Диссертация (1139719), страница 44
Текст из файла (страница 44)
Отвар из свежего и высушенного ЛРС получали по правилам изготовления настоев и отваров согласно ОФС ГФ XIII изд. [93]. В качестве источника АК, оптимальным является применение извлечения из высушенных плодов облепихи крушиновидной, полученного по предложенной и описанной выше методике (таблица 143).Таким образом, проведено определение суммы свободных АК в плодах и водных извлечениях - отварах плодов различных способов консервации. Экспериментально установлено, чтосодержание АК в извлечениях из высушенных, замороженных и свежих плодов облепихи крушиновидной различно.
Процесс высушивания и длительного хранения в режиме реальноговремени в условиях заморозки сопровождается увеличением количества и состава свободныхАК в сырье.Таблица 143Сравнительная оценка содержания АК в извлечениях при различных способах приготовления[300]№ п/пАнализируемое извлечениеНайдено АК, %1Отвар из свежих плодов (ГФ XIII)0,01765±0,001212Извлечение из свежих плодов по методике авторов0,02664±0,00183Извлечение из высушенных плодов по методике30,06332±0,00073авторов4Отвар из высушенных плодов (ГФ XIII)0,04364±0,00050На основании результатов эксперимента, плоды облепихи могут быть рекомендованы кпромышленному использованию не только в качестве источника жирного масла, но и для получения в домашних условиях отвара - источника АК.5.3.4. Определение органических кислот5.3.4.1.
Определение суммы органических кислот титриметрическим методомСогласно НД, определение ОК в плодах не предусмотрено [15]. Проведенные исследования по количественному определению ОК показали значительное их содержание в плодах. Следовательно, совершенно очевидно, что данный показатель возможно учитывать при разработкепроектов ФС на плоды облепихи.225Получение извлечения и определение проводили, как описано в Главе 2 (п. 2.2.6).
СуммаОК в ЛРС представлена ГКК, АсК и другими карбоновыми кислотами. Следовательно, необходимо было также определить долю важнейших кислот – АcК и ГКК в общей сумме. Подобныеметодики для изучаемого сырья не включены в НД.5.3.4.2. Определение аскорбиновой кислоты в плодахАсК в ЛРС традиционно определяют фармакопейным титриметрическим методом [91].Получение извлечения и определение проводили, как описано в Главе 2 (п.
2.2.1 и 2.2.5).5.3.4.3. Спектрофотометрическое определение гидроксикоричных кислот в плодахоблепихи крушиновиднойВид спектра поглощения извлечения из свежих плодов облепихи с применением 70 %этанола, в диапазоне длин волн 300-400 нм свидетельствует о присутствии максимума придлине волны 328±2 нм, что характерно для ГКК [265]. Для установления оптимального времениэкстракции определение проводили через 15, 30, 45 и 60 минут (рис.
104). Рис. 104 показывает,что наилучшее время экстракции составляет 35-40 минут. Дальнейшее увеличение времени экстракции приводит, по-видимому, к окислению данной группы БАВ при длительном нагреванииСодержание ГКК, %с доступом кислорода воздуха.0,40,30,20,101525354555Время экстракции, мин.Рис. 104. Кривая зависимости содержания ГКК в извлечении от времени экстракцииКоличественное определение. Около 2 г (т.н.) свежего измельченного ЛРС экстрагируют с 60мл 70 % этанола в конической колбе объемом 100 мл на кипящей водяной бане с обратным холодильником в течение 35 мин, предварительно взвешивая с погрешностью ±0,01 г.
Затем колбу с содержимым после охлаждения взвешивают и, при необходимости, доводят до первоначальной массы экстрагентом. Извлечение фильтруют через бумажный фильтр, отбрасывая первые 10 мл фильтрата. 2 мл извлечения переносят в мерную колбу объемом 25 мл. Раствора доводят 96 % спиртом до метки. Оптическую плотность измеряют на спектрофотометре при226длине волны 328±1 нм в кювете с толщиной слоя 10 мм относительно 96 % этанола. Содержание суммы ГКК в процентах (X) в пересчете на кислоту хлорогеновую и абсолютно сухое сырьевычисляют по формуле 22:Х ,%Ах 25 3000а 507 (100 W )(22)где Ах — оптическая плотность испытуемого раствора; а — масса сырья, г; W — потеря в массепри высушивании сырья, %.Для оценки зависимости выхода и стабильности ОК от времени экстрагирования, а также для сравнения полученных результатов количественного определения с данными содержания ОК в отваре, приготовленном в домашних условиях, проводили определение БАВ в извлечениях, приготовленных различными способами (таблица 144).
Результаты количественногоопределения суммы свободных ОК в пересчёте на яблочную, суммы ГКК в пересчете на кислоту хлорогеновую и АсК и статистическая обработка представлены в таблицах 144 и 145.Таблица 144Сравнительная оценка содержания суммы ОК и АсК в плодах облепихи крушиновидной приразличных способах приготовления извлечения [185]Найдено суммы ОК, %Найдено АсК, %№Название методап/псвежиевысушенныесвежиевысушенныеПолучение отвара по13,4350±6,2770±0,0641±0,0222±1ГФ XIII0,16800,07800,00300,000912,8740±13,7920±0,0563±0,0350±Извлечение по мето20,16100,17200,00230,0014дике авторовУвеличение времени экстракции для свежих плодов практически не оказывает влиянияна выход ОК в извлечение (таблица 144), что свидетельствует об устойчивости данных БАВ кдлительному нагреванию. Увеличение времени экстракции для высушенных плодов приводит кповышению выхода ОК в извлечение, что следует связывать с особенностями строения околоплодника, содержащего, воски и ФЛ в кожице.
Вследствие чего, необходимо длительное времядля проникновения экстрагента в клетки сырья.Таблица 145Метрологическая характеристика методик количественного определения исследуемых группБАВ (P = 95 %; n = 5)2xсрSSSxcp∆x∆xcpεср, %Сумма ОК, %13,7920,0117600,108440,054220,3448 0,17201,25АсК, %0,02220,00000030,000570,000285 0,0018 0,00094,05Сумма ГКК, %0,4000,000400,0200,008200,0514 0,02105,24227С целью выбора оптимальных условий хранения плодов облепихи, проводили количественное определение ОК в свежих, высушенных и замороженных плодах через 9 месяцев хранения.
Результаты представлены в таблице 146.Таблица 146№ п/п123Содержание ОК в исследуемом ЛРС при различных условиях храненияБАВ, %Плоды облепихиСвежиеВысушенныеЗамороженные через 9 мес.ОК13,4350±0,16806,2770±0,078012,8740±0,1610ГКК0,2100±0,01100,2390±0,01250,4000±0,0210АсК0,0641±0,00300,0222±0,00090,0656±0,0027Данные таблицы 146 свидетельствуют о стабильности суммы ГКК в процессе сушки.Небольшое увеличение находится в пределах ошибки определения.
Однако, при хранения плодов в условиях морозильной камеры до 9 месяцев отмечено увеличение содержания суммысвободных ГКК.Свежие плоды большую часть ГКК содержат в связанном виде (простые и сложные эфиры по карбоксильным и гидроксильным группам. При хранении, в ЛРС протекают процессыгидролиза (ферментативного и неферментативного), что сопровождается увеличением содержания суммы свободных ГКК. Процесс сушки приводит к снижению содержания суммы ОК иАсК в исследуемом ЛРС.
Хранение в условиях заморозки не приводит к достоверному снижению содержания их суммы. По данным литературы [378], в плодах отсутствует аскорбиназа,что обеспечивает хорошую сохранность АсК.Доля важнейших кислот – АсК и ГКК в общей сумме ОК свежих плодов очень мала исоставляет примерно 2 – 4%; доля АК – около 22% (рис. 105).абвРис. 105. Распределение ОК в общей сумме в плодах облепихи крушиновидной различных способов консервации (а – свежие; б – высушенные; в - замороженные)Процесс сушки и заморозки не влияет существенным образом на распределение ОК вобщей сумме в плодах облепихи крушиновидной за исключением свободных АК, которые со-228ставляют большую часть от суммы (примерно 70%). В замороженных плодах, как и в высушенных, на долю суммы свободных АК также приходится около 70%.5.3.5.
Сравнительная характеристика различных методов определения ДВ в плодахоблепихи крушиновиднойПредварительное количественное определение суммы ДВ методом перманганатометриипо методике ОФС ГФ XIII [93,242], показало значительное их содержание. Следовательно,необходимо учитывать данный показатель при разработке проектов ФС на плоды облепихикрушиновидной.Получение извлечения: Около 1,0 г (т.н.) сырья помещают в коническую колбу объемом250 мл, заливают 125 мл нагретой до кипения водой и кипятят с обратным воздушным холодильником в течение 30 мин при периодическом перемешивании.
Жидкость процеживают черезнесколько слоев марли в коническую колбу, не дожидаясь охлаждения (охлаждение сопровождается снижением растворимости ДВ в воде), так, чтобы частицы сырья не попали в колбу.Количественное определение методом перманганатометрии проводили, как описано вГлаве 2 (п. 2.2.9). Для более точного определения суммы ДВ метод перманганатометрии прибегают к применению желатина в качестве осадителя ДВ. Применение желатинового метода описано в Главе 2 (п. 2.2.9).Следует отметить, что для изучаемого ЛPC желатиновый метод оказался непригодным,так как при добавлении раствора желатина к водной вытяжке, выраженный осадок не образовывался. Поэтому для включения в НД могут быть рекомендованы методы перманганатометриитолько для определения суммы окисляемых полифенольных соединений [332].Согласно современным представлениям, истинное содержание ДВ возможно определитьметодом спектрофотометрии, в основе которого лежит измерение оптической плотности спирто-водной вытяжки из ЛPC при длине волны 275±2 нм [176,219].
![](https://s.studizba.com/z.php?f=/templates/si/i/noavatar.png&w=100&h=100&t=1"){kind=avatar}
