Диссертация (1139554)
Текст из файла
Медицинский радиологический научный центр имени А.Ф. Цыба –филиал федерального государственного бюджетного учреждения«Национальный медицинский исследовательский центр радиологии»Министерства здравоохранения Российской ФедерацииНа правах рукописиАБАКУШИНА ЕЛЕНА ВЯЧЕСЛАВОВНАЛИГАНДЫ РЕЦЕПТОРА NKG2D В КОМПЛЕКСНОЙ ОЦЕНКЕИММУНИТЕТА У ОНКОЛОГИЧЕСКИХ БОЛЬНЫХ И РАЗРАБОТКАМЕТОДА АДОПТИВНОЙ ИММУНОТЕРАПИИ14.03.09 – клиническая иммунология, аллергология14.01.12 – онкологияДиссертацияна соискание учёной степени доктора медицинских наукНаучные консультанты:Козлов И.Г. – доктор медицинских наук, профессорКудрявцев Д.В.
– доктор медицинских наукМосква – 2018СОДЕРЖАНИЕВВЕДЕНИЕ ........................................................................................................... 5Глава I. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ ....................................................................... 161.1. Иммунобиология развития опухоли ...........................................................
161.1.1. Механизмы ускользания опухоли из-под иммунного надзора .............. 161.1.2. Противоопухолевый иммунный ответ и адоптивная иммунотерапия ... 181.2. Характеристики и рецепторы NK-клеток ................................................... 211.2.1. Лектиноподобный активирующий рецептор NKG2D и его лиганды ....
331.3. Обучение NK-клеток ................................................................................... 351.4. Функции и роль NK-клеток в организме .................................................... 361.5. Регуляция функциональной активности NK-клеток.................................. 421.6.
Взаимодействие NK-клеток c клетками микроокружения опухоли ииммуносупрессия................................................................................................ 441.7. Применение NK-клеток в терапии ..............................................................
481.8. Аллогенные NK-клетки для адоптивной иммунотерапии......................... 541.9. Методы получения активированных NK-клеток in vitro ........................... 591.10. Оценка активационных способностей цитотоксических лимфоцитов ... 63Глава II. МАТЕРИАЛ И МЕТОДЫ ................................................................. 692.1. Характеристика клинического материала .................................................. 692.1.1.
Характеристика пациентов по изучению иммунологическихпоказателей крови............................................................................................... 702.1.2. Характеристика пациентов, получивших адоптивнуюиммуннотерапию ................................................................................................ 732.1.3. Критерии отбора пациентов в исследование ........................................... 782.1.4. Оценка общего состояния онкологического больного ........................... 812.2. Методы исследования .................................................................................
822.2.1. Выделение мононуклеарных клеток из периферической крови ............ 822.2.2. Фенотипирование мононуклеаров периферической крови .................... 832.2.3. Проточная цитофлуориметрия .................................................................
842.2.4. Методы культивирования клеток ............................................................ 8522.2.5. Флуоресцентная микроскопия ................................................................. 892.2.6. Иммуноферментный анализ ..................................................................... 902.2.7.
Определение показателей информативности выявления sMICAметодом ИФА ..................................................................................................... 942.2.8. Оценка жизнеспособности и пролиферативной активностилимфоцитов ......................................................................................................... 952.2.9. Оценка цитотоксической активности лимфоцитов.................................
962.2.10. Выделение NK-клеток методом магнитной сепарации ........................ 982.2.11. Получение, очистка и определение физико-химическихсвойств рекомбинантного белка MICA ............................................................. 992.2.12. Иммуноблот-анализ .............................................................................. 1022.2.13. Методика адоптивной иммунотерапии ............................................... 1032.3. Статистический анализ данных ................................................................
104Глава III. Результаты оценки дисбаланса показателей иммунитета уонкологических больных ................................................................................. 1063.1. Выявление растворимых форм молекул MICA в периферическойкрови онкологических больных....................................................................... 1063.2.
Информативность выявления молекул sMICA ........................................ 1083.3. Определение молекул MICA у больных КРР и меланомой .................... 1103.4. Выявление дисбаланса лимфоцитов у больных меланомой ................... 1143.5.
Выявление дисбаланса лимфоцитов у больных КРР ............................... 1173.6. Взаимосвязь между экспрессией NKG2D и уровнем sMICA.................. 1213.7. Оценка уровня цитокинов в сыворотке крови онкологическихбольных ............................................................................................................. 1263.8.
Получение рекомбинантного белка человека MICA ............................... 1293.9. Блокирование рецептора NKG2D на NK-клетках.................................... 133Глава IV. Разработка метода длительного культивирования и активациилимфоцитов для адоптивной иммунотерапии ................................................ 1394.1. Культивирование лимфоцитов in vitro в присутствии IL-2 ..................... 1394.2. Культивирование лимфоцитов in vitro с IL-2 и IL-15 ..............................
1553Глава V. Результаты клинической апробации метода адоптивнойиммунотерапии ................................................................................................. 1645.1. Апробация метода АИТ............................................................................. 1645.2.
Результаты проведения АИТ у больных колоректальным раком ........... 1745.3. Результаты проведения АИТ у больных меланомой ............................... 179Глава VI. Мониторинг показателей иммунитета у онкологическихбольных на этапах адоптивной иммунотерапии .............................................
1986.1. Изменение фенотипа лимфоцитов у больных после первогокурса АИТ ......................................................................................................... 1986.2. Мониторинг субпопуляционного состава лимфоцитов у больныхс ОЖКТ на этапах АИТ .................................................................................... 2026.3. Мониторинг субпопуляционного состава лимфоцитов у больныхмеланомой на этапах АИТ ............................................................................... 2086.4. Оценка влияния АИТ на уровень цитокинов у больных .........................
2136.5. Изменение концентрации молекул MICA у больных после АИТ .......... 214ОБСУЖДЕНИЕ РЕЗУЛЬТАТОВ .................................................................... 221ЗАКЛЮЧЕНИЕ ................................................................................................ 249ВЫВОДЫ .......................................................................................................... 256Практические рекомендации ........................................................................... 257Список цитируемой литературы ......................................................................
259Перечень сокращений ...................................................................................... 2954ВВЕДЕНИЕАктуальность работыПроблема ранней диагностики и лечения опухолей все еще остаётся в значительной степени нерешенной, несмотря на огромные многолетние усилия ученых и врачей. Современные методы терапии, которые предусматривают использование хирургических, лекарственных и лучевых методов терапии, часто бывают недостаточно эффективны. Кроме того, эти воздействия сами по себе вызывают иммуносупрессию.
Характеристики
Тип файла PDF
PDF-формат наиболее широко используется для просмотра любого типа файлов на любом устройстве. В него можно сохранить документ, таблицы, презентацию, текст, чертежи, вычисления, графики и всё остальное, что можно показать на экране любого устройства. Именно его лучше всего использовать для печати.
Например, если Вам нужно распечатать чертёж из автокада, Вы сохраните чертёж на флешку, но будет ли автокад в пункте печати? А если будет, то нужная версия с нужными библиотеками? Именно для этого и нужен формат PDF - в нём точно будет показано верно вне зависимости от того, в какой программе создали PDF-файл и есть ли нужная программа для его просмотра.
![](https://s.studizba.com/z.php?f=/templates/si/i/noavatar.png&w=100&h=100&t=1"){kind=avatar}
