Диссертация (1140426), страница 14
Текст из файла (страница 14)
контрольнымиподгруппами.⃰ ⃰ – статистически достоверные различия (при p<0.05) между контрольной группойI.A. и группой лиц, страдающих бесплодием.Рисунок5187МУЖСКИЕ ПОЛОВЫЕ КЛЕТКИДанные статистического анализа (при p<0.05) количества сперматогонийпоказывают снижение их числа в 1,7 раза при необструктивнойазооспермии (19.0±0.1) по сравнению с контрольной группой (32.8±0.31/31.1±0.2) (табл. 12).Таблица 12Количество половых клеток в извитом семенном канальцев нормальном сперматогенезе и при азооспермииНОРМАЛЬНЫЙИдиопатическоеклеткиСПЕРМАТОГЕНЕЗбесплодие(количество клеток)(количество клеток)22 – 35 лет61 – 74 годаСперматогонииСперматоциты IСперматоциты IIСперматиды32.8±0.3122.8±0.1142.6±0.298.2±0.1331.1±0.2 ⃰21.1±0.3 ⃰38.4±0.11 ⃰91.6±0.1 ⃰19.0±0.1 ⃰ ⃰000⃰ – статистически достоверные различия (при p<0.05) между I.A. и I.Б.
контрольными подгруппами.⃰ ⃰ – статистически достоверные различия (при p<0.05) между контрольной группой I.A. и группой лиц,страдающих бесплодием.Высокие значения индекса пролиферации (Ki-67) половых клетокуказывает на выраженную митотическую активность сперматогоний умужчин 22 – 35 лет (42.0±0.34%) в контрольной группе и снижение данногопоказателя почти в 3,5 раза при гипосперматогенезе и блоке созревания(15.0±0.1%, 12.0±0.1%) (табл.
13) и (рис. 52).Таблица 13Доля сперматогоний, ИГХ-позитивных на Ki-67в нормальном сперматогенезе и при идиопатическом бесплодии (%)ИдиопатическоеНОРМАЛЬНЫЙбесплодиеклеткиСПЕРМАТОГЕНЕЗ22 – 35 лет61 – 74 года42.0±0.3434.1±0.6 ⃰12.0±0.1 ⃰ ⃰Сперматогонии⃰ – статистически достоверные различия (при p<0.05) между I.A. и I.Б. контрольнымиподгруппами.⃰ ⃰ – статистически достоверные различия (при p<0.05) между контрольной группойI.A.
и группой лиц, страдающих бесплодием.88Рисунок 52Проапоптотический индекс (p53) сперматогоний в контрольной I.A.(57.2±0.66%; у пожилых – 12.2±0.3%) группе выше чему у сперматоцитовпервого порядка в 2,0 раза (28.5±0.5%) и в 3,9 раза у сперматоцитов второгопорядка (14.5±0.33%). Количество окрашенных на р53 сперматогоний принеобструктивной азооспермии в 2,6 раза выше, чем в контроле у мужчин 22– 35 лет (табл.14) и (рис. 53 и 55).Таблица 14Доля ИГХ-позитивных клеток семенных канальцев на р53в нормальном сперматогенезе и при идиопатическом бесплодии (%)группаI.А. группа (нормальный сперматогенез, 22 – 35 лет), половые клеткиI.Б.
группа (нормальный сперматогенез, 61 – 74 года), половые клеткиII группа (22 – 35 лет), гипосперматогенез; сперматогонии, сперматоциты III группа (22 – 35 лет), блок созревания; сперматогонииII группа (22 – 35 лет), фокальный вариант СКС; сперматогонииII группа (22 – 35 лет), классический вариант СКС; клетки Сертолир53 (%)17.2±0.338.1±0.22 ⃰40.0±0.44 ⃰ ⃰64.3±0.39 ⃰ ⃰72.0±0.41 ⃰ ⃰49.2±0.4 ⃰ ⃰⃰ – статистически достоверные различия (при p<0.05) между I.A. и I.Б. контрольными подгруппами.⃰ ⃰ – статистически достоверные различия (при p<0.05) между контрольной группой I.A. и группой лиц,страдающих бесплодием.Рисунок 5389Анализ маркирования на Bcl-2 показывает, что антиапоптотическаяактивность превалируетв половых клетках у мужчин 22 – 35 лет(43.2±0.44%), снижается в пожилом возрасте (14.1±0.2%) и практическиисчезает на всех стадиях нарушенного сперматогенеза (1.0±0.1%).
ДоляИГХ-позитивных половых клеток на Bcl-2 в пожилом возрасте составило:сперматогонии – 11.3±0.1%, сперматоциты I – 53.2±0.3%, сперматоциты II –27.4±0.2%, сперматиды – 9.1±0.3%. Таким образом, в норме наибольшейантиапоптотической активностью обладают сперматоциты первого порядка(у молодых – 46.0±0.55%) – клетки, вступившие в редукционное делениемейоза (табл. 15) (рис. 54 и 55).Таблица 15Доля ИГХ-позитивных клеток семенных канальцев на Bcl-2в нормальном сперматогенезе и при идиопатическом бесплодии (%)группаI.А.
группа (нормальный сперматогенез, 22 – 35 лет), половые клеткиI.Б. группа (нормальный сперматогенез, 61 – 74 года), половые клеткиII группа (22 – 35 лет), гипосперматогенез; сперматогонии, сперматоциты III группа (22 – 35 лет), блок созревания; сперматогонииII группа (22 – 35 лет), фокальный вариант СКС; сперматогонииII группа (22 – 35 лет), классический вариант СКС; клетки СертолиBcl-2 (%)43.2±0.4414.1±0.2 ⃰1.0±0.1 ⃰ ⃰000⃰ – статистически достоверные различия (при p<0.05) между I.A. и I.Б.
контрольными подгруппами.⃰ ⃰ – статистически достоверные различия (при p<0.05) между контрольной группой I.A. и группой лиц,страдающих бесплодием.Рисунок 5490Показательмитохондриальногопутизапрограммированнойгибели(caspase-9, каспаза-9) в сперматогониях с нормальным сперматогенезомнаходится примерно на одном уровне (доля окрашенных сперматогонийсоставляет у молодых мужчин – 39.5±0.33 %, у пожилых – 35.6±0.44 %) ивозрастает и при блоке созревания и фокальном варианте Сертоликлеточного синдрома (64.3±0.39% и 72.0 ±0.41 % соответственно) (табл.
16)(рис. 55). Доля иммуномечения других видов половых клеток в нормальномсперматогенезе показана в табл. 16а.Таблица 16Доля ИГХ-позитивных клеток семенных канальцев на caspase-9в нормальном сперматогенезе и при идиопатическом бесплодии (%)группаcaspase-9 (%)39.5±0.33I.А. группа (нормальный сперматогенез, 22 – 35 лет), сперматогонии35.6±0.44 ⃰I.Б. группа (нормальный сперматогенез, 61 – 74 года), сперматогонии22.0±0.22 ⃰ ⃰II группа (22 – 35 лет), гипосперматогенез; сперматогонии, сперматоциты I64.3±0.39⃰ ⃰II группа (22 – 35 лет), блок созревания; сперматогонии72.0±0.41⃰ ⃰II группа (22 – 35 лет), фокальный вариант СКС; сперматогонии56.2±0.2⃰ ⃰II группа (22 – 35 лет), классический вариант СКС; клетки Сертоли⃰ – статистически достоверные различия (при p<0.05) между I.A.
и I.Б. контрольными подгруппами.⃰ ⃰ – статистически достоверные различия (при p<0.05) между контрольной группой I.A. и группой лиц,страдающих бесплодием.Таблица 16.а.Доля ИГХ-позитивных половых клеток семенных канальцев на caspase-9в нормальном сперматогенезе (%)группасперматогониисперматоциты Iсперматоциты IIсперматиды22 – 35 лет39.5±0.3314.0±0.312.0±0.313.0±0.361 – 74 года35.6±0.44 ⃰31.0±0.5 ⃰31.0±0.5 ⃰0⃰ – статистически достоверные различия (при p<0.05) между I.A. и I.Б. контрольными подгруппами.Резюмируя анализ распределения белков-регуляторов биологическизначимых процессов в половых клетках у мужчин 22 – 35 лет, можносделать заключение, что сперматогонии относятся к самой обновляющейсяклеточной популяции, обеспечивающие баланс между митотической иапоптотической активностями, необходимого для последующих клетоксперматогенеза: индекс пролиферации/индекс апоптоза – 42.0±0.34%/9125.2±0.44%.
Аналогичный баланс отмечается и у пожилых мужчин: индекспролиферации/страдающихиндексапоптозаидиопатическойпролиферативнойактивности–34.1±0.6%/18.1±0.33%.Улиц,азооспермией,обнаруженоснижениесперматогоний(12.0±0.1%).Учитываяданные про- и антиапоптотической активности сперматогоний прибесплодии можно констатировать дисбаланс –преобладание процессаапоптоза над пролиферацией.Показатели маркера плюрипотентности мужских гамет (CD117)представлены в табл.
17 и на рис. 55. Указанный фактор в половых клеткахпри всех морфологических формах идиопатического бесплодия необнаружен. Следует отметить мизерное иммуномечение на CD117 всперматогониях и сперматоцитах первого порядка в пожилом возрасте иснижение его экспрессии в сперматоцитах второго порядка (20.1±0.33%) посравнению с молодыми мужчинами (55.0±0.55%).Таблица 17Доля ИГХ-позитивных клеток семенных канальцев на CD117в нормальном сперматогенезе и при идиопатическом бесплодии (%)группасперматогониисперматоциты Iсперматоциты IIсперматидыНормальный сперматогенез22 – 35 лет61 – 74 года10.0±0.3315.0±0.5555.0±0.5520.0±0.446.0±0.311.0±0.220.1±0.33 ⃰14.1±0.22 ⃰Идиопатическоебесплодие0000⃰ – статистически достоверные различия (при p<0.05) между I.A.
и I.Б. контрольными подгруппами.Количество иммунопозитивных сперматогоний на инсулиноподобныйфактор роста-1 (IGF-I) при необструктивной азооспермии у мужчин 22 –35 лет снижено в 8,8 раза (в среднем 4.0±0.22%) по сравнению с таковойвозрастной группой в контроле (62.0±0.33%)и в 5,7 раза у пожилыхмужчин (40.0±0.33%). Можно предположить, что в этих условияхнарушается паракринная регуляция синтеза IGF-I половыми клетками (табл.18) (рис. 55).92Таблица 18Доля ИГХ-позитивных клеток семенных канальцев на IGF-Iв нормальном сперматогенезе и при идиопатическом бесплодии (%)группаI.А.
группа (нормальный сперматогенез, 22 – 35 лет), половые клеткиI.Б. группа (нормальный сперматогенез, 61 – 74 года), половые клеткиII группа (22 – 35 лет), гипосперматогенез; сперматогонии, сперматоциты III группа (22 – 35 лет), блок созревания; сперматогонииII группа (22 – 35 лет), фокальный вариант СКС; сперматогонииII группа (22 – 35 лет), классический вариант СКС; клетки СертолиIGF-I (%)39.5±0.3335.6±0.44 ⃰7.0±0.1 ⃰ ⃰5.3±0.6⃰ ⃰1.0±0.2⃰ ⃰0⃰ – статистически достоверные различия (при p<0.05) между I.A. и I.Б. контрольными подгруппами.⃰ ⃰ – статистически достоверные различия (при p<0.05) между контрольной группой I.A. и группой лиц,страдающих бесплодием.Рисунок 55Иммуногистохимическийанализраспределениебелков всперматогонияхпри нормальномсперматогенезе иидиопатическомбесплодии (%).КЛЕТКИ СЕРТОЛИКоличество клеток Сертоли у мужчин с азооспермией существеннопревышает значение данного показателя в контрольных подгруппах(18.6±0.12%).
Результаты сравнительного анализа количества клетокСертоли приведены в табл. 19.Таблица 19Количество клеток Сертоли в извитом семенном канальцев нормальном сперматогенезе и при азооспермииструктурыклетки СертолиНОРМАЛЬНЫЙСПЕРМАТОГЕНЕЗ(количество клеток)22 – 35 лет61 – 74 года9.9±0.089.4±0.26 ⃰Идиопатическоебесплодие(количество клеток)18.6±0.12 ⃰ ⃰⃰ – статистически достоверные различия (при p<0.05) между I.A. и I.Б.
![](https://s.studizba.com/z.php?f=/templates/si/i/noavatar.png&w=100&h=100&t=1"){kind=avatar}
