Диссертация (1139494), страница 17
Текст из файла (страница 17)
Сбор образцов биологического материала и систематическиеосмотры производили во время плановых клинических приемов.Инструментальные исследования, такие как ультразвуковое исследование(УЗИ) внутренних органов, электрокардиографию (ЭКГ) и рентгенографиюорганов грудной клетки пациентам проводили один раз в год или чаще поклиническим показаниям. При необходимости проводили консультации окулиста,дерматолога, психиатра и др.В ходе исследования была сформирована компьютерная база данных вформатах FileMaker и Excel, включающая в себя следующий переченьпоказателей: ФИО, год рождения, возраст, пол, путь заражения (половойгетеросексуальный, потребитель инъекционных наркотиков, МСМ, другое),стадии ВИЧ-инфекции (с учетом клинической классификации ВИЧ-инфекции иутвержденной Приказом Минздравсоцразвития России от 17 марта 2006 г.
№166),вес (кг), рост (см), национальность (русский, украинец, армянин, еврей, белорус,казах, татарин, грузин, азербайджанец, другая), тип течения ВИЧ-инфекции(предварительно; непрогрессор, обычное течение, агрессивное течение а такжепоказатели CD4 (на момент первого визита), показатели CD8 (на момент первоговизита), показатели вирусной нагрузки (на момент первого визита),АРВТ(есть/нет), год начала АРВТ, показатели вирусной нагрузки (на момент началаАРВТ), эффект ингибиторов протеазы (сниженный, норма, токсичность),гиперлипидемия (да/нет), ферментопатии (да/нет), липоатрофия (липодисторфия)(да/нет), нейротоксичность EFV (да/нет), сниженная эффективность NFV (да/нет),периферическая нейропатия (да/нет),курение активное (да/нет), курениепассивное (да/нет), генетические маркеры (HLA-B*5701, G2677T/A, C3435T,C1236T), примечание (предполагаемые эпидемиологические связи и направленияпередачи (половые партнеры, мать-ребенок), данные о прерывании лечения и др.).Вся информация, находящаяся в базе данных, в сочетании с результатами91проведенных лабораторных анализов послужила материалом для последующегостатистического анализа.
Материалы и методы исследования.При выполнении научно-квалификационного исследования применялисьметодики общемедицинского и специальных видов исследования. Основныерезультаты работы получены с применением иммунологических (определениеколичества CD4+- и CD8+-лимфоцитов в крови выполняли методом проточнойцитофлуоритетрии по одноплатформенной технологии на проточном цитометреBecton Dickinson FACS Calibur, США), молекулярно-биологических (дляопределения вирусной нагрузки ВИЧ применялись тест систем Real-Time ПЦР иAbbott Real-Time HIV-1 с чувствительность 40 копий РНК ВИЧ/мл крови,определение аллелей генома человека проводился путем мультилокусногоанализа) и биохимических (определение маркеров сыворотки крови проводилсяна автоматическом биохимическом анализаторе OLYMPUS AU 2700, Япония)методов исследования.Для оценки клинического статуса больных, включенных в исследование,использовалась (классификация ВИЧ-инфекции под редакцией В.В.Покровскогоот 2006г.
и общепринятый в РФ комплекс диагностических методов: клиническийосмотр пациентов проводился врачами (инфекционист, терапевт, невролог и др.),психологическоетестирование,(общеклинические,серологические,лабораторныеметодыисследованиямолекулярно-биологическиеидр.),инструментальные методы диагностики (УЗИ, КТ, ЭКГ, ЭхоКардиограмма и др.).Для анализа значимости выявленных закономерностей применялисьсовременные статистические методы оценки. Статистический анализ полученныхрезультатов проводили в программе SAS 9.3 (SAS Institute Inc., США). Различияпризнавали значимыми при критическом уровне вероятности принятия «нулевойгипотезы» p менее 0,05.2.2.
Первичная диагностика ВИЧ-инфекции92Диагноз ВИЧ-инфекции у всех пациентов был установлен в течение первогогода после заражения (на основании эпиданамнеза и выявления маркеров раннейВИЧ-инфекции в ИБ gp120 и р24) путем применения стандартного алгоритмадиагностики, включающего определение антител к ВИЧ методом ИФА сприменением тест-систем «Murex HIVAg/Ab Cjmbination, Genscreen ULTRAHIVAg/Ab» (производство Bio-Rad, USA) и последующим подтверждением вреакции иммунного блотинга (NEW LAV BLOT).Стадию ВИЧ-инфекции всем пациентам определяли сразу после постановкидиагнозанаоснованиипроведениякомплексаклинико-лабораторныхиинструментальных обследований.Лабораторная часть исследования выполнялась в СНИОЭП СПИД и вцентре молекулярной диагностики ЦНИИ эпидемиологии Роспотребнадзора, атакже в ФГБУ НИИ вирусологии им Д.И. Ивановского и лаборатории Калужскогообластного центра профилактики и борьбы со СПИДом (руководитель Е.Н.Алешина).Сбор демографических и эпидемиологических данных, включая выявлениефакторов риска, национальной принадлежности, эпидемиологических связей сдругими ВИЧ-инфицированными лицами, а также сведения о курении проводилипутемопросапациентоввходеустановленияэпидемиологическогоиклинического анамнеза.2.3.
Общеклинические методыБыли применены стандартные методы обследования ВИЧ-инфицированныхпациентов согласно приказу Минздравсоцразвития РФ от 9 июля 2007 года № 474и дополнительные методы. Все пациенты находились поддлительнымдинамическим наблюдением и проходили клинико-лабораторное обследование нереже 2-3 раз в год.Частоту и спектр биохимических показателей крови определяли взависимости от наличия/отсутствия приема АРВТ, ее схемы, наличия ивыраженности нежелательных явлений.93Клинический осмотр и оценка состояния пациентов, в том числе ипсихоэмоционального, проводились при каждом посещении врача и былиоснованы на общепринятых клинических методах.Критерии прогрессии ВИЧ-инфекции: основными критериями оценкипрогрессирования ВИЧ-инфекции были клинические и лабораторные показателив динамике.
Принималивовниманиежалобы на усталость, быструюутомляемость, ухудшение психоэмоционального состояния, снижение общегожизненного тонуса. Маркерами прогрессирования заболевания также считалисьчастота и длительность ОРВИ и других простудных заболеваний по сравнению спредыдущими годами и спектр их проявлений и осложнений. Регистрировались упациентов также герпесвирусные инфекции, в том числе и герпес зостер (HZV),кандидозные поражения слизистых полости рта, кожных покрововиеепроизводных. Наряду с клиническими проявлениями прогрессирования ВИЧинфекции наблюдали лабораторные изменения, а именно: снижение в динамикеколичества CD4+лимфоцитов в год, повышение показателей CD8, снижениеиммунорегуляторного индекса, а также рост концентрации РНК ВИЧ (но не увсех пациентов).
Среди наших пациентов наблюдались случаи клинического ииммунологическогопрогрессированияболезнинафоненезначительногоповыщения концентрации РНК ВИЧ (102 -103 копий\мл) в крови. Таких пациентовмы обозначали термином «дискордантные» по сотношению показателей CD4+лимфоцитов к показателям концентрации РНК ВИЧ крови. Количество РНК ВИЧявляется одним из основных маркеров, определяющих не только эффективностьпринимаемой схемы АРВТ, но и вариант течения ВИЧ-инфекции.Клиническийанализкровиявляетсяобязательнымкомпонентомлабораторного мониторинга и представлен показателями красной крови иразвернутой лейкоцитарной формулой, тромбоцитами и СОЭ.
В таблице 3представлены характеристики и объём исследуемых показателей пациентов.94Таблица 3.Дизайн исследованияКлинические группы и объёмисследованийХарактеристикаанализируемых параметровМужчины - 176(55,2%)Женщины - 143(44,8%)Возраст (лет) Ж-МДиагноз установлен в течение 12 месяцев послеинфицирования у 319(100%) пациентовДлительность наблюдения пациентовКо-во лет между заражением и началом АРВТОпределение генетических маркеров, в том числе иHLA B507*1. анализировали результаты генотипов сфенотипами: токсическое действие ИП, ЦНСтоксичность EFV, неэффективность NFV,ферментопатии, липидемия, липодистрофия.Проведение 2-х этапной консультации(психоэмоциональной подготовки к началу АРВТ)Персонифицированный биохимический мониторингс учетом компонентов схемы АРВТСтандартный биохимический мониторинг без учетасхемы АРВТКол-во пациентов в группах получавших АРВТЧастота и количество определений РНК ВИЧ копийв зависимости от варианта течения за периоднаблюденияЧастота и количество определений иммунногостатуса в зависимости от варианта течения за периоднаблюдения CD4, CD8, CD4/ CD8 клетокЛечение АРВТ с ИП получали 181 из них NFV –121.
rs10468473 гена MAP2K4 определяли в (15/9%).Лечение АРВТ с EFV получали – 199 из нихrs2575735 определяли у (31,0%)1-я группа32 (10,1%)непрогрессоры2-я группа254 (79,6%) обычноетечение3-я группа33 (10,3%) агрессивноетечение27(84%)5(15%)34 - 38,9128(50,3%)126(49,6%)34 - 38,921(63%)12(36%)34 - 38,9319(100%)32 (10,1%)254 (79,6%)33 (10,3%)319(100)15 лет15 лет15 лет6-9 лет15 лет5 лет15 лет32(100%)237(80%)26(78%)295 (92,4%)Не применяли из-заотсутствия АРВТ78 (30,7%)29(87,8%)107(48,8%)078 (30,7%)29(87,8%)107(48,8%)32(100%)176(55,1%)4(0,12%)212(66,4%)0186(73%)Три раза в год илипо показаниям(11430)Раз в 4 месяца илипопоказаниям(11430)33(100%)Четыре раза в годили по показаниям(1980)219(68,6%)Всего 14370 опред-ийпоказ-ей ВН за 15 летРаз в 3 месяца или попоказаниям(1980)Всего 14370 опред-ийпоказ-ей CD4,D8,CD4/CD8 за15летДважды в год (960)Раз в 6 месяцев (960исследований)Всего проведено0160(62,9)21(63,6%)181 (56,7%)0187(73,6%)12(36,3%)199 (62,3%)952.4.
![](https://s.studizba.com/z.php?f=/templates/si/i/noavatar.png&w=100&h=100&t=1"){kind=avatar}
