Диссертация (1139693), страница 14
Текст из файла (страница 14)
В то время как улиц контрольной группы какого-либо градиента данных цитокинов и белков неотмечается.Определяются также корреляции между экспрессией цитокинов, белков,формирующихплотныемежэпителиальныеконтактыиследующимипроявлениями СРК:- боль в животе- изменение частоты стула- выраженность тревожного расстройства (HARS)- выраженность депрессивного расстройства (HDRS)4.4 Патогенетическое и клиническое значение кишечной микрофлоры убольных с синдромом раздраженного кишечникаДля определения патогенетического и клинического значения кишечноймикрофлоры у пациентов с подтвержденным диагнозом СРК (диарейным иобстипационным вариантами) были изучены следующие показатели:1.
Количественный и качественный состав кишечной микрофлоры сприменением метода 16s-RNA секвенирования.2. Наличие/отсутствие синдрома избыточного бактериального роста припомощи водородного дыхательного теста с лактулозой.1174.4.1 Состояние кишечной микробиоты у пациентов с СРК и лицконтрольной группыДля оценки состояния микробиома толстой кишки 21 пациенту с СРК иСРК в сочетании с СФД, а также 9 добровольцам из группы контроляпроводилось молекулярно-генетическое исследование кишечного микробиома(секвенирование16SрРНК);дляобнаружениясиндромаизбыточногобактериального роста (СИБР) 64 больным и 15 здоровым добровольцам (КГ 2)выполнялся водородный дыхательный тест с лактулозой.4.4.2 Состояние кишечного микробиома по данным молекулярногенетического исследования (секвенирование 16S рРНК)Секвенирование 16S рРНК из образцов кала было выполнено у 21 пациентас СРК и СРК в сочетании с СФД и 9 здоровых добровольцев.
Малое количествообследованных больных было связано с техническими трудностями процессасеквенирования.Достоверные различия были выявлены между содержанием Bacteroidetes(19,9 [10,3; 40,2] у больных СРК и 3,8 [0,0; 22,9] у здоровых лиц соответственно)и Firmicutes - 65,0 [53,3; 82,8] в группе больных СРК и 85,0 [72,3; 96,1] в группездоровых (Рисунок 13, Таблица 42).118Таблица 42Состав кишечного микробиома у пациентов с СРК и здоровыхдобровольцев, классифицированного на уровне типаТип бактерийПациенты с СРКpActinobacteria0,9 [0,5; 4,1]2,2 [0,0; 7,7]0,160Bacteroidetes19,9 [10,3; 40,2]3,8 [0,0; 22,9]0,041*Firmicutes65,0 [53,3; 82,8]85,0 [72,3; 96,1]0,047*3,3 [1,2; 7,5]0,9 [0,6; 3,2]0,210Proteobacteria, Spirochaetes,Lentisfaerae, TernicutesПациенты с СРК4%Группа контроля1%22%Группа контроляActinobacteria2%1%4%ActinobacteriaBacteroidetesBacteroidetesFirmicutesFirmicutes73%Proteobacteria,Spirochaetes,Lentisfaerae,Ternicutes93%Proteobacteria,Spirochaetes,Lentisfaerae, TernicutesРисунок 13.
Состав кишечного микробиома у пациентов с СРК издоровых добровольцев, классифицированного на уровне типаКроме того, таблицы 40 и 41иллюстрируют достоверные различия всодержании бактерий на уровне класса-порядка-семейства-рода в пределахкаждого типа между группой больных СРК и группой контроля (Таблица 43,Таблица 44).119Таблица 43Различия в составе кишечного микробиома у пациентов с СРК издоровых добровольцев, классифицированного на уровне класса-порядкасемейства-рода(достоверно большее количество в группе больных СРК)№Типп/п12345678910111213Класс-порядок-Больные СРКсемейство-родBacteroidetesBacteroidetesBacteroidetesFirmicutesFirmicutesFirmicutesFirmicutesFirmicutesFirmicutesFirmicutesFirmicutesFirmicutesFirmicutesГруппаpконтроляРод18,5000,600Bacteroides[5,974; 34,402][0,197; 1,918]Семейство0,0100,000Bacteroidaceae-Other[0,000; 0,081][0,000; 0,000]Семейство1,2000,210Rikenellaceae[0,301; 3,490][0,000; 1,207]Семейство0,0000,000Gemellaceae[0,000; 0,039][0,000; 0,000]Семейство0,0000,000Gemellaceae-Other[0,000; 0,023][0,000; 0,000]Семейство0,0000,000Carnobacteriaceae-Other[0,000; 0,042][0,000; 0,000]Семейство0,0100,000Enterococcaceae-Other[0,000; 0,125][0,000; 0,000]Семейство0,0000,000Lactobacillaceae-Other[0,000; 1,899][0,000; 0,000]Семейство0,0400,000Streptococcaceae-Other[0,000; 0,670][0,000; 0,000]Класс0,1300,000Clostridia[0,034; 0,508][0,000; 0,004]Семейство0,0000,000Catabacteriaceae[0,000; 0,132][0,000; 0,000]Род0,0000,000Peptoniphilus_2[0,000; 0,113][0,000; 0,000]Семейство0,0100,000Clostridiaceae-2[0,000; 0,251][0,000; 0,000]0,0200,0400,0480,0240,0500,0240,0110,0250,0170,0000,0250,0500,011120№Типп/п14151617181920212223242526Класс-порядок-Больные СРКсемейство-родFirmicutesFirmicutesFirmicutesFirmicutesFirmicutesFirmicutesFirmicutesFirmicutesFirmicutesFirmicutesFirmicutesActinobacteriaActinobacteriaГруппаpконтроляРод3,060 [2,142;1,690 [1,054;Coprococcus9,924]2,077Семейство2,5700,000Lachnospiraceae-Other[1,766; 3,818][0,000; 0,000]Род1,9300,450Oscillospira[0,528; 7,599][0,236; 0,726]Семейство1,4000,000Ruminococcaceae-Other[0,837; 3,287][0,000; 0,000]Род0,0200,000Veillonella[0,000; 0,690][0,000; 0,020]Семейство0,0000,000Veillonellaceae-Other[0,000; 1,307][0,000; 0,000]Порядок0,0900,000Clostridiales-Other[0,058; 0,278][0,000; 0,000]Класс0,1000,000Clostridia-Other[0,036; 0,505][0,000; 0,000]Семейство0,2200,000Coprobacillaceae[0,079; 0,924][0,000; 0,000]Род0,2600,000Catenibacterium-1[0,059; 0,645][0,000; 0,000]Род0,0000,000Holdemania[0,000; 0,048][0,000; 0,000]Порядок0,0100,000Coriobacteriales[0,000; 0,047][0,000; 0,000]Семейство0,0200,000Coriobacteriaceae-Other[0,007; 0,084][0,000; 0,000]0,0030,0000,0200,0000,0410,0250,0000,0000,0010,0110,0170,0110,005121Таблица 44Различия в составе кишечного микробиома у пациентов с СРК издоровых добровольцев, классифицированного на уровне класса-порядкасемейства-рода(достоверно большее количество в группе контроля)ТипКласс-порядоксемейство-род1BacteroidetesРод4FirmicutesFirmicutes[0,000; 4,578][0,000; 19,959]Семейство0,0000,010Mogibacteriaceae-1[0,000; 0,000][0,000; 0,171]0,1600,720[0,073; 0,409][0,000; 4,285]Род0,0000,130SMB53[0,000; 0,000][0,017; 0,350]Семейство1,23017,300[0,514; 3,304][11,698;Семейство6FirmicutesFirmicutesLachnospiraceaeрконтроля1,140Clostridiaceae-15СРКГруппа0,000Prevotella-23Больные0,0250,0010,0040,0000,00023,776]789101112FirmicutesFirmicutesFirmicutesFirmicutesFirmicutesFirmicutesРод1,6502,690Ruminococcus-1[1,154; 2,040][1,848; 3,863]Род3,68013,530Blautia[2,375; 8,698][7,484; 26,780]Род1,0302,350Dorea[0,558; 1,729][1,424; 4,416]Род1,0204,410Roseburia[0,446; 2,882][1,790; 7,041]Семейство0,0000,060Erysipelotrichaceae[0,000; 0,012][0,000; 1,492]0,0000,840[0,000; 0,000][0,015; 3,852]0,0000,000[0,000; 0,000][0,000; 0,118]РодCatenibacterium-213FirmicutesРодCoprobacillus-20,0250,0090,0030,0440,0010,0060,0171224.4.3 Корреляции изменений, выявленных при секвенировании 16SрРНК бактерий в образцах кала с клиническими симптомамизаболевания у больных СРК-Д и СРК-ЗКорреляции изменений, выявленных при секвенировании 16S рРНКбактерий в образцах кала с клиническими симптомами заболевания представленыв таблице 45.Были выявлены как положительные, так и отрицательные корреляцииизменения содержания 16S рРНК бактерий, выделенных при секвенированииобразцов кала больных СРК и здоровых добровольцев, с основными симптомамифункциональных заболеваний ЖКТ- жжение в эпигастрии- ощущение переполнения в эпигастрии- интенсивность боли в животе- интенсивность метеоризма- консистенция стула по Бристольской шкале- выраженность тревожного расстройства (HARS)- выраженность депрессивного расстройства (HDRS)(Таблица 45).123Таблица 45Корреляции изменений, выявленных при секвенировании 16S рРНК вобразцах кала с клиническими симптомами заболевания у больных СРК-Д иСРК-ЗСимптомКласс-порядоксемейство-родFFFFFFFFСемействоEnterococcaceaeOtherСемействоStreptococcaceaeOtherКлассClostridiaСемействоCatabacteriaceaeРодOscillospiraСемействоRuminococcaceaeOtherПорядокClostridiales-OtherПорядокCoriobacterialesЖжениевэпигастрииОщущениепереполненияв эпигастрии-0,36*-0,010,19Интенсивностьболив животеЭмоциональныенарушенияБристольскаяшкалаформы стулаМетеоризмHARSHDRS-0,40*0,07-0,150,04-0,760,13-0,120,25-0,51*0,150,230,32*0,220,29*-0,210,44*0,34*-0,240,16-0,11-0,40*0,370,090,05-0,450,070,090,110,110,42*0,180,45-0,110,29*0,34-0,110,46*0,54* 0,38*0,070,09-0,140,50*0,00-0,080,27*-0,110,43*0,35τ Кендалла-0,12-0,240,140.71* корреляции статистически достоверны4.4.4 Состояние микробиоты тонкой кишки у пациентов с различнымивариантами СРК и лиц контрольной группы по данным дыхательноготеста с лактулозойДля выявления синдрома избыточного бактериального роста в тонкойкишке всем пациентам (64 человека) проводился водородный дыхательный тест слактулозой.У 32 пациентов основной группы (50%) дыхательный тест оказалсяположительным.
При этом значительно чаще СИБР выявлялся у больных СРК-Д124(62,5%) и реже – у пациентов СРК-З (37,5%). В группе контроля СИБР не былобнаружен ни у одного здорового добровольца.Различия между группой больных CРК-З и группой контроля (р=0,005), атакже между группой СРК-Д и группой контроля (р<0,001) оказалисьстатистически достоверными, различия между группами пациентов с различнымивариантами СРК достигли лишь уровня статистической тенденции (р=0,024)(Таблица 46).Таблица 46Сравнительная частота выявления СИБР у больных с СРКи лиц контрольной группыГруппы СРК-ДБольныхСРК-ЗКонтроль-n=31n=33наяСРК-ДСРК-ДСРК-Забс, %абс, %группа (КГ)///n=15; абс,%СРК-ЗКГКГ0,024 #<0,001*0,005 *ПоказательрСиндромизбыточного20120бактериального62,5%37,5%0%роста4.4.5 Корреляции наличия СИБР с клиническими симптомамизаболевания и эмоциональным статусом у больных СРК-Д и СРК-ЗБыл проведен корреляционный анализ наличия СИБР с клиническимисимптомамизаболеванияирезультатамитестирования,отражающимипсихоэмоциональный статус пациентов.Статистически значимых корреляций наличия СИБР с клиническимисимптомами получено не было.Выявлена достоверная прямая корреляция между наличием СИБР истепенью выраженности депрессии по когнитивно-аффективной субшкале Бека убольных СРК-З;125достоверная прямая корреляция между СИБР и наличием тревоги по HARSу больных СРК-Д (Таблица 47).Таблица 47Корреляции наличия СИБР с клиническими симптомами заболевания иэмоциональным статусом у больных СРК-Д и СРК-ЗПоказателиНаличие СИБР вгруппе СРК-Дτ КендалларНаличие СИБР вгруппе СРК-Зτ КендалларКлинические симптомы заболеванияИнтенсивность боли (ВАШ)-0,240,063Частота боли (кол-во дней в0,120,337неделю)Продолжительность боли (кол-0,050,716во часов в день)Диарея (кол-во дефекаций в0,050,717неделю)Запор (кол-во дефекаций внеделю)Интенсивность метеоризма-0,010,917(ВАШ)Частота метеоризма (кол-во0,020,867дней в неделю)Продолжительностьметеоризма (кол-во часов в-0,010,937день)-0,140,2610,000,9810,090,483-0,030,7830,160,1870,150,2200,160,195Психоэмоциональный статусНаличие тревоги по HARS0,210,048*-0,080,495Наличие депрессии по HDRS-0,120,3440,140,240Наличие депрессии покогнитивно-аффективнойсубшкале Бека-0,080,5380,280,021*126ПоказателиНаличие СИБР вгруппе СРК-Дτ КендалларНаличие депрессии посубшкале соматическихпроявлений депрессии БекаНаличие депрессии по шкалеБека (суммарный результат)Наличие СИБР вгруппе СРК-Зτ Кендаллар-0,040,7560,060,626-0,050,7050,200,107* корреляции статистически достоверныТаким образом, при анализе данных секвенирования 16S рРНК быливыявлены статистически достоверные качественные отличия в составе кишечногомикробиома у больных СРК по сравнению со здоровыми добровольцами наразличных уровнях классификации (тип-класс-порядок-семейство-род), а такженаличие корреляции данных изменений с основными клиническими симптомамизаболевания, определяющими его тяжесть (интенсивность боли в животе, формастула по Бристольской шкале, метеоризм).Кроме того, согласно результатам нашего исследования, СИБР достоверночаще встречается у больных СРК в сравнении со здоровыми добровольцами.Определяется корреляция наличия СИБР с эмоциональными расстройствами,также определяющими степень тяжести заболевания.4.5 Исследование нарушения моторики и чувствительностиПоказатели аноректальной манометрии высокого разрешения (HRAM) у больныхСРК и лиц контрольной группыПациентам из основной группы (64 человека) и 15 здоровым добровольцамиз группы контроля (КГ 3) проводилась аноректальная манометрия высокогоразрешения (HRAM).Исследование анального сфинктера (АС).Среднее давление АС в покое у пациентов с СРК-Д оказалось выше, чем упациентов с СРК-З (43,0 [38,2; 49,3] мм.
![](https://s.studizba.com/z.php?f=/templates/si/i/noavatar.png&w=100&h=100&t=1"){kind=avatar}
