Диссертация (1139664)
Текст из файла
Федеральное государственное автономное образовательное учреждениевысшего образования Первый Московский государственныймедицинский университет имени И.М. Сеченова Министерстваздравоохранения Российской Федерации (Сеченовский Университет)На правах рукописиМорозов Евгений НиколаевичПЕРСПЕКТИВЫ ПРИМЕНЕНИЯ МЕТОДОВ МОЛЕКУЛЯРНОЙПАРАЗИТОЛОГИИ В МОНИТОРИНГЕ ЗАСОЦИАЛЬНО ЗНАЧИМЫМИ ПАРАЗИТОЗАМИ03.02.11– ПаразитологияДиссертация на соискание ученой степени доктора медицинских наукНаучный консультантакадемик РАН, д.м.н., профессорСергиев Владимир ПетровичМосква – 20182ОГЛАВЛЕНИЕВВЕДЕНИЕ ......................................................................................................................
5ГЛАВА 1. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ .............................................................................. 151.1. Социальная значимость паразитарных заболеваний .......................................... 151.2. Молекулярная паразитология как системный элемент обеспечениябиологической безопасности России .......................................................................... 191.3.
Место молекулярной паразитологии в системе эпиднадзора ........................... 311.3.1. Виды мониторинга в системе эпидемиологического надзора .................... 351.4. Современные методы диагностики паразитозов ................................................ 371.5. Методологические принципы ПЦР ...................................................................... 401.5.1. Классическая ПЦР ...........................................................................................
421.5.2. ПЦР в реальном времени ................................................................................ 431.6. Перспективы применения методов молекулярной паразитологии ................... 44ГЛАВА 2. МАТЕРИАЛЫ, МЕТОДЫ И ОБЪЕМ ИССЛЕДОВАНИЙ .................... 492.1. Материалы и объем исследований ....................................................................... 492.1.1. Источник ДНК.................................................................................................. 492.1.1.1.
Малярия ...................................................................................................... 492.1.1.2. Лейшманиоз ............................................................................................... 502.1.1.3. Дирофиляриоз ............................................................................................
502.1.1.4. Криптоспоридиоз ...................................................................................... 512.1.1.5. Лямблиоз .................................................................................................... 512.1.1.6. Бластоцистоз .............................................................................................. 512.1.2. Аппаратура и инструменты ............................................................................ 522.1.3. Лабораторная посуда и материалы ................................................................
532.1.4. Реактивы ........................................................................................................... 532.2. Методы исследований ........................................................................................... 552.2.1.
Выделение ДНК ............................................................................................... 552.2.2. Постановка ПЦР............................................................................................... 5532.2.3. Реактивы и оборудование для постановки ПЦР ........................................... 552.2.4. Определение порога чувствительности ПЦР ................................................
572.2.5. Статистическая обработка результатов. ........................................................ 58ГЛАВА 3. ВОЗМОЖНОСТИ И ПЕРСПЕКТИВЫ ПРИМЕНЕНИЯ МЕТОДОВМОЛЕКУЛЯРНОЙ ПАРАЗИТОЛОГИИ В МОНИТОРИНГЕ ЗАТРАНСМИССИВНЫМИ ПАРАЗИТОЗАМИ ............................................................ 593.1.
Малярия ................................................................................................................... 593.1.1. Диагностические исследования...................................................................... 613.1.2. Поиск межштаммовых различий.................................................................... 663.2. Лейшманиозы ......................................................................................................... 673.3.
Трипаносомозы ....................................................................................................... 693.4. Дирофиляриоз ......................................................................................................... 693.5.Обнаружение возбудителей паразитозов в переносчике ................................ 71ГЛАВА 4. ВОЗМОЖНОСТИ И ПЕРСПЕКТИВЫ ПРИМЕНЕНИЯ МЕТОДОВМОЛЕКУЛЯРНОЙ ПАРАЗИТОЛОГИИ В МОНИТОРИНГЕ ЗАНЕТРАНСМИССИВНЫМИ ПАРАЗИТОЗАМИ....................................................... 754.1. Криптоспоридиоз ...................................................................................................
754.2. Лямблиоз ................................................................................................................. 764.3. Амебиаз ................................................................................................................... 784.4. Токсоплазмоз ..........................................................................................................
804.5. Трихомониаз ........................................................................................................... 814.6. Бластоцистоз ........................................................................................................... 814.7. Биогельминтозы ..................................................................................................... 824.8. Геогельминтозы ......................................................................................................
83ГЛАВА 5. ПРИМЕНЕНИЕ МОЛЕКУЛЯРНЫХ МЕТОДОВ В СИСТЕМЕЭПИДЕМИОЛОГИЧЕСКОГО НАДЗОРА ЗА ПАРАЗИТОЗАМИ(ПОПУЛЯЦИОННО-ГЕНЕТИЧЕСКИЕ ИССЛЕДОВАНИЯ) ................................. 865.1. Энтомологический мониторинг за переносчиками возбудителейдирофиляриозов............................................................................................................. 8645.2. Создание инструментов эпидемиологического надзора за тропическимиболезнями (на примере лихорадки Зика) .................................................................... 885.3.
Эпидемиологическая диагностика в потенциальных и активных очагахмалярии........................................................................................................................... 945.4. Проверка достоверности отсутствия больных малярией в оздоровленныхочагах комплексом лабораторных методов диагностики ....................................... 1005.5. Скрининг населения с применением ДНК-диагностики в очагахвисцерального лейшманиоза в Папском районе Наманганской областиРеспублики Узбекистан ..............................................................................................
1045.6. Результаты скрининга носителей бластоцист ................................................... 112ГЛАВА 6. ВОЗМОЖНОСТИ ПРИМЕНЕНИЯ МОЛЕКУЛЯРНЫХ МЕТОДОВ ВСИСТЕМЕ ЭПИДЕМИОЛОГИЧЕСКОГО НАДЗОРА ЗА ПАРАЗИТОЗАМИ ... 1196.1. Мобильная паразитологическая лаборатория ................................................... 121ОБСУЖДЕНИЕ РЕЗУЛЬТАТОВ И ЗАКЛЮЧЕНИЕ.............................................. 133ВЫВОДЫ .....................................................................................................................
142ПРАКТИЧЕСКИЕ РЕКОМЕНДАЦИИ ..................................................................... 144СПИСОК СОКРАЩЕНИЙ ......................................................................................... 145СПИСОК ЛИТЕРАТУРЫ...........................................................................................
146ПРИЛОЖЕНИЕ 1 ........................................................................................................ 172ПРИЛОЖЕНИЕ 2 ........................................................................................................ 175ПРИЛОЖЕНИЕ 3.
....................................................................................................... 176ПРИЛОЖЕНИЕ 4 ........................................................................................................ 1785ВВЕДЕНИЕАктуальность проблемы. В 90-х гг. ХХ века в России возникли «новые ивозвращающиеся» социально опасные паразитозы, заражение возбудителямикоторых происходит из-за контаминации среды обитания человека [80].Возбудители некоторых паразитозов являются потенциальными факторамибиологической угрозы, ряд паразитарных болезней ассоциированны с ВИЧинфекцией. Наиболее частым патологическим проявлением паразитозов служитиммуносупрессия.возникновениюВрезультатедругихпаразитозыинфекционныхспособствуютболезнейичастомунеинфекционныхпатологических состояний [82, 89].Как и при других видах инфекционной патологии, эффективность истоимость лечения паразитарных болезней напрямую зависит от сроковвыявления заболевания и стадии развития патологического процесса.Всвязисэтимсуществуетнеобходимостьвсовременныхвысокочувствительных методах мониторинга за паразитарными болезнями(лабораторнаяустойчивостью,диагностикаконтрольпаразитозов,мониторингэффективностилечения,залекарственнойпоисквнутривидовыхразличий возбудителей паразитарной природы, определение таргетных участков вгеноме паразитов, как объект создания перспективных лекарственных средствнового поколения и др.).
Одним из возможных путей решения этой проблемыможет стать применение молекулярно-биологических методов, например,полимеразнойцепной реакции (ПЦР), в настоящее время ограниченноприменяющейся в отечественной паразитологии [56, 58].Полимеразная цепная реакция в настоящее время является одним изнаиболееэффективныхидентификациидиагностическихфрагментовгеномовинструментоввозбудителейиндикациииинфекционныхипаразитарных болезней, а также изучения целых геномов различных патогенов6паразитарнойприроды.ПЦРвсравнениистрадиционнымиметодамидиагностики обладает более высокой чувствительностью, специфичностью ипозволяет проводить прямое определение присутствия генетических фрагментовмикроорганизма непосредственно в клиническом материале без получения чистойкультурывозбудителя,чтосокращаетсрокиисследованияиснижаеттрудозатраты.
Характеристики
Тип файла PDF
PDF-формат наиболее широко используется для просмотра любого типа файлов на любом устройстве. В него можно сохранить документ, таблицы, презентацию, текст, чертежи, вычисления, графики и всё остальное, что можно показать на экране любого устройства. Именно его лучше всего использовать для печати.
Например, если Вам нужно распечатать чертёж из автокада, Вы сохраните чертёж на флешку, но будет ли автокад в пункте печати? А если будет, то нужная версия с нужными библиотеками? Именно для этого и нужен формат PDF - в нём точно будет показано верно вне зависимости от того, в какой программе создали PDF-файл и есть ли нужная программа для его просмотра.
![](https://s.studizba.com/z.php?f=/templates/si/i/noavatar.png&w=100&h=100&t=1"){kind=avatar}
