Диссертация (1139719), страница 47
Текст из файла (страница 47)
Попытки оттитровать в извлечении катионымагния в присутствии специфического индикатора пирокатехинового фиолетового не увенчались успехом и показали его отсутствие в плодах или содержание магния составляет менее 10 -610-7 моль/л в извлечении [228,340,341]. Полученные данные также могут свидетельствовать отом, что магний, преимущественно, содержится в твердой косточке плодов и практически неизвлекается в процессе экстракции.
На основании этого, в извлечении комплексонометрическититруется только кальций в виде кальция хлорида. Содержание кальция в процентах (X) в пересчете абсолютно сухое сырье вычисляют по формуле 24:Х ,%V 0,002 200 100 100m 20 (100 W )V 200m (100 W )(24)где 0,002 – количество кальция, соответствующее 1 мл раствора трилона Б (0,05 моль/л), вграммах; V – объём раствора трилона Б (0,05 моль/л), пошедшего на титрование, в миллилитрах; m – масса сырья в граммах; W – потеря в массе при высушивании сырья в процентах.С целью исследования стабильности соединений кальция и обоснования выбора оптимального способа консервации плодов облепихи, проводили количественное определение каль-240ция в свежих и высушенных плодах. Результаты составили соответственно 0,443% и 0,503% (впересчете на абсолютно сухое сырье).
Данные рис. 117 свидетельствуют о том, что процесссушки не влияет на содержание солей кальция в ЛРС. Небольшое увеличение находится в пределах ошибки определения. Результаты определения кальция в плодах облепихи в пересчете наабсолютно сухое сырье и метрологическая характеристика методики представлены в таблице155.Таблица 155Метрологическая оценка метода анализа (P = 95 %; n=3)xсрS2SSxcp∆x∆xcpεср, %1,050 0,001370,0370,02139 0,1591 0,09208,76Содержание кальция, %0,50,40,30,20,10свежиевысушенныеСпособ консервации плодовРис. 117. Влияние способа консервации плодов на содержание кальцияДля оценки достоверности, полученные результаты комплексонометрического определения были сравнены с литературными и экспериментальными данными по определению кальция в плодах облепихи различных видов с применением как ААС (Shimadzu, ICPQ-100), комплексонометрического титрования [392,398], так КЭ и масс-спектрометрии (таблица 156).Таблица 156Содержание кальция в плодах облепихи различных видов [318]№п/п1123Вид облепихи2Облепиха среднеазиатская [392]Облепиха китайская[392]Облепиха крушиновидная (подвид - туркистанская) [398]Районпроизрастания3Провинция Ганьсу(Китай)Провинция Ганьсу(Китай)Методопределения4ААС3119,33 мг/кгСеверные районыПакистанаКомплексонометрия70-125 мг/лААССодержаниекальция5317,44-368,44мг/кг2411423Облепиха крушиновидРоссия, Воронежная (экспериментальныеская областьданные)4КомплексонометрияКЭМассспектрометрия51450,05 мг/кгили 30 мг/л1710,00 мг/кг1310,28 мг/кгТаким образом, полученные экспериментальные данные тремя независимыми методами,сопоставимы между собой и с результатами исследований, проведенными другими авторами,как методом ААС [392], так и методом комплексонометрии [398], что свидетельствуют о правомерности разработанной методики.
Данные таблицы 156 демонстрируют также, что содержание кальция вариабельно в плодах облепихи даже внутри одного вида и зависит от места произрастания.5.3.8. Определение суммы свободных и связанных простых сахаров в плодахДля количественного определения простых сахаров, как свободных, так и связанных всырье облепихи крушиновидной использованы методики, изложенные в ОФС ГФ XIII изд.«Определение сахаров спектрофотометрическими методами» [93]. Определение сахаров спектрофотометрическим методом проводят по измерению оптической плотности окрашенных растворов, образуемых при взаимодействии сахаров с антроновым или орциновым реактивами ипикриновой кислотой.В основе метода определения сахаров с пикриновой кислотой лежит цветная реакция моносахаридов с пикриновой кислотой с образованием аминопикриновой кислоты в результатевосстановления сахаром группы N02 в NH2.
Полученные восстанавливающие моносахариды спикриновой кислотой в щелочной среде имеют максимум поглощения в диапазоне 440-460 нм[197]. Аналогичный максимум поглощения в диапазоне длин волны 443-445 нм отмечен длястандартных образцов простых сахаров (глюкоза, фруктоза, ксилоза, рамноза) с пикриновойкислотой в щелочной среде, использованных нами при разработке методики (рис.
118).Выделение простых сахаров из полисахаридного комплекса выделяли путем экстракцииЛРС водой очищенной, подкисленной концентрированной кислотой хлористоводородной, длягидролиза сложных углеводов. Для установления полноты экстракции простых сахаров из плодов облепихи крушиновидной изучали влияние соотношения сырья и экстрагента, кратностиэкстракции и оптимального времени экстракции.242ГлюкозаФруктозаКсилозаРамнозаПлоды облепихи крушиновидной высушенныеПлоды облепихи крушиновидной свежие1,2оптическая плотность10,80,60,40,20200250300350400450500длина волны, нм550600650700Рис. 118.
Пикриновый метод. Спектры поглощения продуктов реакции стандартных образцовпростых сахаров и извлечений из изучаемого ЛРС, полученных с применением кислотного гидролиза, с пикриновой кислотой)Оптимальным для выделения моносахаридов является соотношение сырья и экстрагента1,5:80 при добавлении конц. соляной кислоты к экстрагенту в соотношении 10:1 (таблица 157).Оптимальное время экстракции, согласно экспериментальным данным, составило 1,5 часа (рис.119). Увеличение кратности экстракции способствует повышению выхода свободных восстанавливающих моносахаридов из полисахаридного комплекса (рис. 120).Содержание суммыпростых сахаров %454035302520151000,511,52Время экстракции, часы2,53Рис. 119. Влияние времени экстракции на содержание суммы простых сахаров в извлеченииС целью выбора оптимальных условий хранения плодов облепихи и исследования стабильности полисахаридного комплекса, проводили количественное определение в свежих и высушенных плодах.
Результаты представлены в таблице 158.243Таблица 157Влияние соотношения сырья и экстрагента на извлечение моносахаридов из плодов облепихикрушиновидной№ п/пЛРС:вода:конц. HClСодержание простых сахаров, %10,5:80:827,860±4,07321,0:80:819,250±2,81531,5:80:836,651±5,35842,0:80:829,629±4,33252,5:80:823,041±3,369Содержание суммымоносахаридов, %30252015105012Кратность экстракцииРис. 120. Влияние кратности экстракции на выход суммы простых сахаров в извлечениеТаблица 158Результаты определения содержания суммы полисахаридов и восстанавливающих моносахаридов в плодах облепихи крушиновидной [329]№Анализируемое сырьеСумма полисахаридов и восстанавлип/пвающих моносахаридов, %1Облепихи крушиновидной свежие плоды31,010±4,5332Облепихи крушиновидной высушенные27,248±3,984плодыПолученные данные (таблица 158) свидетельствуют о том, что способ консервации практически не оказывает влияние (в пределах ошибки определения) на стабильность полисахаридного комплекса плодов облепихи крушиновидной при высушивании.Согласно литературным данным, мякоть плодов богата свободными простыми сахарами(фруктоза и глюкоза).
Косточка плодов содержит комплекс углеводов в качестве запасного питательного вещества.Содержание суммы свободных восстанавливающих моносахаридов в полисахаридномкомплексе плодов облепихи крушиновидной высушенных и свежих в пересчёте на глюкозу иабсолютно сухое сырье определяли в извлечениях, не подвергавшихся кислотному гидролизу.Результаты представлены в таблице 159.Полученные данные могут свидетельствовать о том, что свободные моносахариды содержатся как в мякоти плодов (около 15 % в пересчете на абсолютно сухое сырье), так и в эндо-244сперме семени (до 5% в пересчете на абсолютно сухое сырье).
При анализе свежего сырья, изцельной косточки плодов выделение сахаров простой экстракцией водой очищенной практически не осуществляется. Поэтому, считаем, что полученное значение количественного содержания суммы свободных моносахаридов, локализовано в мякоти плодов облепихи крушиновидной. В то же время при измельчении высушенного сырья с косточкой, часть свободных сахаров,содержащихся в ней, также извлекается водой в процессе экстракции.Таблица 159Результаты определения содержания суммы свободных восстанавливающих моносахаридов вплодах облепихи крушиновидной [329]№ЛРССумма свободных восстанавливаюп/пщих моносахаридов, %1Плоды облепихи крушиновидной свежие13,6205±1,99132Плоды облепихи крушиновидной высу18,2200±2,6638шенныеВ ФС ГФ XIII изд.
«Мать-и-мачехи листья» приведена методика количественного определения суммы полисахаридов и свободных сахаров в пересчете на глюкозу. Расчет рекомендуется проводить с использованием величины удельного показателя поглощения комплекса глюкозы с пикриновой кислотой при длине волны 470 нм.
Максимум поглощения на спектрах полученных после взаимодействия извлечений из плодов облепихи крушиновидной с пикриновойкислотой в предлагаемых методикой условиях находился в диапазоне 445-448 нм (аналогичныемаксимумы давали и стандартные образцы), что не позволяло рассчитывать количественное содержание предложенным способом. Однако, при увеличении времени кислотного гидролизаЛРС происходило батохромное смещение аналитического максимума (таблица 160), что можетбыть связано с большим выходом моносахарида глюкозы из полисахаридного комплекса приувеличении времени, а следовательно и полноты гидролиза.Таблица 160Влияние времени извлечения сахаров из плодов облепихи крушиновидной на положение аналитического максимума поглощения№ Время кислотного гидролиПоложение максимума, нмп/пза ЛРС, часы10,544521,044631,544842,045752,5470Таким образом, при варьировании временем гидролиза ЛРС можно предложить различные методики определения суммы полисахаридов и простых сахаров, как с использованием величины удельного показателя поглощения, так и оптической плотности продуктов реакцииглюкозы с пикриновой кислотой (таблица 161).245Количественное определение.
![](https://s.studizba.com/z.php?f=/templates/si/i/noavatar.png&w=100&h=100&t=1"){kind=avatar}
