Диссертация (1140935), страница 15
Текст из файла (страница 15)
Это может являться, в частности, пусковымфактором нарушения липидного обмена, развития атеросклероза при ХПН, чтоутверждается некоторыми авторами [46, 300]. Стоит отметить, что повышениеконцентрации продуктов ПОЛ в изопропанольной фракции плазмы можетсвидетельствовать о повреждении мембран клеток крови, эндотелиоцитов.89Таблица 23 - Содержание продуктов ПОЛ в гептановой фракции плазмы приэкспериментальной ХПН (M±m)ПоказателиГруппа 1Группа 2Л/оперир.ХПН(n=10)(n=10)Е220, у.е./мл0,60±0,180,79±0,08>0,05Е232, у.е./мл0,28±0,100,83±0,03<0,05Е278, у.е./мл0,13±0,020,68±0,06<0,05Е400, у.е./мл0,036±0,0090,038±0,009>0,05ДК, е.и.о.0,47±0,071,10±0,07<0,05КД и СТ, е.и.о.0,30±0,040,92±0,12<0,050,083±0,0300,052±0,015>0,05ШО, е.и.о.Значение рПримечание.
ДК – относительное содержание диеновых конъюгатовЕ232/Е220; КД и СТ – относительное содержание кетодиенов и сопряженныхтриенов Е278/Е220; ШО – относительное содержание оснований ШиффаЕ400/Е220; р - показатель значимости различий между группами по критериюМанна-Уитни.Таблица 24 - Содержание продуктов ПОЛ в изопропанольной фракции плазмыпри экспериментальной ХПН (M±m)ПоказателиГруппа 1Группа 2Значение рЛ/оперир.ХПН(n=10)(n=10)Е220, у.е./мл2,40±0,224,46±0,19<0,05Е232, у.е./мл0,77±0,111,88±0,15<0,05Е278, у.е./мл0,49±0,061,43±0,21<0,05Е400, у.е./мл0,048±0,0130,13±0,06>0,05ДК, е.и.о.0,31±0,020,42±0,02<0,05КД и СТ, е.и.о.0,20±0,020,32±0,04<0,0590ШО, е.и.о.0,022±0,0080,029±0,013>0,05Примечание. ДК – относительное содержание диеновых конъюгатовЕ232/Е220; КД и СТ – относительное содержание кетодиенов и сопряженныхтриенов Е278/Е220; ШО – относительное содержание оснований ШиффаЕ400/Е220; р - показатель значимости различий между группами по критериюМанна-Уитни.Концентрация продуктов ПОЛ в гептановой фракции липидного экстракталимфоцитов периферической крови при экспериментальной ХПН статистическизначимо не изменяется по сравнению с контрольной группой (таблица 25).Таблица 25 - Содержание продуктов ПОЛ в гептановой фракции лимфоцитов приэкспериментальной ХПН (M±m)ПоказателиГруппа 1Группа 2Значение рКонтрольХПН(n=10)(n=10)Е220, у.е./мл2,47±0,341,53±0,23<0,05Е232, у.е./мл1,09±0,140,78±0,11>0,05Е278, у.е./мл0,67±0,140,42±0,05>0,05Е400, у.е./мл0,16±0,040,09±0,02>0,05ДК, е.и.о.0,47±0,050,55±0,04>0,05КД и СТ, е.и.о.0,26±0,030,33±0,06>0,05ШО, е.и.о.0,07±0,010,08±0,02>0,05Примечание.
ДК – относительное содержание диеновых конъюгатовЕ232/Е220; КД и СТ – относительное содержание кетодиенов и сопряженныхтриенов Е278/Е220; ШО – относительное содержание оснований ШиффаЕ400/Е220; р - показатель значимости различий между группами по критериюМанна-Уитни.Изучение содержания продуктов ПОЛ в изопропанольной фракциилипидного экстракта лимфоцитов периферической крови выявило значимое91повышение концентрации первичных, вторичных и конечных продуктов ПОЛ вабсолютных величинах и в пересчете на индексы окисления (таблица 26).Накопление продуктов ПОЛ в изопропанольной фракции липидного экстракталимфоцитов периферической крови может отражать повреждение клеточныхмембран и мембран органелл и, как следствие, приводить к гибели лимфоцитовпутем апоптоза и/или некроза.Таблица 26 - Содержание продуктов ПОЛ в изопропанольной фракции липидногоэкстракта лимфоцитов при экспериментальной ХПН (M±m)ПоказателиГруппа 1Группа 2Значение рКонтрольХПН(n=10)(n=10)Е220, у.е./мл2,83±1,093,64±0,65>0,05Е232, у.е./мл1,38±0,415,32±0,91<0,05Е278, у.е./мл0,99±0,342,13±0,40<0,05Е400, у.е./мл0,18±0,040,64±0,10<0,05ДК, е.и.о.0,64±0,061,62±0,19<0,05КД и СТ, е.и.о.0,39±0,030,66±0,11<0,05ШО, е.и.о.0,10±0,020,28±0,14<0,05Примечание.
ДК – относительное содержание диеновых конъюгатовЕ232/Е220; КД и СТ – относительное содержание кетодиенов и сопряженныхтриенов Е278/Е220; ШО – относительное содержание оснований ШиффаЕ400/Е220; р - показатель значимости различий между группами по критериюМанна-Уитни.Как известно, баланс процессов свободно-радикального окисления в кровискладывается не только из активности прооксидантных систем генерации АФК.Также имеет значение активность ферментов антиокислительной защиты, в томчисле, СОД и каталазы.
Установлено, что при экспериментальной ХПН значимоснижается активность СОД и каталазы в сыворотке, что свидетельствует обугнетенииантиоксидантнойзащиты(таблица27).Уменьшение92антиокислительной активности в крови может выступать одной из причинувеличения содержания продуктов ПОЛ в плазме и в лимфоцитах и служитьмаркером оксидативного стресса при ХПН.Таблица 27 - Показатели активности ферментов антиокислительной защиты вкрови при экспериментальной ХПН (M±m)ПоказателиГруппа 1Группа 2Значение рЛ/оперир.ХПН(n=24)(n=10)СОД , ЕД/мл1,58±0,090,96±0,19<0,05 (WW)Каталаза, мкат/л20,27±1,0515,45±1,11<0,05Примечание.
р - показатель значимости различий между группами покритериям Манна-Уитни и Вальда-Вольфовитца.Для определения наличия и характера связи между концентрациейпродуктов ПОЛ в плазме, активностью антиокислительных ферментов в крови ипоказателямиврожденногоиадаптивногоиммунногоответаприэкспериментальной ХПН проведен корелляционный анализ (таблица 28).Концентрация первичных продуктов ПОЛ в гептановой фракции плазмы имеетстатистически значимую положительную связь средней силы с активностьюфагоцитоза и средней силы отрицательную связь с количеством лимфоцитов вкрови.
Концентрация первичных продуктов ПОЛ в изопропанольной фракцииплазмы имеет положительную средней силы связь с интенсивностью фагоцитозаи отрицательную связь средней силы с количеством Т-лимфоцитов (CD3+).Концентрация вторичных продуктов ПОЛ в гептановой фракции плазмы имеетотрицательную связь средней силы с концентрацией СОД сыворотки. Междуконцентрацией вторичных продуктов ПОЛ в изопропанольной фракции плазмывыявлена обратная связь средней силы с общим количеством лимфоцитов,количеством Т-лимфоцитов (CD3+), В-лимфоцитов (CD45RA+) в крови иконцентрацией СОД в сыворотке.93Таблица 28 - Корреляционная матрица между содержанием первичных ивторичных продуктов ПОЛ в плазме, показателями врожденного и адаптивногоиммунного ответа и активностью антиокислительных ферментов в крови крыс сэкспериментальной ХПНПоказателиДК вДК вгептановойизопропан.фракциифракциифракциифракцииплазмы,плазмы,плазмы,плазмы,е.и.о.е.и.о.е.и.о.е.и.о.R= 0,57R= 0,45R= 0,44R= 0,42R= 0,44R= 0,67R= 0,22R= 0,46Фагоцитарное число, у.е.R= 0,08R= 0,41R= 0,20R= 0,09НСТ-тест спонтанный,R= 0,10R= 0,37R= 0,27R= 0,24R= 0,45R= 0,17R= 0,2R= 0,14R= 0,09R= 0,15R= 0,36R= 0,07R= 0,26R= 0,06R= 0,31R= 0,06Лимфоциты, • 109/лR= -0,66R= -0,29R= -0,23R= -0,60CD3+, • 109/лR= -0,27R= -0,57R= -0,15R= -0,45CD45RA+, • 109/лR= -0,25R= -0,37R= -0,15R= -0,47СОД , ЕД/млR= -0,49R= -0,46R= -0,56R= -0,50Каталаза , мкат/лR= -0,12R= -0,31R= -0,32R= -0,30Активность фагоцитоза,КД и СТ вКД и СТ вгептановой изопропан.%Интенсивностьфагоцитоза, у.е.активность, %НСТ-тест спонтанный,интенсивность, у.е.НСТ-тест инд.,активность, %НСТ-тест инд.,интенсивность, у.е.Примечание.
Указаны значения коэффициента корреляции Спирмена.Полужирным шрифтом выделены статистически значимые связи.94Таким образом, при экспериментальной ХПН выявлена связь междуконцентрациейпервичныхивторичныхпродуктовПОЛвплазмеипоглотительной способностью нейтрофилов в крови, общим количествомлимфоцитов, Т-лимфоцитов (CD3+) и В-лимфоцитов (CD45RA+) в крови.Причинами накопления продуктов ПОЛ в плазме могут выступать блокадаантиоксидантногоферментаСОД, снижение экспрессиигенаСОД-2внейтрофилах, а также снижение поступления в организм естественныхантиоксидантов с растительной пищей у больных с ХПН [241].3.2.5. Показатели гибели лимфоцитов периферической крови приэкспериментальной хронической почечной недостаточностиПолагаем, что развитие лимфоцитопении при экспериментальной ХПНможет быть связано с усилением гибели лимфоцитов путем апоптоза и/илинекроза в условиях гиперазотемии, накопления других метаболитов в крови,активации процессов свободно-радикального окисления в плазме крови и влимфоцитах.
Результаты оценки гибели лимфоцитов путем апоптоза и некрозаметодом проточной цитометрии при экспериментальной ХПН представлены втаблице 29. Проведена дифференцировка лимфоцитов по 3 фенотипам. ФенотипAnnexin-5-FITC–/7-AAD– соответствует интактным клеткам, фенотип Annexin-5FITC+/7-AAD– соответствует клеткам с ранними признаками апоптоза, клетки споздними признаками апоптоза и частично некротические клетки соответствуютфенотипу Annexin-5-FITC+/7-AAD+.Выявлено, что при экспериментальной ХПН статистически значимоуменьшается количество интактных лимфоцитов, увеличивается количестволимфоцитов с ранними признаками апоптоза, с поздними признаками апоптоза ичастично некротических лимфоцитов.95Таблица 29 - Показатели гибели лимфоцитов периферической крови приэкспериментальной ХПН (M±m)ПоказателиAnnexin-5-FITC–/7-AAD–,Группа 1Группа 2ЗначениеЛ/опериров.ХПНр(n=6)(n=6)92,79±0,8885,44±0,78<0,057,00±0,8513,60±0,71<0,050,20±0,050,96±0,09<0,05% клетокAnnexin-5-FITC+/7-AAD–,% клетокAnnexin-5-FITC+/7-AAD+,% клетокПримечание.
![](https://s.studizba.com/z.php?f=/templates/si/i/noavatar.png&w=100&h=100&t=1"){kind=avatar}
