Диссертация (1139693), страница 13
Текст из файла (страница 13)
Экспрессия клаудина-3 в биоптатах сигмовидной кишки убольного СРК-Д (А) и у пациента из группы контроля (Б)Различий в экспрессии клаудина-2 у больных СРК и у исследуемых лицконтрольной группы выявлено не было (Таблица 33)106Таблица 33Экспрессия про- и противовоспалительных цитокинов и белковплотных контактов у больных СРК по сравнениюс контрольной группойОтдел ЖКТTNF-αИл-2Ил-10Сla 2Сla 3Сla 5СРКконтрольpДПК3,3 [3,7; 4,0]1,0 [1,0; 1,2]<0,001*Подвздошная3,4 [4,0; 3,8]1,0 [1,0; 1,2]<0,001*Слепая5,2 [5,0; 5,6]1,0 [1,0; 1,1]<0,001*Сигмовидная5,.5 [6,0; 5,8]1,0 [1,0; 1,4]<0,001*ДПК3,2 [3,0; 3,6]1,3 [1,5; 1,7]<0,001*Подвздошная3,4 [4,0; 3,8]2,3 [2,0; 1,7]<0,001*Слепая4,8 [5,0; 5,4]1,2 [1,0; 1,6]<0,001*Сигмовидная5,0 [6,0; 5,6]1,2 [1,2; 1,5]<0,001*ДПК2,0 [1,7; 2,0]3,7[4,0; 4,1]<0,001*Подвздошная1,6 [2,0; 1,9]4,0 [4,0; 4,0]<0,001*Слепая1,6 [2,0; 1,9]4,2 [4,0; 4,8]<0,001*Сигмовидная1,5 [2,0; 1,9]4,2 [4,0; 4,8]<0,001*ДПК2,0 [2,0;2,0]2,0 [2,0;2,0]1,000Подвздошная2,0 [2,0;2,0]1,.8 [1,8; 2,0]0,655Слепая2,0 [2,0;2,0]1,8 [2,0; 2,0]0,629Сигмовидная2,0 [2,0;2,0]2,0 [2,0;2,0]1,000ДПК2,1 [2,0; 2,6]5,3 [6,0; 5,9]<0,001*Подвздошная2,1 [2,0; 2,6]5,.6 [6,0; 6,0]<0,001*Слепая2,1 [2,0; 2,6]5,4 [6,0; 5,9]<0,001*Сигмовидная0,9 [1,0; 1,3]5,3 [6,.0; 5,9]<0,001*ДПК2,0 [2,0; 2,4]5,8 [6,0; 6,1]<0,001*Подвздошная1,9 [2,0; 2,3]5,.5 [6,0; 6,0]<0,001*Слепая2,0 [2,0; 2,3]6,0 [6,0; 6,0]<0,001*Сигмовидная0,7 [1,0; 0,9]5,7 [6,0; 6,1]<0,001** различия достигли статистически значимого уровня1074.3.2 Сравнительный анализ экспрессии цитокинов и клаудинов вгруппах больных с СРК-Д и СРК-ЗНамибыловыявленодостоверноеувеличениеэкспрессиипровоспалительных цитокинов TNF-α и Ил-2 как в группе пациентов СРК-Д, таки в группе СРК-З по сравнению с контрольной группой (p<0,001).При этом отмечалась тенденция к большей экспрессии TNF-α у больных сСРК-Д, по сравнению с СРК-З, но статистически достоверного уровня этиразличия достигали лишь в сигмовидной кишке - 6,0 баллов [5,8; 6,1] у больныхСРК-Д и 5,0 баллов [5,1; 5,6] у пациентов СРК-З (p<0,001).Отмечалась более выраженная экспрессия Ил-2 у больных с СРК-Д, посравнению с СРК-З в постбульбарном отделе двенадцатиперстной кишки,подвздошной и слепой кишке, однако статистически значимого уровня различияне достигали.
Для подвздошной и слепой кишки уровень различий можно былоопределить как статистическую тенденцию (0,05<p<0,017).Различий экспрессии Ил-10 в группах с разными вариантами течения СРКне было выявлено, однако, различия в экспрессии данного цитокина междугруппамипациентов,страдающих СРК, игруппой контроля оказалисьстатистически достоверными (p<0,001).При определении экспрессии белков плотных контактов - клаудинов 2,3 и 5у больных с преобладанием в клинической картине диареи и запоров –достоверных различий выявить не удалось (Рисунок 11,Рисунок 12, Таблица 34).1087,0*6,0TNF-αбаллы5,04,03,02,01,00,0ДПКПодвздошнаяСлепаяСигмовидная7,0#6,0#Ил-2баллы5,04,03,02,01,00,0ДПКПодвздошнаяСлепаяСигмовиднаяIl104,54,03,5Ил-10баллы3,02,52,01,51,00,50,0ДПКПодвздошнаяСлепаяСигмовиднаяДПКСлепаяСигмовиднаяПодвздошнаябаллы5,00,0СРК-ДСРК-ЗКонтроль* различия достигли статистически значимого уровня; # статистическая тенденцияРисунок 11.
Экспрессия про- и противовоспалительных цитокинов убольных с различными вариантами течения СРК109Cla22,52,0Cla 2баллы1,51,00,50,0ДПКПодвздошнаяСлепаяСигмовиднаяПодвздошнаяСлепаяСигмовиднаяСлепаяСигмовиднаяCla37,06,0Cla 3баллы5,04,03,02,01,00,0ДПКCla57,06,0Cla 5баллы5,04,03,02,01,00,0ДПКПодвздошнаяДПКСлепаяСигмовидная0,0Подвздошнаябаллы5,0СРК-ДСРК-ЗКонтрольРисунок 12.
Экспрессия белков плотных контактов у больных сразличными вариантами течения СРК110Таблица 34Экспрессия про- и противовоспалительных цитокинов и белковплотных контактов у больных с различными вариантами течения СРКpppд-кз-кд-з1,0 [1,0; 1,2]<0,001*<0,001*0,2133,0 [3,2; 3,8]1,0 [1,0; 1,2]<0,001*<0,001*0,1795,0 [5,1; 5,6]5,0 [5,0; 5,7]1,0 [1,0; 1,1]<0,001*<0,001*0,921Сигмовидная 6,0 [5,8; 6,1]5,0 [5,1; 5,6]1,0 [1,0; 1,4]<0,001*<0,001*0,005*ДПК4,0 [3,3; 3,8]3,0 [2,8; 3,6]1,5 [1,3; 1,7]<0,001*<0,001*0,172Подвздошная 4,0 [3,7; 4,1]3,0 [3,0; 3,8]2,0 [1,3; 1,7]<0,001*<0,001*0,048#Слепая5,5 [5,1; 5,8]5,0 [4,3; 5,3]1,0 [1,2; 1,6]<0,001*<0,001*0,045#Сигмовидная 5,5 [5,1; 5,8]6,0 [4,7; 5,7]1,0 [1,2; 1,5]<0,001*<0,001*0,494ДПК2,0 [1,8; 2,1]2,0 [1,6; 2,0]4,0 [3,7; 4,1]<0,001*<0,001*0,514Подвздошная 2,0 [1,6; 2,0]2,0 [1,5; 2,0]4,0 [4,0: 4,0]<0,001*<0,001*0,707Слепая2,0 [1,6; 2,0]2,0 [1,4; 1,9]4,0 [4,2; 4,8]<0,001*<0,001*0,489Сигмовидная 2,0 [1,7; 2,1]2,0 [1,2; 1,8]4,0 [4,2; 4,8]<0,001*<0,001*0,105ДПК2,0 [2,0: 2,0]2,0 [2,0: 2,0]2,0 [2,0: 2,0]1,0001,0001,000Подвздошная 2,0 [2,0: 2,0]2,0 [2,0: 2,0]2,0 [1,8; 2,0]0,7120,7181,000Слепая2,0 [2,0: 2,0]2,0 [2,0: 2,0]2,0 [1,8; 2,0]0,6880,6941,000Сигмовидная 2,0 [2,0: 2,0]2,0 [2,0: 2,0]2,0 [2,0: 2,0]1,0001,0001,000ДПК2,0 [2,1; 2,8]2,0 [1,9; 2,7]6,0 [5,3; 5,9]<0,001*<0,001*0,635Подвздошная 2,0 [2,0; 2,7]2,0 [1,9; 2,7]6,0 [5,6; 6,0]<0,001*<0,001*0,722Слепая2,0 [2,0; 2,7]2,0 [1,9; 2,7]6,0 [5,4; 5,9]<0,001*<0,001*0,722Сигмовидная 1,0 [0,9; 1,4]1,0 [0,7; 1,3]6,0 [5,3; 5,9]<0,001*<0,001*0,304ДПК2,0 [1,9; 2,4]2,0 [1,9; 2,5]6,0 [5,8; 6,1]<0,001*<0,001*0,889Подвздошная 2,0 [1,9; 2,4]2,0 [1,8; 2,4]6,0 [5,5; 6,0]<0,001*<0,001*0,968Слепая2,0 [1,9; 2,4]2,0 [1,9; 2,5]6,0 [6,0: 6,0]<0,001*<0,001*0,952Сигмовидная 1,0 [0,6; 0,9]1,0 [0,6; 1,0]6,0 [5,7; 6,1]<0,001*<0,001*0,968Отдел ЖКТСРК-ДСРК-Зконтроль4,0 [3,4; 3,9]3,0 [3,1; 3,7]Подвздошная 4,0 [3,5; 4,0]СлепаяДПКTNF-αИл 2Ил 10Сla 2Сla 3Сla 5* различия достигли статистически значимого уровня (p<0,017)#различия достигли уровня статистической тенденции (0,05<p<0,017)111Таким образом, в большинстве случаев статистически значимых различий вэкспрессии цитокинов и клаудинов между группами пациентов, страдающихдиарейным и обстипацинным вариантами СРК выявлено не было.4.3.3 Исследование градиента экспрессии цитокинов и белков плотныхконтактов у больных СРК-Д, СРК-З и в контрольной группеНами был исследован градиент экспрессии цитокинов и клаудинов вкаудальном направлении в группе пациентов, страдающих СРК, в подгруппах сразличными клиническими вариантами течения заболевания (СРК-Д, СРК-З), атакже в группе контроля.В группе обследованных лиц, не предъявляющих гастроэнтерологическихжалоб (КГ 1) нам не удалось выявить градиента экспрессии ни цитокинов, нибелков плотных контактов.В отличие от контрольной группы, у больных СРК было выявленодостоверное увеличение экспрессии TNF-a и Ил-2 в каудальном направлении(Таблица 35, Таблица 36).Таблица 35Градиент экспрессии TNFa в каудальном направлении у больных СРК и вконтрольной группеГрадиент0"+"контрольСРК27090,0%0,0%33010,0%100,0%* различия достигли статистически значимого уровняp<0,01112Таблица 36Градиент экспрессии Ил-2 в каудальном направлении у больных СРК и вконтрольной группеГрадиент0"-""+"контрольСРК25086,2%0,0%3010,30,0%1303,5%100,0%p<0,01* различия достигли статистически значимого уровняТакже у пациентов, страдающих СРК, определялось достоверное снижениев каудальном направлении экспрессии Ил-10 (Таблица 37).Таблица 37Градиент экспрессии Ил-10в каудальном направлении у больных СРК и вконтрольной группеГрадиент0"-""+"контрольСРК192363,3%76,7%060,0%20,0%11136,7%3,3%p<0,01Сходные изменения (снижение в каудальном направлении) определялись вэкспрессии клаудинов 3 и 5 (Таблица 38, Таблица 39).113Таблица 38Градиент экспрессии клаудина 3 в каудальном направлении у больных СРКи в контрольной группеГрадиент0"-""+"контрольСРК22073,3%0,0%43013,3%100,0%4013,3%0,0%p<0,01* различия достигли статистически значимого уровняТаблица 39Градиент экспрессии клаудина 5 в каудальном направлении у больных СРКи в контрольной группеГрадиент0"-""+"контрольСРК26089,7%0,0%2306.9%100,0%103,5%0,0%p<0,01* различия достигли статистически значимого уровняГрадиента экспрессии клаудина 2 у пациентов, страдающих СРК,издоровых лиц в каудальном направлении выявлено не было.Таким образом, в группе больных СРК в каудальном направленииотмечалисьразнонаправленныеградиентыэкспрессиипровоспалительныхцитокинов TNF-a и Ил-2 (положительный), противовоспалительного цитокинаИл-10 и белков плотных контактов (клаудин 3,5) (отрицательный).114Различий в экспрессии вышеназванных белков в каудальном направлениимежду пациентами СРК-Д и СРК-З выявлено не было (Таблица 40).Таблица 40Градиенты экспрессии TNF-a, Ил-2, Ил-10, cla 3, cla 5 у пациентов СРК-Д,СРК-З и в группе контроля (%)СРК-ДСРК-Зконтрольнаягруппа (к)pСРК-Д/СРК-ДСРК-ЗСРК-З/к/кTNF-a50,0 [49,2; 79,2]66,7 [48,6; 69,1]0,0 [-1,4; 21,4]0,8360,0000,000Ил-250,0 [40,9; 66,9]50,0 [38,8; 102,3]0,0 [-17,9; 4,2]0,8680,0000,000Ил-100,0 [-18,1; 18,1]0,0 [-26,0; -0,7]0,0 [7,4; 29,3]0,3950,0480,004Cla-3-50,0 [-57,4; -45,0]-50,0 [-63,1; -45,7]0,0 [-5,2; 8,8]0,5900,0000,000Cla-5-66,7 [-69,5; -55,6]-66,7 [-69,9; -55,6]0,0 [-5,5; 4,4]0,9830,0000,000Статистически достоверно при p<0,017; статистическая тенденция при 0,05>p>0,0164.3.4.
Корреляция симптомов заболевания с уровнем экспрессиицитокинов и белков плотных контактовВ проведенном нами исследовании были выявлены следующие корреляциисимптомов заболевания с уровнем экспрессии цитокинов и белков плотныхконтактов:- у больных СРК, вне зависимости от варианта течения заболевания, былавыявлена достоверная отрицательная корреляция между уровнем экспрессииTNF-a в биоптатах ДПК, подвздошной, слепой кишки, градиентом экспрессииTNF-a и интенсивностью абдоминальной боли (ВАШ).- у больных СРК-З определялась отрицательная корреляция между уровнемэкспрессии TNF-a в слепой кишке и уровнем тревоги по HARS.- у пациентов СРК-З также отмечалась отрицательная корреляция междуградиентом экспрессии Ил-2 и количеством дней плохого самочувствия.- У больных СРК-Д выявлялась статистически достоверная положительнаякорреляция уровня экспрессии Ил-2 в подвздошной и слепой кишке свыраженностью диареи.115- У пациентов с диарейным вариантом СРК определялась такжеотрицательная корреляция между градиентом экспрессии Ил-10 в биоптатах иколичеством обращений за медицинской помощью за истекший год иотрицательная корреляция между градиентом экспрессии клаудина 5 ивыраженностью депрессии по HDRS (Таблица 41).Таблица 41Корреляции уровня цитокинов, клаудинов и их градиентов с симптомами СРКУровеньПоказательЖКТτСРКДДПКИнтенсивность-0,51*-0,58*Подвздошнаяболи (ВАШ)-0,48*-0,54*СлепаяTNF aЗ-0,68*Градиент0,52*СлепаяHARSСлепаяHDRSСигмовиднаяЧастота стула (диарея)0,53*СигмовиднаяЧастота стула (запор)-0,59*ДПКОбращение за мед.помощью-0,80*(раз/год)ГрадиентИл-2-0,57*(дни/год)ПодвздошнаяЧастота стула (диарея)0,48*СлепаяЧастота стула (запор)0,48*ПодвздошнаяЧастота стула (запор)СлепаяЧастота стула (запор)ПодвздошнаяПлохое самочувствие (дни/год)ГрадиентОбращение за мед.помощьюИл-10Cla-5Плохое самочувствие(раз/год)СигмовиднаяЧастота стула (диарея)СигмовиднаяЧастота стула (запор)ГрадиентHDRS* различия достигли статистически значимого уровня-0,58*-0,54*116Такимобразом,увсехпациентов,страдающихСРК,отмечаетсядостоверное повышение уровня провоспалительных цитокинов (TNF-a, Ил-2),достоверное снижение противовоспалительного цитокина Ил-10, снижениеэкспрессии белков плотных контактов (клаудинов 3,5) в биоптатах кишки посравнению с контрольной группой.ВгруппебольныхСРКвкаудальномнаправлениивыявляютсяразнонаправленные градиенты экспрессии провоспалительных цитокинов TNF-aи Ил-2 (положительный), противовоспалительного цитокина Ил-10 и белковплотных клеточных контактов (клаудин 3,5) (отрицательный).
![](https://s.studizba.com/z.php?f=/templates/si/i/noavatar.png&w=100&h=100&t=1"){kind=avatar}
