Диссертация (1139649), страница 13
Текст из файла (страница 13)
Этообъясняется тем, что дети, имеющие жалобы на качество вакцинации,обследовалисьилечилисьнетолькопонаправлениямизфилиаловпротивотуберкулезных учреждений г. Москвы, а также из Московской области ииногородние.При указании клинической формы ОПИБ руководствовались наиболеетяжёлым в клиническом отношении проявлением БЦЖ-инфекции. Например, присочетании холодного абсцесса и лимфаденита в суммарном анализе данноепроявление анализировали как лимфаденит. Тяжесть ОПИБ определяли поклассификации ВОЗ. Согласно предложенной Международным союзом по борьбес туберкулезом ВОЗ в 1984 году классификации, все ОПИБ подразделяются накатегории:категория 1 – воспалительные поражения, развившиеся в месте введениявакцины или в соответствующих региональных лимфатических узлах –инфильтраты, абсцессы, свищи, язвы и регионарные лимфадениты, включаяпарааортальные;категория 2 – воспалительные поражения, развившиеся в результатегематогенного распространения бактерий вакцинного штамма вне зоны введениявакцины,которыеподразделяютсянаподгруппы:2-А(локальные(моноочаговые) поражения – оститы и мягкотканные изолированные абсцессы) и682-Б(генерализованныелокализациями,(множественные)развившиесяупоражениядетейбезсдвумясиндромаиболееврожденногоиммунодефицита);категория 3 – диссеминированная БЦЖ-инфекция с полиорганнымпоражением при врожденном иммунодефиците;категория 4 – пост-БЦЖ-синдром – заболевания аллергического характера,возникшие вскоре после иммунизации БЦЖ в результате специфическойсенсибилизации: узловатая эритема, кольцевидная гранулема, сыпь, келоид,увеиты.К лёгким относятся ОПИБ категорий – 1, а к тяжёлым – 2 и 3 категории.Возрастно-половой состав детей с ОПИБ, наблюдавшихся в ГКДЦ, представлен втаблице 2.1.Таблица 2.1Возрастно-половой состав детей с осложнениямиКлиническая формаОПИБМестные реакцииБЦЖ-лимфаденитБЦЖ-оститВсегоПолЧисло детейВозраст в мес, квартилиабс.%25%50%75%мужской6338,961017женский9961,16,51118мужской6151,3469женский5848,74,3610мужской4153,2141926женский3646,8141823мужской16546,151118женский19353,961017Различия по:возраступолуp=0,5p<0,01p=0,1p=0,8p=0,4p=0,5p=0,9p=0,0369Общий размер выборочной совокупности составил 358 единиц наблюдения,что достаточно для определения большинства параметров (кроме пола) сточностью 95% и погрешностью 5% .Среди детей с местными осложнениями доля девочек была статистическизначимо (p<0,01) чем доля мальчиков.
Данное осложнение ассоциировано симмунизацией детей в амбулаторных условиях (см. главу 5), а популяционныеданные о вакцинации вне родильных домов в разбивке по половому признакуотсутствуют. Это оказало влияние на половые различия в целом для всех ОПИБ(p=0,03). Для остальных форм ОПИБ половые различия несущественны. По своимвозрастным характеристикам различия между группами были статистическинезначимы.Несмотря на то, что в ГКДЦ консультировались преимущественно дети,зарегистрированные на территории г. Москвы, в нём также консультировалисьдети, постоянно проживающие на территории других субъектов РоссийскойФедерации. На территории г.
Москвы было зарегистрировано 295 детей,Московской области – 43 ребёнка, других субъектов Российской Федерации – 20детей.Возрастно-половой состав детей – жителей г. Москвы с различнымиклиническими формами ОПИБ представлен в таблице 2.2.При сохраняющейся половой асимметрии среди детей с местными ОПИБ,различия возрастно-половой структуры в остальных клинических формах ОПИБстатистически малозначимы.70Таблица 2.2Возрастно-половой состав детей – жителей г. Москвы с различнымиклиническими формами ОПИБ, консультированных в ГКДЦКлиническая формаосложненийМестныеосложненияБЦЖ-лимфаденитБЦЖ-оститВсегоПолЧисло детей Возраст в мес., квартилиАбс.%25%50%75%мужской5338,751117женский8461,361014,3мужской5353,0366женский4747,05711мужской3153,414,52226,5женский2746,6141725мужской13746,451018женский15853,661016Различия по:возраступолур=0,4р<0,01р=0,06р=0,5р=0,4р=0,6р=1,0р=0,072.3.
Методы исследованияВсем детям проведено унифицированное фтизиатрическое обследование,котороедополненосовременнымииммунологическимиимолекулярно-генетическими методами исследования.2.3.1. Данные анамнеза и объективный статусДля включенных в изучение клинической картины и результативностилабораторной диагностики случаев ОПИБ оценивали:– данные анамнеза заболевания (включая сведения о проведенных ранеедиагностических и лечебных мероприятиях), анамнеза жизни (включая сведенийо сопутствующих заболеваниях), эпидемидемиологического анамнеза, сведения опредшествовавшей иммунизацией вакциной БЦЖ/БЦЖ-М;– данные объективных методов обследования, применяемых с учётомраннего возраста детей.
Наличие болевого синдрома при пальпации определяли71по появлению гримасы боли, громкого безутешного плача при пальпациипоражённого участка [110];– результаты применения иммунологических методов (пробы Манту с 2 ТЕППД-Л, пробы с аллергеном туберкулёзным рекомбинантным, определениепопуляции лимфоцитов, уровень иммуноглобулинов, фагоцитарную активностьлейкоцитов крови).Сведения о случае осложнения иммунизации БЦЖ/БЦЖ-М, вносили всоответствующие медицинские документы: историю развития ребёнка (ф. 112/у);медицинскую карту ребёнка (ф. 026/у); медицинскую карту амбулаторногобольного (ф.
025-87); медицинскую карту стационарного больного (ф. 003-1/у);сертификат профилактических прививок (ф. 156/у-93).2.3.2. Иммунологические методы диагностики осложненийИзменения иммунологических характеристик оценивали по состояниюклеточного и гуморального иммунного ответа.Уровень специфической сенсибилизации характеризовались по результатампробы Манту 2ТЕ и пробы с аллергеном туберкулезным рекомбинантным(Диаскинтест®).Оценка индивидуальных иммунологических показателейУ 24 детей с осложнениями вакцинного процесса были изучены показателииммунного статуса и соотнесены с тяжестью процесса.Определение популяции лимфоцитов проводили методом проточнойцитофлюорометрии на проточном цитофлюориметре Cytomics FC 500 (BekmanCoulter) с использованием моноклональных антител с маркерами CD 45+ CD3+ –Т-клеток, CD 45+CD3+ CD4+ – Т-хелперов, CD45+ CD3+CD8+ – Т-супрессоровцитотоксических киллеров, CD45+ CD3-CD16+CD56+ – натуральных киллеров,CD45+ CD3-CD19+ – В-лимфоцитов [92].Уровень иммуноглобулинов в сыворотке IgG, IgA, IgM определяли методомиммунодиффузии в агаре по Манчини [206].72Фагоцитарную активность лейкоцитов крови изучали с помощью проточнойцитофлюорометрии с использованием ФИТЦ-меченных стафилококков, напроточноном цитофлюориметре Cytomics FC 500 [299].2.3.3.
Молекулярно-генетические методы, ПЦР – диагностикаИспользовали набор реагентов «АмплиСенс® МТС-diff-FL», которыйпринадлежит линейке комплектов реагентов марки «АмплиСенс», позволяющейпроводитькомплексноеисследованияклиническихобразцовикультурмикроорганизмов, с этапа обнаружения ДНК микобактерий («АмплиСенс® MTCFL» или «АмплиСенс® MБТ-Eph»), определения бактериальной нагрузки,дифференцирования микобактерий до вида и определением чувствительностивыявленных микобактерий к противотуберкулезным препаратам. Набор реагентов«АмплиСенс® МТС-diff-FL» предназначен для дифференцирования видовмикобактерий туберкулеза (МБТ) – Mycobacterium tuberculosis complex (MTC) –человеческого (M.tuberculosis) и бычьего (M.bovis), а также вакцинного штамма(M.bovis BCG) – в клиническом материале и культурах микроорганизмов методомПЦР с гибридизационно-флуоресцентной детекцией продуктов амплификации.Для анализа использовали образцы ДНК, экстрагированной из клиническогоматериала или культур микроорганизмов, в которых на этапе обнаружения и/иликоличественного определения Mycobacterium tuberculosis complex были полученыположительные результаты.
Набор реагентов предназначен для работы с ранееэкстрагированной ДНК, полученной при использовании комплектов реагентов«ДНК-сорб-В», «РИБО-преп» или «ДНК-сорб-С» для экстракции ДНК/РНК изисследуемых образцов разных видов клинического материала или культурмикроорганизмов производства ФБУН ЦНИИЭ Роспотребнадзора.Дифференцирование ДНК микобактерий туберкулеза проводилось методомполимеразной цепной реакции (ПЦР) в формате «мультипрайм» с одновременнойамплификациейчетырехфрагментовДНК,триизкоторыхявляютсяспецифическими мишенями, детерминирующими один из видов Mycobacteriumtuberculosis complex: M.
![](https://s.studizba.com/z.php?f=/templates/si/i/noavatar.png&w=100&h=100&t=1"){kind=avatar}
