Диссертация (1139554), страница 39
Текст из файла (страница 39)
Таким образом, у данного больного наблюдалась резкая и длительная активация клеточного звена иммунитета на фоне сопроводительной АИТ которая характеризовалась многократным повышением экспрессии маркеров ранней (CD38, CD69) и поздней (CD25, HLA-DR) активациилимфоцитов. Можно предположить, что это привело к истощению лимфоцитов и декомпенсации работы иммунной системы, в результате чего клинически наблюдалась ПБ. Объективно, после проведения лечения АЦЛ у больногонормализовался стул, повысился аппетит, увеличилась работоспособность иулучшилось настроение, не смотря на комплексное лечение и проведенную ХТнаблюдалась ПБ. Следует отметить, что сопроводительная АИТ привела кулучшению качества жизни пациента.
Статус ECOG уменьшился с 2 до 1.Возможно данные положительные изменения в качестве жизни и отсутствие болевого синдрома у больного связаны с увеличением концентрации биологически активных веществ, выделяемых активированными лимфоцитами.Например, с уровнем эндорфинов и серотонина которые вырабатывают активированные NK-клетки. Данное клиническое наблюдение характеризует207восстановление взаимосвязи между иммунной, эндокринной и нервной системой. Однако, наличие опухолевой массы и распространенность процесса непозволили добиться эффекта от проведенной терапии с включением АИТ.Анализ данных фенотипа лимфоцитов и клинической картины привел квыводу о том, что резкие изменения как в большую, так и меньшую сторонунескольких показателей иммунограммы у больного говорят о неблагоприятном исходе заболевания.
Данные изменения носят транзиторный характер иизменяются через 3-4 недели. Поэтому постоянное динамическое наблюдениеза минорными субпопуляциями активированных лимфоцитов дает более объективную картину в оценке прогностических факторов и результатов лечения,чем стандартный анализ иммунограммы по основным маркерам лимфоцитов.При проведении АИТ у онкологических больных необходимо контролироватьсостояние иммунной системы и ответ на терапевтические воздействия. В частности, оценка клеточного звена иммунитета и субпопуляций Treg, NKTлимфоцитов и маркеров активации лимфоцитов должны дополнить стандартные панели иммунограммы у онкологических больных.6.3.
Мониторинг субпопуляционного состава лимфоцитов у больных меланомой на этапах АИТДля выяснения закономерностей изменения фенотипа в субпопуляцияхлимфоцитов крови у больных с различными онкологическими заболеванияминами в сравнительном исследовании оценены поверхностные маркеры лимфоцитов и охарактеризованы особенности фенотипа лимфоцитов крови у больных меланомой на этапах АИТ.Как было показано после первого курса АИТ у данных больных достоверно увеличилось содержание HLA-DR+лимфоцитов и HLA-DR+ T-клеток.Изменений в составе основных популяций иммуноцитов выявлено не было.Изменения в экспрессии маркеров активации были обнаружены через 2-3 месяца и в отдаленные сроки после начала АИТ (рис.
60). Было показано, что,начиная с 2-х месячного срока в периферической крови больных меланомой в208дополнение к увеличению количества HLA-DR+ лимфоцитов достоверно повышается уровень CD38+ на лимфоцитах и T-клетках и CD95+ на лимфоцитах.С другой стороны снизилось относительное содержание лимфоцитов несущих альфа цепь рецептора IL-2. Наблюдалась некоторая тенденция к снижению вциркуляции NK-клеток и NKG2D+ NK-клеток, число которых значимо сократилось на 20% через 6 месяцев после АИТ (p<0,05). Также несколько увеличивалосьсодержание Treg в периферической крови, но отличия не были достоверными. Похожая закономерность была выявлена и у больных с ОЖКТ (рис. 58).количество клеток (%)160*1,3 *****1,31,31401201006180**1,31,6*11 *1**1,6604020TreCD g25+CTNK LTH -клLA .CD -DR3+N DRKG2D+NNK K-кG2D л.+NCD KCD 38+3+38CD +CD 6969 ++NCD K95+Т-В-кл.кл.Th0до1 мес.2-3 мес.4-6 мес.8-12 мес.Рисунок 60.
Динамические изменения количества лимфоцитов периферическойкрови у больных меланомой до АИТ (100%) и через 1, 2-3, 4-6 и 8-12 месяцев.* различия показателей статистически достоверны от уровня перед лечением средипациентов той же нозологической группы;1различия показателей статистически достоверны от уровня1 месяц после начала АИТ;3различия показателей статистически достоверны от уровня2-3 месяца после начала АИТ;6различия показателей статистически достоверны от уровня4-6 месяца после начала АИТ.Через 4-6 месяцев после АИТ на фоне снижения количества лимфоцитови Т-клеток экспрессирующих CD38, наблюдалось значимое увеличение уровняCD69+ лимфоцитов и CD69+ NK-клеток, также выросло число В-лимфоцитов(p<0,05) (рис. 60).
Так как СD69 трансмембранный гликопротеин семейства лектинов С-типа вовлечен в процессы ранних функциональных преобразований209лимфоцитов и их активацию можно сказать, что этот процесс у больных меланомой начинается через несколько месяцев от начала АИТ [140].Проведенная оценка клинической эффективности АИТ у больных меланомой после лечения позволила зафиксировать объективный эффект у 6 из 51больного меланомой. Медиана времени до достижения клинического ответа составила в среднем 3,3 месяца в интервале от 1 до 7 месяцев. В эти же срокивыявлены наиболее значимые изменения в субпопуляционном составе лимфоцитов, чего не наблюдалось при оценке содержания основных субпопуляцийлимфоцитов.
Также у 15 (29,4%) больных было зафиксировано появление реактивно измененных лимфоузлов после проведения АИТ АЦЛ в сроки наблюдения после 2-х месяцев. Возможно эти клинические данные характеризуют появление большого количества пролиферирующих CD38+ лимфоцитов и активированных HLA-DR+ лимфоцитов в периферической крови. Косвенное подтверждение полученных данных можно получить, анализируя экспрессию CD95(Fas/APO-1) на лимфоцитах после АИТ.Было замечено, что у большинства пациентов с негативным прогнозом висходной иммунограмме отмечалось увеличение Treg и снижение маркера поздней активации HLA-DR на всех лимфоцитах и/или Т-клетках. Эти изменения, вероятно, связаны с длительным иммуносупрессивным воздействием опухолевыхклеток на организм пациентов данной группы.
В результате лечения количествоТreg у части больных нормализовалось, увеличилась экспрессия HLA-DR и доляNK-клеток. Однако, данные изменения не были достаточными для СБ. На момент анализа СБ наблюдалась у 21 (41,2%) больного. У части пациентов из этойгруппы исходно наблюдался нормальный уровень Тreg, повышенное содержаниеHLA-DR+ лимфоцитов и NK-клеток. Это может быть связано с некоторой хронической стимуляцией клеточного звена иммунитета у пациентов данной группы именьшим супрессивным влиянием опухолевых клеток на иммунитет в целом.У 14 пациентов из группы больных меланомой прослежены отдаленныерезультаты лечения от 8 месяцев до года после начала курса АИТ. В даннойгруппе у большинства пациентов (92,6%) на момент анализа наблюдалась СБ, у210двоих отмечен объективный ответ на АИТ в монорежиме и только одна пациентка умерла после ПБ. Таким образом, данных пациентов можно охарактеризовать как перспективных в плане объективного ответа и эффективности проведенной АИТ.
Анализируя фенотип лимфоцитов и маркеры активации у даннойгруппы больных перед и в отдаленный срок после АИТ можно заключить, что уэтих пациентов снизилось содержание Th, Treg и CD25+лимфоцитов (p=0,01), атакже HLA-DR+лимфоцитов и Т-клеток, NK-клеток и NKG2D+NK-клеток, хотяотмечено значимое увеличение экспрессии рецептора NKG2D (p=0,04) (рис. 61).CD95+CD69+NK-кл.CD69+CD3+38+В-кл.140120100806040200Т-кл.ThTregCD25+CD38+CTLNKG2D+NK-кл.NKT-кл.NK-кл.NKG2D+доHLA-DRCD3+DR8-12 мес.Рисунок 61. Динамические изменения количества лимфоцитов периферическойкрови у больных меланомой до АИТ (100%) и через 8-12 месяцев.Можно предположить, что увеличение доли NKG2D+лимфоцитов в периферической крови у пациентов данной группы связано со снижением растворимых форм молекул MICA в сыворотке крови и уменьшением их взаимодействия со своим рецептором NKG2D.В результате работы в сравнительном аспекте сопоставлена динамика изменения фенотипа лимфоцитов и экспрессии активационных антигенов клеточной поверхности на разных этапах АИТ у больных с ОЖКТ и меланомой.
Выявлены отличительные особенности субпопуляционного состава лимфоцитов у пациентов двух групп и общие закономерности. Для большинства больных двухгрупп не характерно изменение количества основных популяций лимфоцитов на211фоне АИТ, системный эффект АИТ проявляется в минорных популяциях и экспрессии маркеров активации.
Показано, что АИТ оказывает воздействие в большей степени на NKT-лимфоциты у больных с ОЖКТ и на В-клетки у больныхмеланомой. Одинаковая тенденция наблюдается в увеличенном содержании Tregи снижении количества NK-клеток после АИТ. Разнонаправленный характер изменений выявлен в числе CD25+ лимфоцитов, доля которых после АИТ увеличивается у больных с ОЖКТ и уменьшается у больных меланомой.
РецепторNKG2D наоборот экспрессируется в большей степени в отдаленные сроки послеАИТ у больных меланомой и снижается у больных с ОЖКТ. Одинаковая тенденция к повышению поверхностной экспрессии маркеров активации CD38 и CD95прослеживается у пациентов обеих групп. У больных меланомой дополнительнообнаруживаются значимые количества HLA-DR+ лимфоцитов в первые месяцыпосле начала АИТ и CD69+ лимфоцитов через 4-6 месяцев АИТ. Возможно, этиявления обусловлены запуском долгосрочных каскадных реакций активации иммунитета у данных пациентов. У больных с ОЖКТ данные субпопуляции лимфоцитов не реагировали на введение АЦЛ, что еще раз подтверждает различную иммуногенность этих злокачественных новообразований.Статистически значимые отличия в экспрессии различных поверхностныхмолекул и изменение состава лимфоцитов у больных на этапах АИТ доказываютсистемный эффект АИТ на организм больного.
При воздействии иммунотропныхлекарственных средств и проведении АИТ целесообразно оценивать экспрессиюмаркеров активации на всех лимфоцитах и на отдельных субпопуляциях. Для этойцели можно изучать уровень маркеров ранней (CD38, СD69) и более поздней(CD25, HLA-DR) активации лимфоцитов, а также оценивать количество Treg, NKклеток и экспрессию CD95 и NKG2D.
Обнаружение субпопуляций лимфоцитовсупрессоров с фенотипом CD4+ CD25bright у онкологических больных может улучшить понимание механизма ускользания различных опухолей из-под иммунногонадзора. Динамика изменения количественного состава субпопуляций лимфоцитов, а также поверхностной экспрессии маркеров активации при онкологических212заболеваниях может представлять ценность для мониторинга ИТ воздействий идополнить клиническую оценку течения основного заболевания.6.4.
![](https://s.studizba.com/z.php?f=/templates/si/i/noavatar.png&w=100&h=100&t=1"){kind=avatar}
