Диссертация (1139727), страница 23
Текст из файла (страница 23)
Усредненные профили растворения фосфазида из лекарственныхсредств Фосфаладин 150+400 мг и Никавир® 400 мг (pH 4,5)Рисунок 2.12. Усредненные профили растворения фосфазида из лекарственныхсредств. Фосфаладин 150+400 мг и Никавир® 400 мг (pH 6,8)129По результатам исследования СТКР было установлено, что выборвременных точек (10, 15, 20, 30 мин) является обоснованным, посколькупозволилполностьюописатьпрофильрастворения(дополноговысвобождения более 85% или с выходом на плато). Для ламивудинанаблюдалось полное высвобождение уже на 10 мин во всех трех средахрастворения, как для исследуемого, так и для референтного препарата. Дляфосфазида в среде рН 1,2 наблюдалось полное высвобождение к 10-20 мин изпрепаратов Фосфаладин 150+400 мг и Никавир® 400 мг.
Для средрастворения рН 4,5 и 6,8 для препарата Никавир® 400 мг наблюдалосьплавное высвобождение (кривая с насыщением) с полным высвобождением к30 мин, при этом для препарата Фосфаладин в данных средах наблюдалосьполное высвобождение уже к 10 мин.Результаты СТКР препаратов Фосфаладин 150+400 мг и Никавир® 400мг + Эпивир® были признаны достоверными на основании расчета величинRSD, которые составили не более 20% для первой временной точки и неболее 10% для остальных.Следует отметить, что профили растворения препаратов Никавир® 400мг, полученных в исследовании, приведенном в разделе 2.2.3 и в данномСТКР для рН 4,5 и 6,8 были в целом сходные (плавная кривая снасыщением).
Условия данных СТКР были полностью идентичными, заисключением момента, что в исследовании кинетики растворения препаратовФосфаладин 150+400 мг и Никавир® 400 мг + Эпивир® 150 мг референтныепрепараты одновременно помещались в корзинку для растворения. Однако,при наличии в стакане для растворения только препарата Никавир® 400 мг,полное высвобождение фосфазида достигалось к 20 мин, а в присутствииЭпивира® 150 мг – к 30 мин. В связи с этим можно сделать предположение,что присутствие ламивудина или каких-либо вспомогательных компонентовпрепарата Эпивир® 150 мг незначительно снижает скорость высвобожденияфосфазида в средах рН 4,5 и 6,8, при этом не препятствуя его полномувысвобождению.Крометого,возможнойпричинойнезначительного130снижения скорости высвобождения фосфазида при совместном присутствиив корзинке с таблеткой препарата Эпивир® может снижение площадиконтакта таблетки Никавира® со средой растворения.Для препаратов Фосфаладин® 150+400 мг и Эпивир® 150 мг во всехтрехсредахкинетикарастворенияпризнанаэквивалентнойбезматематической оценки по ламивудину (высвобождение более 85% в течение15 мин).Для препаратов Фосфаладин 150+400 мг и Никавир® 400 мг в средерастворения с рН 1,2 кинетика растворения признана эквивалентной безматематической оценки по фосфазиду.
В среде фосфатного буферногораствора pH 6,8 и ацетатного буферного раствора pH 4,5 кинетикарастворения признана неэквивалентной на основании расчетов факторовсходимости, значения которых составили 26,61 и 24,23 соответственно(Таблицы 2.20-2.21).Таблица 2.20Усредненные значения фосфазида, высвободившегося в раствор, изначение фактора сходимости f2 для лекарственных средствФосфаладин 150+400 мг и Никавир® 400 мг (pH 4,5)% высвобождения активного ингредиента,среднее значениеСредаВремя, мин10152030nf2ацетатный буферный раствор pH 4,5ФосфаладинНикавир®100,6256,66104,0879,68100,5392,8699,91100,12326,61131Таблица 2.21Усредненные значения фосфазида, высвободившегося в раствор, изначение фактора сходимости f2 для лекарственных средствФосфаладин 150+400 мг и Никавир® 400 мг (pH 6,8)% высвобождения активного ингредиента,среднее значениеСредаВремя, мин10152030nf2фосфатный буферный раствор pH 6,8ФосфаладинНикавир®105,1155,49105,1179,18103,4394,11103,73101,40324,23n – количество точек, необходимое для расчета фактора сходимости f2 (в расчете используется не более 1 точки с высвобождением более 85% для исследуемого и референтного ЛС)f2 – фактор сходимостиНеэквивалентность профилей растворения наблюдается только дляфосфазида в средах растворения рН 4,5 и 6,8 (что предположительно связанос соотношением массовых долей АФС/ВВ в исследуемых ЛС, которое является очень высоким у препарата Фосфаладин 150+400 мг, и составляет89:11), при этом в среде рН 1,2 наблюдается эквивалентность профилей растворения без математической оценки, при этом полное высвобождение действующего вещества наблюдается уже спустя 10 мин после начала испытания.
Очевидно, что в условиях in vivo, полное высвобождение фосфазида излекарственной формы происходит уже в желудке (соответствует среде рН1,2) как для исследуемого (Фосфаладин 150+400 мг), так и для референтного(Никавир® 400 мг) препарата. Таким образом, можно предположить биоэквивалентность исследуемых ЛС в условиях in vivo и рекомендовать данные серии ЛС в качестве серий-клинических кандидатов.1322.2.5. Валидация и/или межлабораторный перенос методикМетодика количественного определения высвободившегося фосфазидабы подвергнута процедуре межлабораторного переноса. Величина открываемости для фосфазида соответствовала требованиям (98 – 102%). Величинаотносительного стандартного отклонения (RSD,%) также соответствовала установленным нормам (не более 2%). Таким образом, методика количественного определения фосфазида для изучения сравнительной кинетики растворения была применена без дополнительной валидации.
Типичные хроматограммы фосфазида (в среде растворения рН 1,2) приведены на Рисунке 2.13.Внешний вид хроматограмм и параметры пригодности системы (эффективность хроматографической колонки, асимметрия пика) в других средах растворения были идентичны.Рисунок 2.13. Типичные хроматограммы фосфазида.Разработанная методика количественного определения фосфазида иламивудина при совместном присутствии для проведения исследованияСТКР была подвергнута валидации.Была подтверждена специфичность методики. На хроматограммах средрастворения рН 1,2, 4,5, 6,8, а также плацебо-раствора не было обнаруженопиковсофосфазиду.временамиудерживания,Типичнаяхроматограммасоответствующих ламивудинуламивудинаифосфазидаипри133совместном присутствии (в среде растворения рН 1,2) приведена на Рисунке2.14. Вид хроматограмм ламивудина и фосфазида в других средахрастворения был идентичен.Рисунок 2.14.
Типичные хроматограммы фосфазида и ламивудина присовместном присутствии.Результаты оценки линейности методики количественного определения фосфазида и ламивудина представлены в Таблице 2.22. Калибровочныйграфик представлен на Рисунках 2.15 и 2.16.Таблица 2.22Оценка линейности методики количественного определенияфосфазида и ламивудинаОценка линейности для фосфазидаС стандартногоС стандартногораствора,% от но- раствора,% от номинального (вве- минального (найдено)дено)140141,51120118,87100101,318081,046058,764039,04Оценка линейности для ламивудинаС стандартногоС стандартногораствора,% отраствора,% отноминальногономинального(введено)(найдено)140141,14120121,03100101,378079,816062,224038,99134Рисунок 2.15.
Оценка линейности методики определения фосфазидаРисунок 2.16. Оценка линейности методики определения ламивудинаКоэффициенты линейной детерминации (r2) составили 0,9991 и 0,9992для фосфазида и ламивудина, что соответствовало критерию приемлемости(не менее 0,999). Остаточный член линейной зависимости (–1,5767 и – 0,3637для фосфазида и ламивудина, соответственно) незначительно отличался отнуля.Результаты оценки правильности и прецизионности (сходимости) методики определения фосфазида и ламивудина приведены в Таблицах 2.23 и2.24.
Для всех трех уровней концентраций значение величин относительной135погрешности и относительного стандартного отклонения соответствоваликритериям приемлемости (не более 2%).Таблица 2.23Оценка правильности и прецизионности (сходимости) методики количественного определения фосфазидаВведено,%от номинальн.Найдено,%от номинальн.S.D. (n=5)RSD,%(n=5)ε,%39,670,711,78-0,8299,000,960,97-1,00140,720,830,590,52Найдено,%от номинальн. ср.знач.
(n=5)4010014039,7439,0540,8139,1139,6698,2299,5798,09100,3698,74141,87140,28139,76141,22140,49136Таблица 2.24Оценка правильности и прецизионности (сходимости) методики количественного определения ламивудинаВведено,%от номинальн.Найдено,%от номинальн.S.D. (n=5)RSD,%(n=5)ε,%40,180,721,790,44101,541,331,311,54141,240,740,520,88Найдено,%от номинальн.
ср.знач. (n=5)4010014041,1240,2839,6639,2940,53102,67103,11100,08101,34100,48141,38140,18140,85142,03141,75Была установлена промежуточная прецизионность методики количественного определения фосфазида и ламивудина (разные аналитики, разныерабочие дни). Результаты представлены в Таблице 2.25.137Таблица 2.25.Результаты оценки промежуточной прецизионности методики количественного определения фосфазида и ламивудинаПоказательАналитик 1, Аналитик 2, Аналитик 1, Аналитик 2,найдено,% от найдено,% от найдено,% от найдено,% отноминального номинального номинального номинальногоАнализ 1101,32100,9298,05100,90Анализ 2102,09103,3199,27103,21Анализ 3100,96102,89100,37101,78Анализ 4100,75100,6598,4199,76Анализ 5102,89101,0799,3099,21Анализ 6100,76100,6497,74101,44среднее,%101,46101,5898,86101,05SD0,791,090,891,32RSD,%0,771,070,901,30среднееintra,%101,5299,95SDintra1,001,64RSDintra (n =12)0,981,64Была установлена устойчивость (робастность) методики количественного определения фосфазида и ламивудина при смене рН среды (рН 1,2 нарН 4,5 или рН 4,8).
Результаты оценки устойчивости методики приведены вТаблице 2.26. Было показано, что при изменении рН среды методика является устойчивость и ее валидационные характеристики не изменяются (RSD и εне превышали 2% для каждого из уровней концентраций). Также не изменялись хроматографические характеристики (время удерживания пиков ламивудина и фосфазида), параметры пригодности хроматографической системытакже соответствовали нормам (раздел 2.1.7). Таким образом, разработаннаяметодика количественного определения ламивудина и фосфазида могла применяться для СТКР исследуемых препаратов во всех трех средах растворениярН 1,2, 4,5, 6,8.На основании валидационных характеристик был установлен аналитический диапазон методики количественного определения ламивудина и фосфазида, который составил 40% - 140% для каждого из компонентов от номи-138нального содержания в препарате Фосфаладин 400+150 мг при проведенииСТКР.Таблица 2.26.Результаты оценки промежуточной прецизионности методики количественного определения фосфазида и ламивудина при смене рН среды (рН 1,2 нарН 4,5 или рН 4,8)Введено,% отноминальн.Найдено,% отноминальн.
![](https://s.studizba.com/z.php?f=/templates/si/i/noavatar.png&w=100&h=100&t=1"){kind=avatar}
