Диссертация (1139554), страница 3
Текст из файла (страница 3)
Проведение АИТ позволило у части больныхустранить нарушения в иммунной системе за счет увеличения содержания иммунореактивных клеток и снижения иммуносупрессивного влияния Treg иsMICA на лимфоциты и привести к контролю над опухолевым процессом.Предложенный способ лечения может дополнить стандартные схемы леченияонкологических больных с различными солидными новообразованиями.Впервые проведен мониторинг уровня молекул MICA в сыворотке кровионкологических больных и субпопуляционного состава лимфоцитов на фонеАИТ активированными цитотоксическими лимфоцитами. Комплексное регулярное мониторирование изменений показателей иммунитета и уровня sMICA позволили выявить несостоятельность противоопухолевого иммунного ответа иявились дополнительными критериями в оценке эффективности АИТ.Теоретическая и практическая значимостьВ результате диссертационной работы значительно расширен набор параметров диагностики и мониторинга состояния иммунной системы у онкологических больных.
Проведена комплексная оценка показателей иммунитета с учётомизменений в субпопуляционном составе лимфоцитов и экспрессии маркёров ран-10ней и поздней активации лимфоцитов периферической крови, а также определено количество молекул MICA в сыворотке крови больных на этапах АИТ. Полученные данные могут быть использованы для улучшения результатов иммунодиагностики у онкологических больных, как дополнительные факторы прогноза,а также для проведения мониторинга изменения иммунологических показателейна фоне лечения.В результате работы получен рекомбинантный человеческий белок MICA(rhMICA), который можно использовать при выполнении НИР для изучения взаимодействия лиганда с NK-клетками в системах in vitro и ex vivo и его влиянияна их активность, а также для получения анти-MICA антител и разработки диагностической тест-системы для оценки сывороточного уровня молекул MICA уонкологических больных.Итогом данного исследования явилась разработка оригинального методадлительного культивирования и активации лимфоцитов in vitro за счет совместного применения низких доз интерлейкинов.
Полученные в работе данные позволяют рекомендовать предложенный метод активации лимфоцитов для длительного культивирования МНК и их дальнейшего применения в схемах сопроводительной АИТ у онкологических больных.Определены критерии отбора пациентов для АИТ, а также выявлены параметры, которые могут свидетельствовать о благоприятном или неблагоприятномисходе основного заболевания.Разработан и апробирован в клинической практике способ лечения онкологических больных, основанный на введении активированных цитотоксическихлимфоцитов и клеточного супернатанта.
За счет использования данного способаперсонифицированной АИТ в схемах лечения онкологических больных был усовершенствован и оптимизирован метод усиления противоопухолевого иммунитета, который у части больных привел к стабилизации процесса и регрессу злокачественных образований.11Основные положения, выносимые на защиту1. Дисбаланс показателей иммунитета у онкологических больных происходитза счет изменения количества Treg, NKT-, NK-клеток и CD25+лимфоцитов, атакже уровня экспрессии маркёров активации лимфоцитов в сочетании с повышением в сыворотке крови концентрации молекул MICA, что может рассматриваться как длительная иммуносупрессия и являться неблагоприятнымфактором прогноза у онкологических больных.2.
Совместное использование двух цитокинов IL-2 и IL-15 в низких концентрациях при длительном культивировании лимфоцитов является эффективными позволяет увеличить жизнеспособность, пролиферативную и противоопухолевую активность лимфоцитов.3. Адоптивная иммунотерапия активированными in vitro лимфоцитами является высокотехнологичным, оригинальным и безопасным методом клеточной иммунотерапии, который при длительном применении у определённойчасти онкологических больных позволяет добиться контроля над ростом опухоли.4. Оценка исходного дисбаланса показателей иммунитета у больного (содержание Treg и сывороточных молекул MICA, экспрессия CD25, HLA-DR, CD38,CD69, NKG2D и CD95 на лимфоцитах) и регулярное его мониторированиепозволяет выявить несостоятельность противоопухолевого иммунного ответа и является дополнительным критерием в оценке эффективности адоптивной иммунотерапии.Степень достоверности и апробация результатов диссертационной работыНаучные положения, описанные данные, выводы и рекомендации, сформулированные в работе, базируются на достаточном клиническом материале.
Дизайн исследования включал лабораторные методы анализа, разработку методаклеточной терапии, клиническую оценку пациентов, экспериментальные и современные методы исследования. Полученные данные были обработаны методами вариационной статистики с использованием параметрических и непараметрических методов с помощью программ Microsoft Excel 2003, Statsoft12Statistica 6.0 (StatSoft, USA) и пакета статистических программ SPSS® StatisticsSubscription (IBM, USA).Диссертационная работа являлась составной частью темы НИР Центра на2007-2009 гг. «Изучение противоопухолевого иммунного ответа, процессов активации и ингибирования NK(T)-клеток при взаимодействии с поверхностной ирастворимой формой опухоле-ассоциированной молекулы MICA, как новогомаркера злокачественного роста» в рамках госзадания (№ гос.
регистрации01200501319) подтемой №7 «Изучение опухолеассоциированных молекулMICA/B в качестве маркёров для диагностики и биотерапии онкологических заболеваний» на 2011-2013гг. и НИР «Разработка методов иммунотерапии, позволяющих повысить эффективность лечения онкологических больных» на 20122016гг. в рамках государственного задания (№ гос. регистрации 01201262734).По заявленной теме выполнена совместная работа по гранту РФФИ № 08-0401772-а «Распознавание опухолевых клеток и регуляция цитолитической активности натуральных киллеров.
Роль стресс-индуцируемой молекулы MICA»2008-10 гг. и государственному контракту № 16.740.11.0200 «Механизмы и регуляция экспрессии белка MICA, лиганда активирующего рецептора цитотоксических лимфоцитов человека, в норме и при опухолеобразовании» в рамках ФЦП«Научные и научно-педагогические кадры инновационной России». Выполняется работа по гранту РФФИ № 16-04-01867 «Роль аллельных групп белка MICA,лиганда рецептора NKG2D, в регуляции противоопухолевой активности клеточного иммунитета» на 2016-18 гг.Материалы диссертации доложены на международных и всероссийскихнаучных конференциях, научных школах, сессиях и конгрессах: FEBS advancedcourse: “Chemistry meets biology” (Greece, Island of Spetses, 2005); IV международной научно-практической конференции «Высокие технологии, фундаментальные и прикладные исследования в физиологии и медицине» (Санкт-Петербург,2012 г.); заседании научно-технического совета департамента инновационнойполитики и науки Минздрава России (Москва, 2012); научной сессии НИЯУМИФИ-2013 (Москва, 2013 г.); междисциплинарной конференции «Патология13клетки» (Москва, 2013 г.); всероссийской научно-практической конференции смеждународным участием «Противоопухолевая терапия: от эксперимента к клинике» (Москва, 2014 г.); школе-семинаре с международным участием «Клеточные и генные технологии: от эксперимента к практике» (Светлогорск, Калининградская область, 2014 г.); конгрессе российской ассоциации радиологов(Москва, 2014 г.); VI всероссийской школе по клинической иммунологии «Иммунология для врачей».
(Пушкинские Горы, Псковская область, 2015 г.); XIXРоссийском онкологическом конгрессе (Москва, 2015 г.); XII, XIII, XIV всероссийской научно-практической конференции с международным участием «Отечественные противоопухолевые препараты» (Москва, 2015 г., 2016 г., 2017 г.); Iом Калининградском научном иммунологическом форуме – 2016, (Калининград,2016 г.); The I and II International Symposium “Physics, Engineering and Technologies for Bio-Medicine” (Moscow, 2016, 2017); III Петербургском международномонкологическом форуме «Белые ночи 2017» (Санкт-Петербург, 2017 г.); III национальном конгрессе по регенеративной медицине (Москва, 2017 г.). Результатыработы апробированы на совместной конференции МРНЦ им.
А.Ф. Цыба иМНИОИ им. П.А. Герцена – филиалы ФГБУ «НМИЦ радиологии» МинздраваРоссии 5 июня 2018 года.Личный вклад автораАвтору принадлежит основная и ведущая роль в выборе направления исследования и темы исследования, определении задач и поиске методов их решения, а также анализе теоретических данных, проведении экспериментов, интерпретации, статистической обработке и обобщении полученных результатов. Осуществлено планирование и проведение экспериментов, разработка метода активации лимфоцитов и внедрение новых способов лечения онкологических больных с использованием АИТ активированными лимфоцитами. Автором обозначены дальнейшие перспективы внедрения результатов работы.14Внедрение результатов диссертации в практикуРезультаты работы внедрены и используются в практической деятельности Медицинского радиологического научного центра им.
![](https://s.studizba.com/z.php?f=/templates/si/i/noavatar.png&w=100&h=100&t=1"){kind=avatar}
