Диссертация (1139719), страница 46
Текст из файла (страница 46)
Определение антиоксидантной активности извлечений из плодов облепихиОсобую значимость в качестве природных АО представляют БАВ полифенольной структуры – биофлавоноиды, способные гасить каскадные реакции перекисного окисления.Извлечения из свежих плодов облепихи осуществляли путем нагревания на водяной баненавески ЛРС с водой и спирто-водными смесями (40%, 70% и 95%) в соотношении 1:30 в течение 45 минут. АОА определяли способом перманганатометрического титрования, по запатентованной Максимовой Т.В. с соавторами методике [196]. Кверцетин был использован в качествераствора сравнения. Суммарную АОА (мг/г), соответствующую содержанию БАВ восстанавливающего характера в пересчете на кверцетин, рассчитывали по известной формуле [196].
Полученные результаты представлены на рис. 112.Установлено, что наибольшей АОА обладают извлечения, полученные с применением95% этанола. Результаты статистической обработки экспериментально полученных данныхприведены в таблице 150.2352017,13АОА, мг/г15105,8251,331,56аб0вВодно-спиртовые экстрагентыгРис.
112. Значение показателя АОА извлечения из свежих плодов облепихи, полученных с использованием различных экстрагентов: а – вода; б – 40% этанол; в – 70% этанол; г – 96% этанол(в пересчете на кверцетин, мг/г)Таблица 150Метрологическая оценка результатов определения АОА исследуемого извлечения(P = 95 %; n = 5) [171]2xсрSSSxcp∆x∆xcpε, % εср, %17,13 0,002120,1040,046 0,289 0,1302 1,690,76Сравнение полученных результатов суммарной АОА извлечений из плодов облепихикрушиновидной с литературными данными по АОА плодов черники, определённой по аналогичной методике представлено на рис.
113 [196]. Достаточно высокое содержание АО флавоноидной структуры свидетельствуют о перспективности использования, наряду с плодами черники, плодов облепихи и ЛП на её основе в качестве антиоксидантных средств.1816АОА, мг/г141210817,1312,56420плоды облепихиплоды черникиРис. 113. Значения показателя АОА в пересчёте на кверцетин, мг/гАОА извлечений из ЛРС оценивается также по их способности замедлять самоокислениеадреналина в щелочной среде in vitro и тем самым предотвращать образование свободных радикалов.236Для определения АОА было выбрано извлечение из свежих плодов, полученное с применением 95% этанола, так как суммарная величина АОА в пересчете на кверцетин показала максимальное значение. Анализ проводили по известной методике [165,171, 267], выражая результат в процентах ингибирования аутоокисления адреналина.
Зависимость оптической плотностипри λ=347 от времени реакции окисления адреналина в отсутствии (1) и в присутствии извлечения из исследуемых плодов (2) изображена на рис. 114. Величина АОА > 10% свидетельствуето наличии АОА. В данной методике не приводится точное время, через которое следует измерять оптическую плотность анализируемого раствора, что вносит определенные трудности ввозможность ее применения для оценки АОА извлечений из растительных объектов, в т.ч. плодов облепихи. В таблице 151 представлены данные расчета АОА извлечения из плодов облепихи свежих в зависимости от времени определения А347.оптическая плотность0,610,420,200,55,510,515,5время, минРис.
114. Зависимость А347 от времени реакции аутоокисления адреналина в отсутствии (1) и вприсутствии извлечения из плодов облепихи (2)Таблица 151Значение АОА извлечения из свежих плодов облепихи в зависимости от времени определения[171]№ п/пВремя, минАОА, %10,580,332353,833544,934736,5251030,6361521,8372019,24Данные таблицы 151 свидетельствуют о постепенном снижении значения АОА извлечения с течением времени, что связано с участием АО в активном торможении свободнорадикального окисления, в результате происходит снижение их активности.С целью изучения влияния условий хранения исследуемого ЛРС на суммарную АОА,проводили определение последней для свежих, высушенных и замороженных плодов облепихичерез 3, 6 и 9 месяцев хранения (таблица 152).237Таблица 152АОА (в пересчёте на кверцетин) извлечений из плодов облепихи крушиновидной различныхспособов консервации [125]№ п/пАнализируемые плодыАОА, мг/г1Плоды свежие17,13±0,132Плоды высушенные16,92±0,133Плоды замороженные (3 мес.)16,37±0,124Плоды замороженные (6 мес.)10,83±0,085Плоды замороженные (9 мес.)9,10±0,07Данные таблицы 152 указывают на достаточно высокое содержание АО флавоноиднойструктуры.
Полученные результаты согласуются с данными количественного определения флавоноидов в процессе хранения (п. 5.3.2.1, таблица 133; п. 5.3.2.2, таблица 137).5.3.7. Определение микроэлемента кальцияОптимальное сотношение макро- и микроэлементов в растениях формируется вследствие сложно функционирующих механизмов, на которые влияют различные факторы, в томчисле видовая специфичность растения. Для подавляющего большинства элементов установлена их биологическая роль. Особый интерес вызывает элемент кальций. Содержание кальция ворганизме человека колеблется от 1 до 1,5 кг. Недостаток данного элемента наблюдается прибольшом количестве заболеваний (рахит, остеопороз, снижение функции щитовидной железы,хроническая почечная недостаточность, панкереатит, механическая желтуха, аллергия, печеночная недостаточность и др.).
Нехватка кальция может наблюдаться и при применении некоторых ЛП (противоопухолевых, противосудорожных). Ассортимент ЛС, содержащих соликальция очень широк, но, к сожалению, практически все они имеют противопоказания и могутвызывать серьезные побочные эффекты. Поэтому применение лекарственных растений, в которых макро- и микроэлементы находятся в биоусвояемой форме, может быть эффективным длянормализации минерального баланса [253,257].В ГФ X, XI и XIII изданий, а также в Британской фармакопее субстанцию кальция хлорида количественно оценивают комплексонометрически [51,199,228].
Комплексонометрия характеризуется всеми преимуществами титриметрических методик, а именно, простотой, доступностью, малой ошибкой определения, экономичностью, несложной предподготовкой пробы, не требует дорогостоящего оборудования, реактивов, материалов и высококвалифицированного персонала. Все это позволит широко внедрить разработанную методику в практику повседневного рутинного фармацевтического анализа и сделает ее востребованной и доступнойдля любой лаборатории.238Для установления полноты экстракции кальция из плодов облепихи крушиновиднойизучали влияние соотношения сырья и экстрагента, оптимального времени и кратности экстракции (рис.
115, 116), а также рН-экстрагента. Лучшим экстрагентом для выделения кальцияявляется разведеная кислота хлористоводородная при соотношении сырья и экстрагента 1:50(таблицы 153 и 154). Оптимальное время экстракции, согласно экспериментальным данным,составило 60 минут (рис. 115).Содержание кальция, %0,40,30,20,12030405060708090Время экстракции, минСодержание кальция, %Рис. 115. Взаимосвязь времени экстракции и выхода кальция в извлечение0,5960,60,50,40,40690,30,20,101-кратная2-кратнаяКратность экстракцииРис. 116. Взаимосвязь кратности экстракции и выхода кальция из плодов облепихи крушиновиднойТаблица 153Результаты определения содержания кальция в извлечениях из плодов при различных соотношениях сырья и экстрагента [318]№ п/пЛРС-экстрагентНайдено кальция, %11:100,443±0,03621:250,284±0,02331:500,505±0,04141:1000,489±0,04051:2000,470±0,042При исследовании влияния рН-экстрагента на выход кальция (таблица 154) установлено,что с уменьшением рН до 1,0 единиц происходит повышение экстрагируемости кальция.
Высокий выход кальция из плодов при использовании кислоты хлористоводородной разведенной239обусловлен, скорее всего, растворением солей кальция в изучаемом ЛРС с образованием легкорастворимового хлорида кальция.Таблица 154Влияние рН-экстрагента на выход кальция из плодов [318]№п/п12РастворительрННайдено кальция, %Вода очищеннаяКислота хлороводороднаяразведеная5,0-6,00,596±0,0491,0-2,01,050±0,092Количественное определение. Около 4 г сырья (т.н.) переносят в коническую колбу объемом 250 мл, разминают плоды стеклянной палочкой до кашицеобразного состояния и добавляют 100 мл кислоты соляной разведенной. Колбу нагревают на кипящей водяной бане с обратным холодильником в течение 30 мин. Затем колбу быстро охлаждают, а содержимое пропускают через бумажный фильтр, смоченный кислотой хлористоводородной разведенной, избегаяпопадания сырья на фильтр в мерную колбу вместимостью 200 мл.
Частицы сырья в колбе снова заливают 100 мл кислоты хлористоводородной разведенной и выдерживают на кипящей водяной бане в течение 30 мин., фильтруют через тот же бумажный фильтр в мерную колбу. Еслитребуется, объем извлечения доводят до метки кислотой хлористоводородной разведенной. 20мл извлечения помещают в колбу для титрования, прибавляют 50 мл воды очищенной, 8 мл30% водного раствора натрия гидроксида до рН 5,0-6,0; 4 мл аммиачного буфера, несколькокрупинок индикатора эриохрома черного Т и титруют 0,05 М раствором трилона Б до переходаокраски от красно-вишневой до зеленовато-синей.
![](https://s.studizba.com/z.php?f=/templates/si/i/noavatar.png&w=100&h=100&t=1"){kind=avatar}
