Диссертация (1139649), страница 10
Текст из файла (страница 10)
Приэлектрофорезе в геле 4% агарозы наблюдается характерный набор полос, исходяиз результатов рестрикции двумя фрагментами. Получают фрагменты ДНКмикобактерий размерами (нуклеотидных пар). С помощью ПЦР может бытьпроведена видовая идентификация, в том числе идентификация M.bovis и дажеM.bovis BCG. Для этого анализируется наличие или отсутствие некоторых геновв геномных областях RD1, RD9 и RD10. RD1 отсутствует в M.bovis (BCG), ноприсутствуетввирулентныхиспользованиемштаммах3-праймернойотсутствующийвM.bovisM.bovis.системы,BCGучастокПрименениепозволяющейДНК,даетПЦРсопределитьвозможностьдифференцировать культуры M.bovis BCG от M.tuberculosis и M.bovis.
При этом,амплифика,лизированныйвтритонеХ−100культурыM.bovisBCGдемонстрирует в стандартном агарозном гельэлектрофорезе фрагмент ДНКоколо 200 н.п., тогда как другие виды микобактерий туберкулезного комплекса –фрагмент около 150 н.п. [149, 167, 182, 213, 221, 223, 240, 245, 286, 309].Интересна методика определения ДНК−микробиочипов. В этой системепроводится аналогичная ПЦР−амплификация вариабельной области 16SrРНК, собразованиемампликонов,меченныхфлюоресцеином,ипоследующейгибридизацией с ДНК-зондами (олигонуклеотидами) при высокой плотности ихфиксациивмикроучастках.Анализрегистрируетсясканированиемфлюоресцирующих участков.
Была продемонстрирована идентификация 54видов микобактерий, в т.ч. и M.bovis BCG. Однако, даже при таких новейшихметодиках выделить возбудитель по прежнему задача не из легких [48, 67].ЗаключениеТаким образом, в литературе достаточно указаний на важность инеобходимость проведения специфической профилактики туберкулеза. Вопросыбезопасности иммунизации являются актуальными в настоящее время и требуютизучения. Анализ показателей частоты осложнений после вакцинации иревакцинации БЦЖ как в целом по России, так и в регионах свидетельствует о51важности оценки состояния вакцинопрофилактики для обоснования мероприятийпо снижению поствакцинальной патологии.Отсутствие единого мнения по данной проблеме, единых подходов кдиагностике, выявлению, лечению и контролю за осложнениями иммунизацииприводит к тому, что в современной отечественной литературе нет четкихстатистических данных о частоте поствакцинальных осложнений в России,отражающих реальную ситуацию в полной мере за последние 15 лет.Диагностика БЦЖ-осложнений до настоящего времени остается сложной,прежде всего, из-за особенностей течения болезни и трудности лабораторногоподтверждения возбудителя, идентификация которых требует исследований,доступных не всем лабораториям и не всегда дающих положительный ответ.В сложившейся ситуации комплексное изучение эпидемиологических,клинических,вакцинамидиагностическихБЦЖ/БЦЖ-Муособенностейдетейосложненийявляетсяактуальнойиммунизациипроблемойфтизиопедиатрии, которая позволит в целом снизить риск осложнений/52ГЛАВА 2.МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯИсследование проводилось на базе НИИ Фтизиопульмонологии ПервогоМГМУ им.
И.М. Сеченова. Выбор базы исследования обусловлен наличием всоставе НИИ фтизиопульмонологии Республиканского центра по осложнениямпротивотуберкулезной вакцины Минздрава России.Объект исследования – группа заболеваний, развившихся как осложнениепосле иммунизации вакциной БЦЖ/БЦЖ-М.Предметисследования–особенностивыявления,диагностики,клинического течения и мониторинга осложнений после иммунизации вакцинойБЦЖ/БЦЖ-М.Единица измерения – случай осложнения после иммунизации вакцинойБЦЖ/БЦЖ-М.2.1. Источники сведений для проведения эпидемиологических исследованийи изучения системы мониторинга туберкулёзаВ ходе исследования были использованы сведения из форм Федерального,статистического наблюдения (ФСН):– форма № 33 ФСН – «Сведения о больных туберкулёзом» (далее – ф.
№ 33)за 2000-2015 гг. как в целом по Российской Федерации (в период 2000–2015 гг. –16 документов), так и по субъектам Российской Федерации в период 2000–2015гг. (до 2001 г. – без Республики Чечня; до 2014 г. – без Республики Крым и г.Севастополя) – 1331 документ;– форма № 5 ФСН – «Сведения о профилактических прививках» в период2005–2015 гг. (до 2014 г.
– без Республики Крым и г. Севастополя) – 917документов;– форма № 8 ФСН – «Сведения о заболеваниях активным туберкулёзом»(далее – ф. № 8) в период 2005–2015 гг. (до 2014 г. – без Республики Крым и г.Севастополя) – 917 документов.53Также в ходе исследования были изучены сведения из федеральногорегистра осложнений после иммунизации вакциной БЦЖ (далее – РегистрОПИБ). Регистр ОПИБ создан на основе медицинской документации «Картаобследования вакцинированных и ревакцинированных БЦЖ и БЦЖ-М детей иподростков при осложненной реакции на месте прививки» (Приложение №1),утвержденной нормативными документами [94, 120].
Сведения из Регистра ОПИБбыли зафиксированы по состоянию на 2015 г. На момент взятия регистра вразработку он содержал 3359 записей.Источником информации о числе зарегистрированных случаев осложненийпосле иммунизации вакциной БЦЖ (ОПИБ) была ф. № 33 по субъектамРоссийской Федерации за 2000-2013 годы.До 2005 г. была доступна информация о числе лиц, взятых и состоящих научёте в VI-Г группе диспансерного наблюдения (приказ № 324) – ф. № 33, т. 2100,с. 14, гр. 4–5 для впервые взятых на диспансерный учёт и гр.
6–7 для состоящихна диспансерном учёте;В 2005-2008 гг. доступна информация о лицах, взятых и состоящих на учётев VA, VБ и VВ группах диспансерного наблюдения [94] – ф. № 33., т. 2100, с. 17–19, гр. 4 и 5 – для взятых на диспансерный учёт и гр.
6 и 7– для состоящих поддиспансерным наблюдением.После 2009 года доступна информация о лицах, впервые взятых на учёт в Vгруппу диспансерного наблюдения, из них – в VА и VБ группы диспансерногонаблюдения. Информация о лицах, состоящих под диспансерным наблюдением вуказанных группах, стала недоступна для мониторинга.В ходе анализа динамических рядов по данным ф. № 33, были выявлены«вспышки» ОПИБ в нескольких субъектах Российской Федерации, чтопотребовало уточнения их наличия и генеза.В Курганской области по данным ф.
33 отмечалась вспышка осложнений в2001 и 2002 гг. (рис. 2.1).54Число случаев, абс.100080060040041029720034 836010459733132000 2001 2002 2003 2004 2005 2006 2007 2008 2009 2010 2011 2012 2013ГодыРис. 2.1. Динамика числа детей, впервые взятых на диспансерный учёт по поводуОПИБ в Курганской области в 2000–2013 гг.В Регистр ОПИБ было за этот период внесено 4 случая.
При уточненииситуации выяснилось, что вспышка действительно имела место; в качествепричины вспышки указаны «индивидуальные особенности организма». Встатистическом наблюдении данные сохранены.В Астраханской области по данным ф. 33 отмечалась «вспышка»зарегистрированных осложнений вакцинации БЦЖ в 2006 и 2007 годах (рис. 2.2).Число случаев, абс.2001761501241005020012100411012000 2001 2002 2003 2004 2005 2006 2007 2008 2009 2010 2011 2012 2013ГодыРис. 2.2. Динамика числа детей, впервые взятых на диспансерный учёт по поводуОПИБ в Астраханской области в 2000–2013 гг., по данным ф.
№ 33.В Регистр ОПИБ в этот период был внесен один случай. При уточненииситуации выяснилось, что имела место статистическая ошибка при составлении ф.№ 33, сделанная два года подряд одним и тем же районным фтизиатром. В55указанный период подтвердилось наличие единственного осложнения (ребенок15–17 лет, взятый на учёт в VВ ГДН). Динамический ряд по Астраханскойобласти был скорректирован в соответствии с фактически имевшей местоситуацией.В Новосибирской области по данным ф.
№ 33 отмечалась «вспышка»зарегистрированных ОПИБ в 2005 г., обусловленная тем, что в VВ ГДН быловзято 269 детей 0–14 лет и 26 детей в возрасте 15–17 лет (рис. 2.3).Число случаев, абс.3503002502001501005003224141713 1826 1827 141923842000 2001 2002 2003 2004 2005 2006 2007 2008 2009 2010 2011 2012 2013ГодыРис. 2.3. Динамика числа детей, впервые взятых на диспансерный учёт по поводуОПИБ в Новосибирской области в 2000-2013 гг., по данным ф. № 33.В Регистр ОПИБ в это период было внесено 15 случаев.
При проверкесведений информация о наличии большого количества детей, взятых надиспансерный учёт в VB ГДН, не подтвердилась. Всего в V ГДН было взято 33ребенка, из них 6 – в VВ ГДН.В Ленинградской области по данным ф. 33 в 2010 г. отмечалась «вспышка»зарегистрированных ОПИБ (рис.
2.4)56Число случаев, абс.1007580604020229523323410402000 2001 2002 2003 2004 2005 2006 2007 2008 2009 2010 2011 2012 2013ГодыРис. 2.4. Динамика числа детей, впервые взятых на диспансерный учёт по поводуОПИБ в Ленинградской области в 2000-2013 гг., по данным ф. № 33.В Регистре ОПИБ сведения о зарегистрированных случаях ОПИБ в этотпериод отсутствуют. При уточнении информации выяснилось, что имела местостатистическая ошибка, причину которой в настоящее время уточнить непредставляется возможным. Также невозможно уточнить и истинное числослучаев ОПИБ по Ленинградской области в 2010 году.
Динамический ряд поЛенинградской области был скорректирован: в 2010 г. проставлено усреднённоезначение числа вакцинации БЦЖ за период 2000–2009 и 2011 – 2013 гг. – 3.В Псковской области по данным ф. № 33 в 2002 г. отмечалась «вспышка»зарегистрированных ОПИБ среди детей в возрасте 15–17 лет (рис. 2.5).Число случаев, абс.3027252015105083200002000012000 2001 2002 2003 2004 2005 2006 2007 2008 2009 2010 2011 2012 2013ГодыРис. 2.5. Динамика числа детей, впервые взятых на диспансерный учёт по поводуОПИБ в Псковской области в 2000–2013 гг., по данным ф. № 33.57В Регистре ОПИБ сведения о зарегистрированных случаях ОПИБ поПсковской области в этот период отсутствуют.
Уточнено истинное количествослучаев осложнённого течения вакцинации БЦЖ; в том числе за остальные годы.В Республике Башкортостан по данным ф. № 33 в 2000 г. отмечалась«вспышка» зарегистрированных ОПИБ среди детей в возрасте 0–14 лет (рис. 2.6).123Число случаев, абс.120100806040209258733337542202000 2001 2002 2003 2004 2005 2006 2007 2008 2009 2010 2011 2012 2013ГодыРис. 2.6. Динамика числа детей, впервые взятых на диспансерный учёт по поводуОПИБ в Псковской области по данным ф.
№ 33 в 2000-2013 гг.В Регистре ОПИБ сведения о зарегистрированных случаях ОПИБ в этотпериод отсутствуют. Уточнено истинное количество случаев осложнённоготечения вакцинации БЦЖ в 2000 г. (7 случаев).В конечном итоге данные ф. № 33 были скорректированы с учётомвыявленных статистических ошибок, что позволило провести дальнейшиеэпидемиологические расчёты.При изучении существующей системы мониторинга ОПИБ определяли рядпараметров.Наполнение Регистра ОПИБ изучали путём сопоставления сведений изРегистра ОПИБ с числом зарегистрированных ОПИБ по данным ф.
![](https://s.studizba.com/z.php?f=/templates/si/i/noavatar.png&w=100&h=100&t=1"){kind=avatar}
