Диссертация (1140426), страница 13
Текст из файла (страница 13)
10, 11) и (рис. 51), местамибазальная мембрана с выраженным волокнистым компонентом (гиалиноз,фиброз). Пять вариантов Сертоли-клеточного синдрома идентифицированыпо морфологии клеток Сертоли, степени развития семенных канальцев, атакже наличие или отсутствие интерстициальных повреждения (табл. 19).Вариант SCO-s оценивали согласно руководству «Bostwick D.G. Urologicsurgical pathology» (3rd Edition, 2014), в зависимости от количества популяцийклеток Сертоли, преобладающих с одним из признаков: незрелые клеткиСертоли,дизгенетические,зрелые(взрослые),инволютирующиеидедифференцирующиеся [25, 54]. Каждый вариант SCO-sF связан сопределёнными тубулярными и интерстициальными изменениями.В некоторых семенных канальцах обнаружены единичные сперматогонии.Базальныеотсекивакуолизированы,половыеклеткиотсутствуют(сперматогонии), на месте просветов располагаются деструктивные клетки,которые ещё не лизировались.
Признаков интратубулярной неоплазииполовых клеток нет. В отдельных канальцах отмечены морфологические79признакиперитубулярногосклерозасгиалинозом,прослойкиинтерстициальной ткани широкие. При серийных срезах в интерстициивыявлены регионы выраженной пролиферации клеток Лейдига (нодулярнаягиперплазия) (табл. 20). Таким образом, в большинстве срезах описываемаяморфологическая картина соответствует субтотальной или тотальнойаплазии мужских половых клеток (GCA), или Сертоли-клеточному синдромуи/или его вариантам и гипосперматогенезу (табл. 21 – 24) и (рис. 37 – 42).клетки Сертоли (ядро)деструкция клеток и отёкРис. 37. Пациент С., 32 года. Яичко,семенной каналец при азооспермии,Н&E, ×40.123Слева: Рис.
38. Пациент Е., 31 год, Ds: необструктивная азооспермия. Яичко, Н&E, ×20.Справа: Рис. 39. Пациент Т., 34 года, Ds: необструктивная азооспермия. Яичко, Н&E, ×40.Обозначения (Рис. 38 и 39): семенные канальцы: 1 – сохранившиеся, с единичнымисперматогониями (SCO-sF), деструктивными клетками и клетками Сертоли, 2 – тубулярнаяатрофия; 3 – кровеносные сосуды (артерии), средняя оболочка резко утолщена, узкийлюминальный просвет, фестоны слабо выражены; вокруг признаки гиперплазииволокнистых компонентов интерстициальной ткани.8012Рис.
40. Пациент А., 28 лет, Ds: необструктивная азооспермия. Яичко, гипосперматогенез иблок созревания, Н&E, ×10, м.о. – 150 мкм. 1 – семенные канальцы; 2 – интерстициальная ткань.123Рис. 41. // 42. Пациент В., 22 года, Ds: необструктивная азооспермия.Яичко, блок созревания (в центре) и SCO-sF (внизу), Н&E, ×40, м.о.
– 50 мкм//×100, м.о. – 10 мкм.Стенка канальца утолщенная, в базальном отсеке канальца визуализируется множество ядерклеток Сертоли с выраженными ядрышками, местами с оксифильными участками цитоплазмы. Впросвете семенного канальца отмечен слабый отёк и признаки клеточной деструкции. 1 –интерстициальная ткань с клетками Лейдига; семенной каналец: 2 – сперматогония(дегенерирующая), 3 – клетка Сертоли (ядро).81ИММУНОГИСТОХИМИЧЕСКИЙ АНАЛИЗПРОЛИФЕРАТИВНОЙ И АПОПТОТИЧЕСКОЙ АКТИВНОСТИKi-67 (белок клеточной пролиферации)Положительная реакция на антитела к Ki-67 отмечена в ядрах единичныхсперматогоний («++»).
В клетках Сертоли и Лейдига, а также в миоидных клеткахиммуномечения на Ki-67 не обнаружено («–») (табл. 13) и (рис. 43, 44).сперматогония («++»)клетка Сертоли, ядроРис. 43. Яичко (группа II), SCO-sF, умеренная иммунопозитивная интрануклеарнаяреакция с Ki-67 в единичных сперматогониях; ИГХ метод, докрашиваниегематоксилином, ×20, м.о. – 100 мкм.сперматогония («–»)сперматогония («++»)клетка Сертли (ядро)Рис. 44. Яичко (группа II), SCO-sF, умеренная иммунопозитивная интрануклеарнаяреакция с Ki-67 в единичных сперматогониях; ИГХ метод, докрашиваниегематоксилином, ×100, м.о. – 10 мкм.82р53 (белок проапоптотической активности)Уровень экспрессии р53 распределяется в структурах извитого семенногоканальца следующим образом: в половине (50%) клеток Сертоли из общего ихчисла, среди них – среди 25% зрелых и 10% незрелых, а также в сперматогониях(«++»).
В клетках Лейдига, а также в миоидных клетках экспрессии р53 необнаружено («–») (табл. 14) и (рис. 45).сперматогония («++»)Рис. 45. Яичко (группа II), SCO-sF;ИГХ метод с антителами к р53, докрашивание гематоксилином, ×20, м.о. – 100 мкм.Вcl-2 (маркёр антиапоптотической активности)Окрашивание на Вcl-2 в сперматогониях не определяется. В половине от общегочисла клеток Сертоли экспрессия белка распределилась следующим образом:среди 25% зрелых («+») и 10% незрелых («+») клетках (табл. 15) и (рис.
46, 58).сперматогония (« –»)– клетка Сертоли (ядро)Рис. 46. Яичко (группа II), SCO-sF, семенной каналец;ИГХ метод с антителами к Вcl-2, докрашивание гематоксилином, ×40, м.о. – 50 мкм.83Caspase-9 (каспаза-9, маркёр апоптотической активности)В извитых семенных канальцах при блоке созревания отмечена слабая иммуннаяреакция на caspasa-9 в цитоплазме сперматогоний («+»); при SCO-sF – слабаяэкспрессия («±») в единичных клетках. В ядрах единичных клеток Сертолиэкспрессия caspasa-9 появляется лишь при SCO. В клетках Лейдига и в миоидныхклетках экспрессии caspasa-9 не выявлено («–») (табл. 16) и (рис. 47).клетка Сертоли, ядро («–»)клетка Сертоли, ядро («++»)Рис.
47. Яичко (группа II), семеннойканалец, SCO-s;ИГХ метод с антителами к caspasa-9,докрашивание гематоксилином, ×100,м.о. – 10 мкм.ИММУНОГИСТОХИМИЧЕСКИЙ АНАЛИЗСТВОЛОВОЙ АКТИВНОСТИ МУЖСКИХ ПОЛОВЫХ КЛЕТОКPLAP (Плацентарноподобная щелочная фосфатаза)Окрашивание на маркёр PLAP визуализируется в цитолемме до трети от общегочисла сперматогоний («++») семенного канальца (Testicular intraepithelial neoplasia,TIN, carcinoma in situ?).
В клетках Сертоли и Лейдига, а также в миоидных клеткахэкспрессии белка не обнаружено («–») (рис. 48).Рис. 48. Яичко (группа II), семеннойканалец, SCO-sF; ИГХ метод сантителами к PLAP, докрашиваниегематоксилином, ×40, м.о. – 50 мкм;вставка – сперматогоний, ×100, м.о. –10 мкм.интерстицийклетка Сертоли (ядро)сперматогония(мечениецитолеммы«++»), TIN?.84CD 117Экспрессии маркёра CD117 в половых клетках, в клетках Сертоли и Лейдига, атакже в миоидных клетках не обнаружено («–») (табл. 17) и (рис. 49).сперматогонияклетка Сертоли (ядро)клетки ЛейдигаРис. 49. Яичко (группа II), SCO-sF, иммунонегативная реакция с CD117 всперматогенном эпителии и структурах интерстициальной ткани;ИГХ метод, докрашивание гематоксилином, ×20, м.о.
– 100 мкм.ИММУНОГИСТОХИМИЧЕСКИЙ АНАЛИЗ ФАКТОРА РОСТАIGF-I (инсулиноподобный фактор роста-1)Слабый уровень окрашивания IGF-I отмечен в единичных клетках Сертоли («+»)и в цитоплазме некоторых сохранившихся сперматогоний («±») (табл. 18) и (рис.50).сперматогония («+»)клетка Сертоли, ядро (« –»)Рис. 50. Яичко (группа II), SCO-sF, извитые семенные канальцы;ИГХ с антителами к IGF-I, докрашивание гематоксилином, ×100, м.о. – 50 мкм.85МОРФОМЕТРИЧЕСКОЕ ИССЛЕДОВАНИЕПОЛОВЫХ И СОМАТИЧЕСКИХ КЛЕТОК ЯИЧКАУдельное содержание клеток в срезе яичка, то есть численность половыхи соматических клеток оценивали в предлагаемых стандартных сегментах:для половых клеток – 50 мкм, для клеток Лейдига – 150 мкм (см.
Раздел«Материалы и методы исследования») (табл. 10).Таблица 10Удельное содержание клеток в одном извитом семенном канальце имикроокруженииклеткиДиаметр извитогосеменного канальца(мкм)СперматогонииСперматоцит IСперматоцит IIСперматидыСперматозоидыклетки Сертоли(ядра)миоидные клеткиклетки Лейдига(в сегменте 150 мкм)НОРМАЛЬНЫЙСПЕРМАТОГЕНЕЗ(количество клеток,сегмент – 50 мкм)22 – 35 лет61 – 74 годаИдиопатическоебесплодие150 – 20050 – 1204–544–56–713 – 142444–56–710 – 12216–817–9(количество клеток,сегмент – 50 мкм)2–3нетнетнетнетзрелые – 4,незрелые –1116 – 18СТАТИСТИЧЕСКИЙ АНАЛИЗ РЕЗУЛЬТАТОВМОРФОМЕТРИЧЕСКОГО ИССЛЕДОВАНИЯ ПОЛОВЫХ ИСОМАТИЧЕСКИХ КЛЕТОК ЯИЧКАСравнительный статистический анализ мужских половых клеток во всехисследуемых группах на различных стадиях дифференцировки (по Y.Clermont, 1972) проводили между сперматогониями, так как другие клеткисперматогенеза при идиопатическом бесплодии отсутствуют.
Анализрезультатов измерения площади извитых семенных канальцев выборочной86совокупности указывает на неоднородность по данному признаку (приp<0,05).Пригипосперматогенезеотмечаетсяувеличениеплощадиперитубулярной интерстициальной ткани (46500±118 мкм 2) и уменьшение в5,0 раз площади семенных канальцев (9500±143 мкм2) при сниженныхпоказателях площади ареала половых клеток (2150±120мкм2) по сравнениюс мужчинами 22 – 35 лет в контроле (21000±112 мкм2) (табл. 11) и (рис.
51).Таблица 11Площадь половых клеток и перитубулярной интерстициальной тканив нормальном сперматогенезе и при азооспермииНОРМАЛЬНЫЙ СПЕРМАТОГЕНЕЗИдиопатическоеструктуры(мкм2)бесплодие(мкм2)22 – 35 лет61 – 74 года59365±27549063±264⃰9500±143⃰семенной каналец27300±27525200±174⃰2150±120⃰ ⃰ареал половыхклеток21000±11223000±109⃰46500±118⃰ ⃰интерстициальнаяткань⃰ – статистически достоверные различия (при p<0.05) между I.A. и I.Б.
![](https://s.studizba.com/z.php?f=/templates/si/i/noavatar.png&w=100&h=100&t=1"){kind=avatar}
