Диссертация (1140426), страница 17

Просмтор этого файла доступен только зарегистрированным пользователям. Но у нас супер быстрая регистрация: достаточно только электронной почты!

Текст из файла (страница 17)

Отсутствие специфическогомаркирования стромы свидетельствует о её вспомогательной роли в этихпроцессах.В развитии, функционировании и регуляции любых биологическихструктур важную роль играют элементы микроокружения. Для мужскихполовыхклетоккомпонентамимикроокруженияявляютсяфакторыконтактного и дистантного взаимодействия. К первым относят клеткиСертоли. Вторая группа факторов представлена гормонами, цитокинами идругими биологически активными веществами. Следует уточнить, что вклетках Сертоли были выявлены все исследуемые факторы в той или инойстепени выраженности.CD117 – маркер, играющий важную роль в сперматогенезе благодарясвоим плюрипотентным свойствам [Lu D.X. et al., 2008; Grieco V.

et al,2010]. В группе мужчин зрелого возраста, интенсивность экспрессии CD117характеризуется равномерной степенью выраженности среди всех классов104половых клеток. В группе мужчин пожилого возраста отмечено отсутствиеэкспрессии CD117 у сперматогоний и сперматоцитов-I и сохранениеэкспрессии CD117 в последующих классах половых клеток.Учитывая, что в базальном отделе извитого семенного канальцаосуществляется пролиферация (стадия размножения), а в адлюминальном –мейоз (стадия созревание), правомочен вывод, что в группе мужчинпожилоговозрастапролиферативными.процессыдифференцировкипреобладаютнадПри этом, очень важно отметить, что у пожилыхлюдей вследствие такого перераспределения возникает высокий рискпередачи хронических заболеваний к потомству при деторождении в этомвозрасте.

Исследуемый маркёр в половых клетках при идиопатическомбесплодии отсутствует. Возможно, стволовые сперматогониальные клетки(SSC) в семенных канальцах при идиопатическом бесплодии отсутствуют,то есть, обновляющихся популяций половых клеток нет.

Однако, онэкспрессирует при иных формах бесплодия, так как сперматогенез при этомне страдает и не наблюдается азооспермия.Исследованиякоторогомеханизмовсперматогонии,сперматогенеза,пройдястадиипроцесса,посредствомразмножения,мейозаиформирования становятся сперматозоидами, позволяет выявить рядгенетических детерминант мужского бесплодия. Более обширные знания огенетическойрегуляциисперматогенезапомогливсозданииклассификации вариантов идиопатического бесплодия мужчин, так какгенетические факторы становятся более ответственными за этот фенотип.Всё большее и всестороннее изучение морфологии сперматогенеза ипатогенеза идиопатического бесплодия, несомненно, приведёт к прогрессу,который позволит исправить или, по крайней мере, смягчить социальныесигмы, связанные с бесплодием.105Глава VЗАКЛЮЧЕНИЕОбобщая полученные в научной работе результаты, следует заключить,что в основе физиологического течения сперматогенеза лежит комплексморфофункциональных интрагонадных регуляций, важнейшими из которыхявляютсягаметно-соматическиеиперитубулярныевзаимоотношения.Соматические элементы семенных канальцев играют важную роль врегуляции сперматогенеза.

Они осуществляют защиту и трофику мужскихполовых клеток, способствуют реализации мейоза и спермиогенеза,воспринимают внешние и интратестикулярные сигналы нейро-эндокриннойи иммунной природы, тем самым локально регулируют состояние гамет иклеток Сертоли.Основываясь на показателях спермограммы, нельзя дать достоверныйпрогноз фертильности, учитывающий не только возможность зачатия, но иисход наступившей беременности (Zini A., Libman J., 2006). В последниегоды появились сведения о том, что на исход беременности могут влиятьфакторы,невыявляющиесяпритрадиционномспермиологическомисследовании.Таким образом, сперматогенез – сложнейший, богатый событиямибиологический процесс развития мужских половых клеток, важнейшая роль врегуляции которого, наряду с центральными и гуморальными механизмами,принадлежит региональным механизмам (интратестикулярным) (табл.

20).При мужском идиопатическом бесплодии в регуляции сперматогенезаучаствуют также соматические и эндокринные клетки. Очевидно, чтостимуляция паракринной регуляции сперматогенеза способствует реализациисобственных репаративных механизмов. Кроме того, велико значение нетолько синтезируемым биологически активным веществам, но и продуктамраспада погибающих половых клеток в результате естественного отбора.106Преимущество биопсии яичка состоит в том, что при исследованиинативных половых клеток повышается качество прижизненной диагностики,показывая более «правдивую» морфологическую картину интраорганныхмолекулярныхвзаимоотношений,иобеспечиваянаибольшуюинформативность, в отличие от аутопсийного материала.Проведённое ретроспективное исследование выявило дисбаланс междупролиферацией и апоптозом мужских половых клеток, а такженарушение нейроэндокринной и гуморальной регуляции, что являетсяодним из ключевых звеньев патогенеза идиопатической формымужского бесплодия (рис.

57).На основании проведенного исследования разработан алгоритм клиникоморфологического исследования при идиопатическом бесплодии (табл. 21,22, 23).Рисунок 57. Патогенез идиопатической формы мужского бесплодия, схема.107Таблица 21. Степень выраженности белков в элементах семенных канальцев и егоокружения в норме и при идиопатическом бесплодиибелокПриродаклеткиKi-67половыеp53половыеBcl-2половыеcaspase-9половыеPLAPполовыеCD117половыеIGF-IсоматическаяЛокализация(target sites)Функции в сперматогенезе:в нормепри бесплодииПримечаниеядро; сперматогонии («ve+/3»),снижениепервичные сперматоцитыположительная ИГХ-реакция пролиферациипролифе(«ve+/1»), вторичныеотмечена в ядрах единичных при бесплодиирациясперматоциты («ve+/2»),сперматогоний («ve+/2»)и в пожиломкруглые сперматиды («ve±»)возрастеядро; сперматогонии («ve+/2»),положительная ИГХ-реакцияувеличениепервичные сперматоцитыотмечена в ядрахпроапоптозапоптоза при(«ve+/1»), вторичныесперматогоний («ve+/2»);бесплодиисперматоциты («ve±»)клетки Сертоли («ve+/3»)снижениецитоплазма; единичныеантиапоптознойсперматогонии («ve±»),антиапоптоз сперматогонии («ve–»); зрелыеактивности припервичные сперматоцитывнутренний клетки Сертоли («ve+/1») ибесплодии и у(«ve+/1»), вторичныепуть (митонезрелые клетки Сертолимужчинсперматоциты («ve+/3»),хондрия)(«ve+/1»)пожилогосперматиды («ve+/2»)возрастаядра сперматогоний приувеличениегипосперматогенезе, блоке апоптотическойцитоплазма; сперматогониисозревания и при фокальном активности при(«ve+/2»), единичныеварианте Сертоли-клеточного идиопатичеспервичные и вторичныеапоптоз,синдрома («ve+/3»); клеткикой формесперматоциты и сперматиды инициация Сертоли («ve+/2») – в ядрахмужского(«ve+/2»), а также клеткиклеток Сертоли прибесплодия и уЛейдига («ve+/2»)классическом варианте смужчинпереходом в тубулярнуюпожилогоатрофиювозрастаИГХ-реакция визуализируетсятолько в раннем эмбриогенезе –дифферен- в цитолемме сперматогонийрискв единичных сперматогонияхцировка(«ve+/2») до трети от общего малигнизации(«ve+/3»)числацитолемма; в эмбриогенезе –отсутствиепримордиальные, гоноцитыплюри(«ve+/2») и промежуточныепотентных(«ve+/2»), фетальныесвойств усперматогонии («ve+/1»); уполовых клетоквзрослых – единичныедифференИГХ окрашивание непри бесплодии;сперматогонии («ve+/1»),цировкаобнаружено («ve –»)увеличениенекоторые первичныестволовыхсперматоциты («ve+/1»),свойств ввторичные сперматоцитыгаметах(«ve+/3»), ранние сперматидыпоздних стадий(«ve+/2»); единичные клеткисперматогенезаЛейдига («ve+/2»)паракринноеснижениевоздействие аутокринный митогенныйуровняцитоплазма; все мужскиена IGF1R ипуть с экспрессией IGF-I в контролируетсяполовые клетки («ve+/2») иклеткиклетках Сертоли; слабыйсвязующимисоматические клеткиСертоли,уровень экспрессии впротеинами –интерстициальной тканичтоединичных клетках Сертоли расщепление(«ve+/1»), а также эндотелий стимулирует(«ve+/1») и в цитоплазмеIGFBP3, чтокровеносных сосудов («ve+/1») размноженекоторых сохранившихсяснижает ростние и ростсперматогоний («ve±»)клеток пригаметбесплодии108Таблица 22Клинико-морфологический диагностический алгоритм идиопатической формымужского бесплодия (графологическая структура)109Таблица 23Диагностический алгоритм верификации, дифференциальной диагностики иинтерпретации биоптатов яичка (графологическая структура)110Таблица 24Морфологический алгоритм тестикулярной дифференциальной диагностики примужском идиопатическом бесплодииструктурыВозрастОбъём яичекспермограммахарактеристика22 – 35 летодно/оба резко уменьшены, ткань дряблая наощупьБаллы (трактовка)–удлинённые клетки Сертоли(«стоповидные клетки») – гигантскиеклетки: одно и двуядерные спермиофагис прозрачной цитоплазмой.

В этихклетках – включения в виде головоксперматозоидов (фагоцитоз)Азооспермия //Астенозооспермия//Олигозооспермия,тяжёлой степениРисунок (фото):11 – сперматогония(дегенерирующая),2 – клетка Сертоли(ядро),3 – клетка Лейдига.23Мужские половые клеткиДиаметр извитогосеменногоканальца (мкм)количество клеток(стандарт –40 мкм)ИГХ-диагностикаколичество клеток(стандарт –40 мкм)150 – 20050 – 149 (150)≤ 50нет клетокрезидуальные тельца (остатки клеток)сперматогониидругие половые клеткиPLAP+CD117+клетки Сертоли0123421онкорискнет SSC2–3зрелые формы ≥ 4незрелые формы ≥ 1дегенерирующие формы ≥ 10347клетки микроокружения:миоидные клеткиклетки Лейдигаколичество клеток(стандарт – 40 мкм)количество клеток(стандарт – 100 мкм)1–206–8≥ 15нормаГиперплазияМорфология: крупные клетки, светлая пенистаяцитоплазма (зернистая)111В пределах нормыИнтерстициальнаятканьМорфология: гипертрофия ядер (тёмные), богатыхроматином, наличие телец полового хроматина(метод Фельгена)синдромКлайнефельтерагиперплазия соединительнотканныхэлементовНодулярнаяпролиферация⃰⃰Комментарий Морфологический анализ показал наличие диффузной неравномернойгиперплазии и нодулярных пролифератов интерстициальной ткани, что может бытьпроявлением предвестников опухолевого процесса.

Характеристики

Список файлов диссертации