Диссертация (1140859), страница 9
Текст из файла (страница 9)
Иммунологические методы исследованияОценку местного иммунитета полости рта проводили по уровням S-IgA,IgA, IgG в слюне, по фагоцитарной функции нейтрофилов с определениемфагоцитарногоиндекса(ФИ)ифагоцитарногочисла(ФЧ),изучаясубпопуляционный состав нейтрофилов и учитывая количество поздних (ENPO) и ранних двойных нейтрофилов (ДРОН). Также оценке подвергалисьвзаимосвязи между секреторными, гуморальными (S-IgA/IgG, S-IgA/IgA) иклеточными (S-IgA/ФЧ, IgG/ФИ, IgG/ФЧ) факторами местной защиты.Исследования уровней S-IgA, IgA, IgG в слюне выполняли до операции,сразу после операции и на 7 сутки после оперативных вмешательств с помощьютест системы «Вектор-Бест».Перед забором слюны производили трехкратное полоскание полости ртафизиологическим раствором.
Забор образцов смешанной слюны проводили безстимуляции в течение 5 минут путём сплёвывания в стерильную стекляннуюпробирку. Затем полученную смешанную слюну центрифугировали и отделялинадосадочную жидкость (супернатант).48Материал отбирали непосредственно перед исследованием и немедленнодоставляли в лабораторию. При невозможности быстрой доставки материалзамораживали при –20 °С. Последующую транспортировку осуществляли взамороженном состоянии (в термосе со льдом).После однократногоразмораживания методом иммуноферментного анализа определяли уровни SIgA, IgA, IgG.Для проведения сравнительного анализа данных осуществляли заборобразцов смешанной слюны у 5 здоровых пациентов, которые не имели ванамнезе какой-либо соматической патологии и воспалительных изменений вполости рта.Для определения фагоцитарного индекса (ФИ) и фагоцитарного числа(ФЧ) применяли способ определения фагоцитарной активности нейтрофиловполости рта, предложенный Кукушкиным В.Л с соавторами (Патент №2093827,1993г.).
Способ заключался в том, что после предварительного очищенияполости рта от механических примесей, пациенты в рот набирали 10 млраствора Хенкса, затем проводили интенсивное полоскание в течение однойминуты, после чего смывную жидкость сплевывали в пробирку. Далеецентрифугированием при 200g в течение 10 минут производили осаждениеклеток смыва. Также производили забор слюны после забора смыва ицентрифугировали ее при 200g в течение 15 минут, после чего добавляли 0,3 млее к осадку.
Далее производили ресуспендирование клеточного осадока исмешивали 0,1 мл получившейся суспензии лейкоцитов с 0,1 мл 0,05-нойсуспензии микробных клеток. Следующим этапом было центрифугированиесмеси при 200g в течение 5 минут и инкубирование при 37oC в течение 30минут. В конце клетки осадка подвергались фиксации иокрашиванию постандартной методике (азур-эозин Романовского-Гимза), после чего ихмикроскопировали при световой иммерсии х90.Исследуя мазок, производили подсчет фагоцитарного индекса (ФИ)фагоцитирующих нейтрофилов на 100 клеток и фагоцитарного число (ФЧ) среднее число микробов, которое поглощаются одним нейтрофилом.49Оценку субпопуляционного состава нейтрофилов проводили с помощьюэритроцитарных маркеров в реакциях розеткообразования с выявлением числазрелых нейтрофилов (EN-PO) в реакции спонтанного розеткообразования иранних нейтрофилов (ДPOH) в реакции комплементарного розеткообразования.2.3 Биохимические методы исследованияБиохимическиеисследованияпроводилинаследующихбазах:Центральная научно-исследовательская лаборатория ФГБОУ ВО РязГМУМинздрава России; Научно-клинический центр гематологии, онкологии ииммунологии ФГБОУ ВО РязГМУ Минздрава России.Норма кортизола в крови не определена международными стандартами изависит от методики и реактивов, применяемых в лаборатории.Определение уровня кортизола и АКТГ в наших исследованияхосуществляли иммуноферментным анализом с конкурентным связыванием наавтоматическом иммунохимическом анализаторе Access 2, Beckman Coulter.
Дляэтих методик приняты следующие нормы: нормы уровня кортизола у взрослых(мужчины и женщины) с 7 до 10 часов утра составляет 123-626 нмоль/л; нормыуровня АКТГувзрослых (мужчины и женщины) с 7 до 10 часов утрасоставляет 1,6-13,9 пмоль/л.Забор крови на кортизол и АКТГ осуществляли в соответствии соследующими инструкциями: пациенты сдавали кровь на голодный желудок;избегали физических нагрузок, откладывали посещение спортзала за 2 суток доисследования; не курили за сутки до анализа; за неделю до анализа непроводилиисследованияc использованием радиации;неупотреблялиалкогольные напитки; забор крови пациентам производли в утренние часы (8001000).502.4 Характеристика лазерных аппаратовЛазерная система PICASSO Lite (AMD LASERS™, LLCЮ (США)PICASSO Lite - стоматологический лазер для оперативных вмешательствна мягких тканях (Рис.
2). Но PICASSO Lite- это хирургический приборширокого спектра применения, который применяется для рассечения мягкихтканей в ротовой полости, коррекции линии улыбки, местной стерилизации идезинфекции. Лазеры PICASSO Lite используют твердый диод, как источниклазерной энергии, которая доставляется к операционному полю с помощьюгибкого оптического волокна, зафиксированного в специальном наконечнике(ручке).В таблице 2 представлены технические характеристики лазерногоприбора «PICASSO Lite».Рисунок 2 - Диодный лазер «PICASSOLite»Приборы серии PICASSO Lite имеют несколько степеней защиты:- ключ защиты, который должен храниться только у пользователя вбезопасном месте и служит для предупреждения несанкционированногоиспользования прибора, имеет два режима «ВКЛ» и «ВЫКЛ»;- кнопка экстренного выключения, которая служит для мгновенноговыключения прибора в экстренной ситуации, нажатие на кнопку выключаетприбор, повторное нажатие – включает, нормальное состояние кнопки вположении «ОТЖАТА», что необходимо контролировать перед включениемприбора;51Таблица 2 - Технические характеристики лазерного прибора «PICASSO Lite».ХарактеристикаЗначенияКлассификация лазера4 класс опасностиМатериалGaAlAsДлина волны808+10 нмРежимы излученияПостоянное или импульсноеМаксимальная выходная мощность2,5Вт применяя оптическое волокноизлучения400нм или 600нм ±20%Вывод излучениязеркальный манипуляторИнтервал между импульсами:30млсекДлительность импульса30млсек.Допустимые диаметры оптическоговолокна200 – 1000нм.Видмногофункциональный.Яркость прицельного луча, макс.5мВт, 630-670нм ±20%.Режим дезинфекциипостоянное излучение мощностью 0,5ВтВес, габариты1кг; 240 х 150 х 160ммВнешние разъемы:педаль управленияЛазерное излучение-системаудаленногоКласс IV (согласно классификацииСША)контроля,котораяотключаетприборпринесанкционированном доступе в помещение, где проводится работа прибором;- защитный кронштейн ножной педали, который предотвращает случайноенажатие на педаль и включение лазерного излучения;- кнопка состоянияприборанаинтерактивномдисплее,позволяющаявключитьлазерноеизлучение только в состоянии «ГОТОВ».Показания к клиническому использованию лазера.
Прибор «PICASSO Lite»- медицинское оборудование, предназначенное для разрезания, отсекания,выпаривания, удаления и коагуляция мягких тканей ротовой полости включая:52создание десневого края для снятия оттиска; гингивектомия, гингивопластика;гемостазис и коагуляция; инцизионная и эксцизионная биопсия; обнажениенепрорезавшегося зуба; удаление фибромы; френектомия и френотомия;получение доступа к импланту; разрез и дренаж абсцессов; лейкоплакия;оперкулектомия; оральная папилектомия; пульпотомия; пульпотомия какприложение к внутриканальной терапии; снижение гипертрофии десен;удлинение коронковой части зуба за счет удаления десны; лечение язв, ран,герпесных и афтозных язв слизистой оболочки полости рта; вестибулопластика.Лазерные периодонтальные процедуры включают: удаление болезненныхили воспаленных очагов мягких тканей в пародонтальных карманах; лазерныйкюретаж мягких тканей; лазерное удаление нездоровых, инфицированных,воспаленных инекротическихмягкихтканейвнутри пародонтальныхкарманов; удаление сильно воспаленных, отечных тканей пораженныхбактериями внутри десневых карманов и связок эпителия.Противопоказания.
Все процедуры с помощью лазеров PICASSO Liteдолжны проводиться профессиональными стоматологами с учетом всех мерпредосторожности и должны соответствовать всем юридическим документам,действующим в клинике. На пациентах группы риска процедуры должныпроводиться полностью обоснованно и с полным пониманием последствий ещедо начала процедуры лечения. Врач перед применением лазера долженосновательно изучить и понимать историю болезни каждого пациента.Осторожно провести предварительную процедуру перед началом лечения сминимальными начальными параметрами на маленьком участке. Условиемпротивопоказания может являться аллергическая реакция к локальной илиместной анестезии, сердечные болезни, заболевания легких, обильноекровотечение, синдром апноэ, или слабая иммунная система.Перед лечением рекомендуется получить разрешение пациента наиспользование лазера.53Лазерная система Smart 2940D plusОдной из составляющих системы Smart 2940D plus (рис.3) являетсяEr:YAG-лазер,который генерирует невидимое инфракрасное излучение.Диодный лазер в данной системе излучает красный свет.
![](https://s.studizba.com/z.php?f=/templates/si/i/noavatar.png&w=100&h=100&t=1"){kind=avatar}
