Диссертация (1139727), страница 20

Просмтор этого файла доступен только зарегистрированным пользователям. Но у нас супер быстрая регистрация: достаточно только электронной почты!

Текст из файла (страница 20)

Изучение сравнительной кинетики растворения препаратов Никавир и ФосфаладинТест «Растворение» проводили согласно ОФС 42-0003-04 «Растворение» на аппарате «вращающаяся корзинка» при скорости вращения 100об/мин при температуре 37 ± 0,5 оС. Условия сравнительного теста кинетики104растворения были подобраны экспериментальным путем. Исследование проводили в трех средах растворения (рН 1,2, 4,5, 6,8), моделирующих основныеразделы ЖКТ, в которых происходит распадение, высвобождение и абсорбция активного ингредиента.

Временные точки отбора проб (10 мин, 15 мин,20 мин и 30 мин) выбраны таким образом, чтобы полностью описать профильрастворения исследуемых ЛС с выходом на полное высвобождение (не менее85%) или плато. В качестве аппарата была выбрана «вращающаяся корзинка»для предотвращения залипания частиц препарата на стенке сосуда для растворения. Скорость вращения (100 об/мин) была выбрана как оптимальнаяскорость вращения аппарата «вращающаяся корзинка» для ЛФНВ. Объемсреды растворения (900 мл) был выбран таким образом, чтобы обеспечить«условия предельного разбавления» («sink conditions»), которые обеспечивают полное растворение дозировки ЛС в данном объеме среды.Рассчитывалисреднеезначениеколичестварастворившейсясубстанции (или субстанций) и величину относительного стандартногоотклонения (RSD,%).

Достоверность результатов оценивали по величинеотносительного стандартного отклонения, величина которого не должнапревышать 20% для первой временной точки и 10% - для остальныхвременных точек.При высвобождении более 85% действующего вещества в течение 15мин кинетика растворения считалась эквивалентной без математическойоценки.В случае если в течение 15 мин в высвобождалось менее 85% действующего вещества, для оценки эквивалентности кинетики растворения ЛСпроизводили расчет фактора сходимости f2 по следующему уравнению []:f 0.51 i n2 50  log10  1 ( )  ( R t T t ) 100, где:2 ni1n – число временных точек (не считая нуля);105Rt – среднее значение высвобождения фармацевтической субстанциииз референтного препарата на момент времени t,%;Tt – среднее значение высвобождения фармацевтической субстанциииз исследуемого препарата на момент времени t,%.1.1.7.1.

Сравнительный тест кинетики растворения для препаратовНикавир® 200 мг и 400 мгНа момент проведения исследования препарат Никавир® 200 мг былзарегистрирован к медицинскому применению в РФ. Для дополнительнойдозировки (400 мг) лекарственного средства необходимо было провести изучение его кинетики растворения и оценки эквивалентности его профиля растворения с основной дозировкой лекарственного средства.В каждый из 6 сосудов для растворения с 900 мл среды растворения,предварительно термостатированными при 37 ± 0,5 оС, помещали по 1 таблетке исследуемого лекарственного средства Никавир® 400 мг.

Спустя указанные промежутки времени проводили отбор 5 мл среды, который незамедлительно восполняли таким же объемом среды растворения. Отобранныепробы фильтровали через фильтры типа «CHROMAFIL®» с диаметром пор0,45 мкм, отбрасывая первые порции фильтрата. Параллельно и аналогичнымобразом проводили исследование референтного лекарственного средства Никавир® 200 мг.Количественное определениеПриготовление подвижной фазы. 3,85 г аммония ацетата помещали вмерную колбу вместимостью 1000 мл, растворяли в 500 мл воды очищеннойи доводили объем раствора водой до метки, перемешивали. Полученныйраствор смешивали с ацетонитрилом в соотношении 7:1. Подвижную фазудегазировали и фильтровали.Приготовление стандартного раствора 1.

Около 25,0 мг (точная навеска) стандартного образца фосфазида помещали в мерную колбу вместимостью 50 мл и прибавляли около 25 мл подвижной фазы, перемешивали дополного растворения, доводили объем раствора до метки подвижной фазой и106снова перемешивали. Концентрация полученного раствора приблизительноравна 0,5 мг/мл.Приготовление стандартного раствора 2. 10 мл (для препарата Никавир® 200 мг») или 20 мл (для препарата Никавир® 400 мг) полученного раствора переносили в мерную колбу вместимостью 25 мл, доводили объем раствора до метки подвижной фазой, перемешивали. Концентрация полученныхрастворов приблизительно равна 0,2 мг/мл (для препарата Никавир® 200 мг) и0,4 мг/мл (для препарата Никавир® 400 мг).Количественное определение проводили методом ВЭЖХ. Методикаколичественного определения приведена в разделе 2.1.6.Пригодность хроматографической системы:Стандартный раствор хроматографировали 5 раз.

Система считаласьпригодной, если относительное стандартное отклонение площадей пиков,полученных последовательными введениями, не превышало 2,0%.Фактор асимметрии пика фосфазида – не более 2,0.Эффективность хроматографической колонки – не менее 3000 теоретических тарелок.Количество активного вещества (Q%), перешедшего в раствор, в процентах вычисляли по формуле:Q% ==, где:S1 – площадь пика активного вещества фосфазида на хроматограммеиспытуемого раствора;S0 – средняя площадь пика активного вещества фосфазида на хроматограммераствора стандартного образца;а0 – навеска стандартного образца, мг;a – заявленное содержание фосфазида в одной таблетке, мг;V – аликвота, взятая для разведения раствора 1 стандартного образца, мл;Р – чистота стандартного образца,%.1071.1.7.2.

Сравнительный тест кинетики растворения для препаратовФосфаладин 400+150 мг и Эпивир® 150 мг + Никавир® 400 мгДанное исследование сравнительной кинетики растворения проводилось с целью подтверждения эквивалентности в условиях in vitro для исследуемого и референтного препарата для выбора серии-клинического кандидата и последующего проведения исследования биоэквивалентности для препарата Фосфаладин 400+150 мг, являющегося фиксированной комбинацией.Для наиболее достоверного моделирования поведения препаратов Эпивир®150 мг и Никавир® 400 мг в условиях in vitro, обе лекарственные формы помещались в сосуд для растворения одновременно, поскольку при проведениисоответствующего исследования БЭ планируется одновременный прием обоих препаратов добровольцами.

В случае раздельного изучения кинетики растворения препаратов Эпивир® 150 мг и Никавир® 400 мг может не быть учтено взаимное влияние вспомогательных вещества каждого из препаратов нарастворимость соответствующих субстанций, которая может потенциальнокак увеличиться, так и снизиться.В каждый из 6 сосудов для растворения с 900 мл среды растворения,предварительно термостатированными при 37 ± 0,5 ºС, помещали по 1таблетке исследуемого лекарственного средства Фосфаладин 400+150 мг.Спустя указанные промежутки времени проводили отбор 5 мл среды,который незамедлительно восполняли таким же объемом среды растворения.Отобранные пробы фильтровали через мембранные фильтры «Agilent CaptivaPremium Syringe Filter®» с диаметром пор 0,45 мкм, отбрасывая первыепорции фильтрата. Затем 2,0 мл полученного фильтрата переносили вмерную колбу вместимостью 5 мл, доводили объем раствора водой до меткии перемешивали (испытуемый раствор) Параллельно и аналогичнымобразом проводили исследование референтных лекарственных средств Эпивир® 150 мг и Никавир® 400 мг, которые помещали в корзинкуодновременно.Испытаниелекарственного средства.проводилина12единицахкаждого108Количественное определениеПриготовление стандартного раствора.

Около 32 мг (точная навеска)стандартного образца фосфазида и 12 мг (точная навеска) стандарта ламивудина помещали в мерную колбу вместимостью 100 мл, прибавляли 50 мл воды, перемешивали до полного растворения навесок, доводили объем раствора водой до метки и перемешивали. 5,0 мл полученного раствора помещали вмерную колбу вместимостью 10 мл, доводили объем раствора водой до меткии перемешивали.Количество фосфазида и ламивудина, перешедших в раствор, определяли методом ВЭЖХ с УФ-детектированием.

На хроматограммах измерялиплощади пиков ламивудина и фосфазида.Условия хроматографирования0,03 М раствор аммония ацетата с рН 3,8.2,30 г аммония ацетата помещали в мерную колбу вместимостью 1000мл, растворяли в 900 мл воды, затем доводили рН раствора кислотой уксусной ледяной до 3,80±0,05. Доводили объем полученного раствора водой дометки, перемешивали и фильтровали через мембранный фильтр с размеромпор 0,45 мкм.Срок годности раствора 7 суток.Растворитель: вода очищенная.Подвижная фаза А: смесь 0,03 М раствора аммония уксуснокислого срН 3,8 и ацетонитрила в соотношении 95:5.Подвижная фаза В: ацетонитрил.Подвижную фазу А и В дегазируют любым удобным способом.Стандартный раствор.

Около 32 мг (точная навеска) стандартногообразца фосфазида и 12 мг (точная навеска) стандарта ламивудина помещалив мерную колбу вместимостью 100 мл, прибавляли 50 мл воды, перемешивали до полного растворения навесок, при необходимости использовали ультразвуковую ванну в течение 5 минут, доводили объем раствора водой до метки и перемешивали.

5,0 мл полученного раствора помещали в мерную колбу109вместимостью 10 мл, доводили объем раствора до метки и перемешивали.Раствор использовали свежеприготовленным.Условия хроматографированияКолонкаПФСкорость потокаТемпература колонкиДетекторОбъем вводимойпробыВремя анализаZorbax Eclipse plus, 150 х 4,6 мм, заполненная сорбентом Luna C18(2) с размером частиц 5 мкмА: 0,03 М раствор аммония ацетата с рН 3,8 – ацетонитрил (95:5)В: ацетонитрил1,0 мл/мин30 °СУФ, 270 нм10 мкл8 минПрограмма градиента:Время, мин0-33-3,53,5-5,55,5-66-8ПФ А,%9090 → 757575 → 9090ПФ В,%1010 → 252525 → 1010Время удерживания ламивудина около 2,3 минут, фосфазида – около3,2 минут.Количество ламивудина или фосфазида, перешедших в раствор из таблетки, в процентах (Х) вычисляют по формуле:где:S0 –Sх –a0 –L–Р–площадь пика ламивудина или фосфазида на хроматограмместандартного раствора;площади пика ламивудина или фосфазида на хроматограммеиспытуемого раствора;навеска стандарта ламивудина или фосфазида, взятая для приготовления стандартного раствора, мг;нормируемое содержание ламивудина или фосфазида в однойтаблетке, мг;чистота стандартов ламивудина или фосфазида,%.1101.1.8.

Валидация и/или межлабораторный перенос методикДля количественного определения фосфазида при проведении СТКРпрепарата Никавир® использовалась методика количественного определениясогласно утвержденному НД на препарат (ФСП 42-0081-4913-03, показатель«Растворение»). Аналитический диапазон методики (55 – 135% от номинального высвобождения для препаратов Никавир® 200 мг и 400 мг) был пригоден для проведения исследования СТКР, поскольку полученные значениявысвободившегося фосфазида укладывались в данный диапазон.

Характеристики

Список файлов диссертации