Диссертация (1139554), страница 40
Текст из файла (страница 40)
Оценка влияния АИТ на уровень цитокинов у больныхДля комплексной оценки механизмов активации лимфоцитов периферической крови у онкологических больных, мы сформировали подход к исследованию, предусматривающий определение функционального состояния гуморального звена иммунной системы у больных ОЖКТ и меланомой в процессепротивоопухолевой АИТ. Для этого в работе у больных был измерен исходный уровень цитокинов сыворотки крови перед началом АИТ и после окончания первого курса (таблица 26).Таблица 26Изменение сывороточного содержания цитокинов у онкологическихбольных до и после проведения АИТГруппыКонтрольнаяОЖКТМеланомаОЖКТМеланома12Концентрация цитокинов (пг/мл)IFN-αTNF-αIL-2IL-100,9±0,20,5±0,10±0,011,4±0,2До адоптивной иммунотерапии4,2±3,1111,1±3,11 0±0,011,3±0,515,6±4,73,9±2,70±0,011,2±0,6После адоптивной иммунотерапии3,7±2,717,9±6,410,1±0,3 2,0±0,422,8±3,324,2±3,60,1±0,11,3±0,7различия показателей статистически достоверны относительно группы контроля (р<0,05);различия показателей статистически достоверны относительно значений до АИТ (р<0,05).Содержание сывороточного IFN-α у двух групп больных превышалоконтрольные значения (р<0,05).
После АИТ у больных меланомой концентрация IFN-α снизилась почти в 2 раза, что характеризует наличие иммунного ответа у пациентов данной группы на введение АЦЛ. Прослежено, что изменение концентрации данного цитокина в меньшую сторону отмечено у больныхс положительным исходом заболевания. У больных с ОЖКТ концентрация цитокина достоверно не изменилась.При ОЖКТ обнаружилось повышенное содержание TNF-α, которое значимо не уменьшилось после иммунотропного лечения. Также данный цитокин213называют кахексином, так как длительное присутствие данного цитокина в сыворотке крови может приводить к кахексии у онкологических больных. TNF-αвовлечен в острый воспалительный ответ и секретируется в основном активированными макрофагами, Th, NK-клетками и нейтрофилами.
Результаты исследования указывают на преобладание воспалительных реакций у больных с ОЖКТпо сравнению с больными меланомой и активацию продуцентов TNF. ТакжеTNF запускает ряд внутриклеточных реакций, приводящих к апоптозу через длительную активацию и запуск внутриклеточных каспаз, что может быть подтверждено повышенной экспрессией CD95 у онкологических больных.
Некотороеснижение уровня данного цитокина, обусловленное АИТ отражает противовоспалительный эффект данного вида терапии.Результаты данного исследования по оценке влияния АИТ на гуморальное звено иммунитета подтверждают системный эффект данного вида лечения. Однако, малое количество больных в группе с ОЖКТ требует проведениядополнительных исследований.Таким образом в работе оценено влияние нарушений со стороны как клеточных, так и гуморальных звеньев иммунной системы на эффективность противоопухолевой терапии с включением АИТ активированными лимфоцитамиу больных ОЖКТ и меланомой.6.5.
Изменение концентрации молекул MICA у больных после АИТПоказано, что молекулы MICA обнаруживаются в сыворотке крови у онкологических больных в больших концентрациях и могут взаимодействовать сNKG2D [3, 188, 347]. Обнаружение sMICA может характеризовать развитие опухолевого процесса. Однако функциональная значимость молекул MICA до сихпор не совсем определена, также нет работ, посвященных влиянию АИТ на уровень этих молекул.
В данном исследовании у различных онкологических больных был определен уровень sMICA и изучена взаимосвязь с экспрессией рецепторов NKG2D и количеством NK-клеток перед и после проведения АИТ.2146.5.1. Растворимые формы молекул MICA у больных с ОЖКТ после АИТУ 21 больного с ОЖКТ перед проведением АИТ и после первого курсалечения была измерена концентрация sMICA в сыворотке крови. Было показано, что после АИТ средняя концентрация sMICA несколько увеличивалась,но различия не были достоверными (таблица 27).Таблица 27Уровень рецептора NKG2D на лимфоцитах и NK-клетках и их лигандовв сыворотке крови больных с ОЖКТЭтап АИТДоПослеMICA, пг/мл3746,2±1238,45365,8±1693,2NKG2D+клетки, %47,9±10,645,5±7,5NKG2D+ NKклетки, %18,8±11,715,4±11,1NKклетки, %21,3±12,517,3±11,7Следует отметить, что в данной группе у большей части обследованныхпациентов наблюдалась ПБ. Вероятно, с этим и связано увеличение среднегоуровня молекул MICA в сыворотке крови.
Анализируя экспрессию рецептораNKG2D и количество NK-клеток после АИТ выявилась некоторая тенденцияк снижению данных показателей, что вероятно связано с некоторым перераспределением NK-клеток и возможным ингибированием рецептора NKG2D засчет sMICA (таблица 27).При разделении пациентов на две подгруппы со СБ (9 больных – 42,9%) иПБ (12 больных – 57,1%) можно отметить, что у подгруппы с ПБ исходно уровень sMICA повышен в 1,4 раза по сравнению с другой подгруппой (таблица 28).Таблица 28Концентрация молекул sMICA в зависимости от исхода заболевания убольных с ОЖКТ до и после АИТИсход заболеванияПрогрессированиеСтабилизацияКонцентрация молекул sMICA (пг/мл)До АИТПосле АИТ4429,6±1914,65814,6±2564,0*3079,4±1316,43207,5±2286,6* различия показателей достоверны относительно значения до АИТ (p<0,05).После АИТ у больных на фоне ПБ средний уровень sMICA увеличился в1,3 раза и в 1,9 раз по сравнению с исходными значениями в группе со СБ(p<0,05).
У 7 пациентов из группы с ПБ после АИТ наблюдалось увеличение215sMICA, у одной пациентки молекулы sMICA в сыворотке не обнаруживались, уостальных 4 человек был максимально высокий уровень как перед, так и послеАИТ. В группе со СБ значимых изменений показателя концентрации sMICA выявлено не было, что свидетельствует об отсутствии увеличения опухолевоймассы у данных больных на фоне проведения АИТ.Также в работе больные были разделены на три группы по уровнюMICA. В I группу вошли 4 больных (19%) с уровнем sMICA (менее 1500пг/мл). Во II группу вошли 9 больных (42,9%) со средними значениями sMICA(от 1500 до 4000 пг/мл).
В III группу объединены 8 из 21 (38,1%) больных свысоким уровнем sMICA (более 4000 пг/мл).В I группе с исходно низким уровнем sMICA, наблюдалось повышенноесодержание NK-клеток, которое нормализовалось после АИТ. Показатели экспрессии NKG2D на лимфоцитах и NK-клетках несколько снизились на фонеАИТ, уровень Treg достоверно уменьшился (таблица 29). Данные изменения показателей иммунитета у пациентов I группы привели к СБ, что объективно отражено в оценке клинической картины.Таблица 29Уровень молекул MICA и количество лимфоцитов периферическойкрови у групп больных ОЖКТ перед и после АИТэтапАИТДоПослеДоПослеДоПослеNKG2D+NKNKG2DMICA, пг/млNK-клетки, клетки,клетки, %%%I группа (sMICA < 1500 пг/мл)886,0±649,943,0±19,116,5±4,023,8±8,2794,5±1101,234,0±8,515,5±5,015,5±2,1II группа (sMICA от 1500-4000 пг/мл)2546,2±488,9146,6±12,019,1±11,422,1±12,33827,6±2265,644,8±5,718,0±12,123,5±11,5III группа (sMICA > 4000 пг/мл)6709,5±1385,81,242,4±15,411,0±3,0215,6±2,918348,5±1969,01,244,8±7,915,4±13,416,0±14,1+Treg, %9,0±2,05,5±0,7*8,6±3,18,8±6,712,0±3,129,2±3,1** различия показателя достоверно отличаются от значения той же группы до АИТ (р<0,05),1достоверные различия от показателей первой группы данного этапа лечения (р<0,05),2достоверные различия от показателей второй группы данного этапа лечения (р<0,05).216Во II группе больных со средним уровнем sMICA показатели экспрессииNKG2D и количества NK-клеток на фоне АИТ не изменились.
У одного пациента концентрация sMICA уменьшилась, у 4-х пациентов не изменилась итолько у остальных 4-х пациентов несколько увеличилась. Данные изменениядинамики sMICA сопоставимы с клинической картиной. Из пациентов этойгруппы у 5 человек наблюдается СБ.В III группе пациентов с исходно высоким уровнем MICA показано значимое снижение экспрессии NKG2D на NK-клетках по сравнению с пациентамиII группы (p<0,05), что может быть обусловлено влиянием sMICA. Также у данных больных снижено количество NK-клеток по сравнению с пациентами Iгруппы (p<0,05) (таблица 29).
![](https://s.studizba.com/z.php?f=/templates/si/i/noavatar.png&w=100&h=100&t=1"){kind=avatar}
