 63,27%, в пунктатах вне очага местноговоспаления – 66,67% и в пунктатах булл – 94,44%. (Таблица 25).Наиболее высокойбыла частота выявления ДНКразличных микроорганизмов впунктате булл, ниже - частота их выявления в пунктатах очага и наиболее низкаячастота - в крови.
Это свидетельствует о том, чтодостоверно болееинформативноисследовать содержимое булл и пунктаты подкожной клетчатки в области местноговоспалительного очага, в сравнении с исследованием крови (р ≤ 0,05).В крови с использованием ПЦР идентифицированы - S.hominis – 4 (7,02%) и уединичныхбольных-Str.spp,Str.pyogenes,Str.pneumonia,MRCoNS,S.capitis,Cloacibacterium normanense, Corynebacterium mucifaciens (всего – 12,28%) и один микст S.aureus + S.epidermidis (1,75%) (Таблица 26).В пунктатах из области местного воспалительного очага методом ПЦР обнаруженыстрептококки - 40,82%, в том числе S.pyogenes (28,57%), стафилококки - 16,66%, а такжеPseudomonas aeruginosa – 4,08% и Klebsiella spp. - 2,04%.
В том числе у четырех больныхнайденымиксты:MRSA+MRCoNS,S.pyogenes+MRCoNS,P.aeruginosa и Staph.spp. + S.pyogenes (всего в 8,16% случаев)S.pyogenes+(Таблица 27).MSSA+71Таблица 25. Выявление ДНК разных возбудителей методом ПЦР в различномбиологическом материале у больных рожей (60 больных)ИсследуемыйЧислоПоложительных Выявленных мик-биоматериалпробпроб,Кровьабс.( %)робов, абс. (%)5712 (21,05%)13 (22,81%)Пунктат подкожной клетчатки вобласти местноговоспалительного очагаПунктат вне местноговоспалительного очага4926 (53,06%)*31 (63,27%)*#3014 (46,67%)*20 (66,67%)*Пунктат булл18Итого15411 (61,11%)*63 (40,91%)17 (94,44%)*83 (51,95%)Примечание: * - достоверность различий в сравнении с кровью (р ≤ 0,05);# - достоверность различий в сравнении с пунктатами булл ( р < 0,05)Таблица 26. Частота выявления ДНК микроорганизмов в крови больных рожей (n=57)МикроорганизмЧисло положительных пробStreptococcus spp.в том числе:3 (5,26%)S.pyogenes1 (1,75%)S.pneumoniae1 (1,75%)Strep.
spp.1 (1,75%Staphylococcus spp.В том числе:6 (10,53%)MRCoNS1 (1,75%)S.hominis*4 (7,02%)S.capitis*1 (1,75%)Cloacibacterium normanense*1 (1,75%)Corynebacterium mucifaciens*1 (1,75%)Микст: S.aureus+ S.epidermidis1 (1,75%)Итого:* по результатам секвенирования12 (21,05%)72Таблица 27. Частота выявления ДНК микроорганизмов в пунктатах в областиместного воспалительного очага у больных рожей (n=49)МикроорганизмЧисло положительныхпробStreptococcus spp.20 (40,82%)в том числе:S.pyogenesS.pneumoniae14 (28,57%)1 (2,04%)S.dysgalacticeae equisimilis*2 (4,08 %)Strept spp.3 (6,12%)Staphylococcus.spp.в том числе:8 (16,33%) +S.aureus MSSA3 (6,12%)S.aureus MRSA1 (2,04%)MRCoNS3 (6,12%)Staph.spp.1 (2,04%)Klebsiella spp.1 (2,04%)Pseudomonas aeruginosa2 (4,08%)Итого:31 (63,27%)Включая микст:S.aureus MRSA+ MRCoNs1 (2,04%)S.pyogenes+ MRCoNS1 (2,04%)S.pyogenes + MSSA + P.aeruginosa1 (2,04%)Staph.spp.+S.pyogenes1 (2,04%)Примечание: * - по результатам секвенирования; + - достоверные различияв сравнении с частотой выявления стрептококков (р = 0,014).Частотавыявлениястрептококковдостовернопревышалачастотувыявлениястафилококков (р=0,014).