Диссертация (1139658), страница 10
Текст из файла (страница 10)
Rv3804c(Ag85а, секретируемый антиген 85A. fbpA. MPT59) – секретируемый антигенМБТ, экспрессируется на ранних стадиях инфекционного процесса. Отвечает завысокое сродство МБТ к фибринэктину. Играет роль в синтезе клеточной стенки.49Обладаетмиколилтрансферазнойбиосинтезедимиколятатригалозы [399]. Экспрессируется как MБТ, БЦЖ, так иатипичнымимикобактериями.Важноеактивностьюнаблюдение,вотмеченодостоверноеснижениеиммунореактивности по отношению к белку 85a у пациентов группы риска ЛУ ТБ[43].
Тем не менее, как и с ТСТ, эти анализы не проводят различия между MБTинфекцией и активным ТБ [313].Перспективный белок – Rv2660c, ген которого кодируется в RD11 областигенома МБТ, и его активная экспрессия отмечена в латентной фазе инфекции[134]. Входит в состав многоступенчатой вакцины H56, которая, как показалиисследования, усиливала защитные эффекты БЦЖ против активного ТБ иреактивации ЛТИ [355].Идентификация антигенов, специфичных для МБТ и замены очищенногобелкового производного, остается основным международным исследовательскимприоритетом. Мета-анализ, опубликованный в 2016 г., показал отсутствиезолотогостандартавиммунодиагностикетуберкулезнойинфекцииирекомендовал рассмотреть возможность увеличить чувствительность тестов длядифференциальнойдиагностикиЛТИиактивнойзасчетдобавленияспецифических белков в антигенный коктейль [436].Таким образом, во фтизиатрии большое значение имеют задачи, длярешения которых потенциально могут быть использованы биомаркеры: раннеевыявление инфицирования МБТ и больных с активной формой ТБ, а такжедифференциальная диагностика активной и латентной МБТ-инфекции.
Анализданных литературы позволяет предположить, что для быстрой диагностики ТБмогут иметь значение такие биомаркеры, как антиген-индуцированные IFN-γ.Резюме:Анализ современной ситуации по туберкулезной инфекции у детей показал,что сохраняются нерешенные вопросы иммунопатогенеза ТБ, проблема раннейдиагностики с целью определения стадии инфекции (активная или латентная).Учитывая вышеперечисленное, для лучшего понимания патогенеза ТБ, решения50проблемы ранней и дифференциальной диагностики туберкулезной инфекции удетей, направленно наше исследование.51ГЛАВА 2. МАТЕРИАЛ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ2.1 Дизайн исследования, критерии включения и исключения изисследованияДиссертационнаяработавыполненавФГБОУВО«Омскийгосударственный медицинский университет Минздрава России», на кафедрепедиатрии ДПО.
Клиническая часть работы проведена с 2014 по 2017 гг. на базеКУЗ ОО «Специализированная детская туберкулезная клиническая больница»(главный врач – А. Л. Ванюков), КУЗ ОО «Клинический противотуберкулезныйдиспансер» (главный врач – М. П. Татаринцева), БУЗ ОО «Городская детскаяклиническаябольница№2им. В. П. Бисяриной»(главныйврач–А. П.
Пилипенко) г. Омска. Иммунологические и молекулярно-генетическиеисследования проведены на базе ФБУН «Омский научно-исследовательскийинститутприродно-очаговыхинфекций»Роспотребнадзора(директор–Н. В. Рудаков) (соглашение о научно-исследовательской работе от 19.06.2014). Напроведение данного исследования получено разрешение этического комитетаОмской государственной медицинской академии (протокол № 51 от 10.10.2012).Для участия детей в исследовании от родителей или их законных представителейбыло получено добровольное информированное согласие.В соответствии с поставленной целью и задачами проведено проспективное,поперечное исследование 310 детей, которые были разделены на три группы взависимости от степени выраженности туберкулезной инфекции:1-я – 110 детей с установленным диагнозом туберкулез (группа «ТБ»),2-я – 156 детей с латентной туберкулезной инфекцией (группа «ЛТИ»),3-я – 44 ребенка, не инфицированных МБТ (группа «НТ»).Дополнительно из 1-й группы было выделено две подгруппы: 1-я – 86 детейс первичными формами туберкулеза (группа «ТБ1») и 2-я – 24 ребенка свторичными формами туберкулеза (группа «ТБ2»).52Дополнительно из 2-й группы было выделено две подгруппы: 1-я – 75 детейв раннем периоде первичной туберкулезной инфекции (группа «РППТИ») и 2-я –81 ребенок, инфицированный МБТ более года (группа «Т»).Дополнительно из 3-й группы было выделено две подгруппы: 1-я – 21ребенок с поствакцинальной аллергией (группа «ПВА») и 2-я – 23 ребенка сположительной туберкулиновой анергией (группа «ПТА»).Критерии включения детей в 1-ю группу:1.
Наличие письменного информированного согласия пациента или его законныхпредставителей на участие в исследовании.2. Возраст до 18 лет включительно.3. Установленный диагноз «туберкулез».Критерии включения детей во 2-ю группу:1. Наличие письменного информированного согласия пациента или его законныхпредставителей на участие в исследовании.2. Возраст до 18 лет включительно.3. Исключение диагноза «туберкулез».4. Инфицирование МБТ по результатам туберкулинодиагностики (Приказ МЗ РФ№ 109, от 21.03.2003, приложение № 4).Критерии включения детей в 3-ю группу:1. Наличие письменного информированного согласия пациента или его законныхпредставителей на участие в исследовании.2.
Возраст до 18 лет включительно.3. Исключение диагноза «туберкулез».4. Исключение инфицирование МБТ по результатам туберкулинодиагностики(Приказ МЗ РФ № 109, от 21.03.2003, приложение № 4).Критерии исключения пациентов из исследования:1. Отказ пациента или законного представителя от дальнейшего участия висследовании.2. Возраст старше 18 лет.53Из общего числа (310) обследованных детей всем были проведеныспецифические иммунологические исследования, из них у 169 детей –молекулярно-генетические (для проведения исследования дети были разделены наосновную группу, которую составил 81 ребенок, больной ТБ, и на контрольную –88 детей без ТБ).Размер выборки пациентов, минимально достаточный для получениядоказательных данных, был рассчитан в программе OpenEpi версия 3 исходя изгенеральной совокупности детей Омской области на 2013 г.
(378900) и отчетныхформ по туберкулинодиагностике.Дизайн исследования представлен на рисунке 2.1.54КритериивключенияОбъектисследованияn=310Критерииисключениягр. ТБ n=110Анализ клинико-анамнестических данных,эпидемиологического анамнеза,общеклинических, бактериологических илучевых результатов исследования,туберкулинодиагностики, пробы сдиаскинтестомгр. ЛТИ n=156гр. НТ n=44Молекулярно-генетические исследования полиморфизма T-1488C гена IFNG иС-2508Т гена МСР1, специфические иммунологические исследования:определение гамма-интерферона индуцированного: ППД-Л, CFP32B, Rv2660c,ESAT6, 85а, ESAT6-CFP10гр. ТБ1n=86гр. РППТИ n=75гр.
ПВА n=21гр. ТБ2n=24гр. Т n=81гр. ПТА n=23гр. ТБО n=30гр. ЛТИ1 n=30гр. ЛТИ2 n=30гр. НТО n=30Разработка и оценка алгоритма выявления и диагностики туберкулезнойинфекции (программ) с учетом специфических иммунологических имолекулярно-генетических исследований, оценка специфичности ичувствительностиРисунок 2.1 - Дизайн исследования552.2 Клиническая характеристика детей, включенных в исследованиеВ группе «ТБ» было обследовано 110 детей, средний возраст составил 9,5 ±0,5 лет (рис.
2.2).Гистограмма (база 110.sta 27v*110c)в озраст, лет = 110*3,4*normal(x; 9,4727; 5,1735)3530количество детей25201510501,04,47,811,214,618,0в озраст, летРисунок 2.2 – Распределение по возрасту детей, больных ТБИз рисунка 2.2 следует, что в обследуемой группе больных ТБ каждыйвторой ребенок (51; 46,6%) был в возрасте до 8 лет, каждый четвертый (26; 23,6%)– подросткового возраста (15-18 лет).По полу пациенты распределялись следующим образом: 60 (54,5 %)мальчиков, 50 (45,5 %) девочек.
Следует отметить, что среди больных ТБ неотмечалось достоверных различий по половому признаку (р>0,05).Заболевание (ТБ) у 59 детей (53,6%) было выявлено по результатаммассовой туберкулинодиагностики, из них в 13 случаях – c одновременнымвыявлением семейного очага ТБ. При обследовании по поводу контакта сбольными ТБ диагноз был установлен у 29 детей (26,4%). При плановыхфлюорографических осмотрах выявлено 15 (13,6%) заболевших детей. Замедицинской помощью, с жалобами со стороны респираторного тракта и56симптомами интоксикационного характера, обратилось 7 (6,4%) детей, из них водном случае – с одновременным выявлением очага ТБ.Данные эпидемиологического анамнеза свидетельствовали о том, чтоконтакт с больным ТБ был установлен у 74 заболевших детей (67,3%), при этомтесный семейный контакт – у 47 (n=74; 63,5%) детей.
На момент диагностикизаболевания 17 детей (n=74; 23%) были под наблюдением по IV группедиспансерного учета (только каждый четвертый ребенок!), средний срокнаблюдения составил 2,8±0,5 (95% ДИ 1,8-3,8) лет, в половине случаев (9; 52,9%)заболевание развивалось в первые два года контакта. В 5 случаях (n=74; 6,8%)дети были из «очага смерти». В контакте с больными активной формойтуберкулеза с бактериовыделением находилось 56 заболевших детей (n=74;75,7%), из них в 37 случаях (n=56; 66,1%) установили высокий рисклекарственной резистентности (у источника регистрировали множественнуюлекарственную устойчивость – МЛУ).По результатам динамики ежегодной туберкулинодиагностики среди детей,заболевших туберкулезом, в 44 случаях (40%) регистрировали инфицированиеМБТ до трех лет, что косвенно могло свидетельствовать о семейном илиродственном контакте по ТБ.
![](https://s.studizba.com/z.php?f=/templates/si/i/noavatar.png&w=100&h=100&t=1"){kind=avatar}
