Методы общей бактериологии (том 2) (947293), страница 54
Текст из файла (страница 54)
16.7. ЛИТЕРАТУРА Фотометрия Оби!ая литература 1. Ваитап )7. Р. АЬвогр1)оп врес1горЬо1оте1гу, Лойп байеу 4) Яопв, 1пс., Хеег Уогй, 1962. 2. Вгеигег Л. М., Реясе А, У., Аяйыогтй Я. В. Ехрентеп1а( 1есЬпщпев !п Ыосйет!я(гу, Ргеппсе-НаИ, 1пс., Епя!еасоф Синя, ЬЬ Л., 1974. В гл. 7 рассиотреиы теоретические аспекты алсорбции и флуоресцеитиого ивлучеиия. Специальиая литература 3, Вигяе Я. )Р'., Маогоб!пеппи Я. !ча(1. Впг. 8(апд. Врес. Рпйь, 446 (1977).
4. /исая В. Н., В!апя !7. Е. Агп. ЬаЬ., 9(!1), 77 — 89 (1977). 5. В!ашп 57. Апа!. Сйепт., 35, 561 — 566 (1963). 6. Уапоия Я. В. Ат. 1.аЪ., 10(7), 67 — 79 (1978). 7. )Рея! М. А., Кегпр Р. 17. Агп. ЬаЬ., 9(З), 37 — 49 (1977). Ионные электроды Общая литература 8. Висlг )1. Р. 1оп ве1еснче е1ес1годев, Апа!. Сйет., 50, 17Й вЂ” 29К (1978). 9. Нпсыпап М. Ь. Меавпгетео1 о1 Мвво!чей ахуна, СЬет. Апа!.
Бег. Мопоиг. Сйет., 49, ! — 255 (! 978). !О. Ьопу С. В!осйет!в(в ЬапдЬоой, р. 2!. Чап Мов1гапд Со., Рг!псе1оп, ЬЬ Л., 1961. 279 ЧАСТЬ гч МЕТАБОЛИЗМ 11. Вез!со!! С. С. В!отей!са! рН теавигетеп!в, Ат. 1.аЬ., 10(3), 131 — 145 (!978). 12. Итез!сог! С. С бе!есИоп апй саге о1 рН е!ес1гойев, Ат. ЬаЬ., 10(8), 71 — 73 (!978). Специальная литература 13.
Евгаугооа Я. Иг. Ме!Ьойв Еихуто1., 1О, 41 — 47 (1967). '14. 1еВ!апс Р. Х„ВХ!гегпзя! 1. Р. Ат. 1.аЬ., 3(7), 5! — 54 (1973). 15. КесЬпгге О. А. Апг. ЬаЬ., 6(2), 13 — 21 (!974). 16. То!А К., Рипуог Е. Апг. 1.аЬ., 8(6), 9 — 18 (1976). Хроматография Общая литература 17. Вгегеег 1. М., Регсе А. Х., АздшоггЬ г(.
В. Ехрептеп1а! 1есЬп!циез !и ЬюсЬет1в1гу, Ргепбсе-НаИ, !пс., Еп8!егчоой С1ти, ЬЬ Х., 1974. 18. Вегеггпапп Н. Ое! сЬгота!о8гарЬу, брг!п8ег Ътег!а8, Ыечг УогЬ, 1968. 19. Вип!ар )7. В. (еа'.). 1пппоЬИгеег1 Ь1осЬет(са! апй аШпяу сЬгота1оягарЬу, Р!епшп РиЬИзЬ|п8 Согр., Мегч УогЬ, 1974. 20. Ое!оме В., Рога!А 1. 1и: Е. Не!!тап (ей.), СЬгота!оягарЬу, 2пй ей., р. 343 — 369, Ее!пЬо1й РпЬИвЫпр Согр., Яея УогЬ, 1967. 21. Не(!тап Е. СЬгота1о8тарЬу, Ъ'ап Нов!гапй-Ее1пЬо!й, Ыечг АТЬ, 1975. 22.
Хаггоуу %'. В., %'е!сдед М. (ей.). МебЬойв Епхугпо!., 34, 3 — 171 (1974). 23. Кдугп 1. Х. 1оп ехсЬапие ргосейигез гп сЬет!в1гу апй Ь!о!о8у: !Ьеогу, ецшрптеп1, !есина!о8у. Ргеп!1се-НаИ, 1пс., Епа!ечгоой СИНв, Ы. Х., 1974. 24. К!гЫапй 1. 1. (ей.). Мойегп ргасИсе о( !щшй сЬгота(оагарЬу, ЪЪГ1- !еу 1и!егзс!епсе, Аечг УогЬ, 197!. 25. МсНа!г Н. М., ВопеЬИ Е. 1. Вавгс спгота1о8тарЬу, Ъапап АегоагарЬ Со., Ъуа!пи! СгееЬ, Саи., 1967. 26. М!!гида В. М.
Оав сЬгота!о8гарЫс аррИсаИопв !и т!сгоЬ!о!оеу апй тей!с!пе, ХоЬп ЪЪгИеу и 5опв, 1пс., Ыечг УогЬ, 1975. В книге уделено много внимания методам, примеияеммм в изучении микроорганизмов. 27. РЬаппас!а Р!пе СЬеписа!в 5ерЬайех. Ое1 ИИга11оп 1и !Ьеогу апй ргасИсе, РЬаппас!а Р!пе СЬеппса!в АВ, Ыррва!а, 5чгейеп. 28. Ъч'Ьа!тап 1пс. Ьгцшг( сЬгота!о8гарЬу Иигйе. ВиИеИп Ыо.
123. ЪЪгпа!тап !пс., СИИоп, ЬЬ Х., !977. Один нз нескольких коммерческих источников информации, особенно, ио хроматографическим средам. Специальная литература 29. А!сос)г Ф. )ч". МеИгойв Епхуто1., 13, 397 — 415 (1969). 30. Апйгегез Р. ВюсЬет. Х., 91, 222 — 233 (1964). 31. Аз!ее!ай(з О. Т., Агтогизгег М. А., 0173ат Р. Т. Апа!. В!осЬегп., 70, 64 — 74 (!976). 32. Аяеп )7., РогаМ 1., Егпуасд В. Ыа!иге (Ьопйоп), 2!4, 1302 — 1304 (1967).
280 гб. ФИЗИЧЕСКИЕ МЕТОДЫ ЗЗ, В!аипег Р. В., Ег!сйяоп Н. Р. Апа!. В1осЬегп., 18, 220 — 227 (1967). 34. Вгоойз Х. В., ВовеВ У. В., Ротуу 6. Б., Агт(!еЫ А. Я. Сап. д. М!сгоЫо!., 16, 1071 — 1078 (1970). 35. Вгоо)гя Х. В., Мозг С. И'., Новей У. Я. д. Вас1епо!., 100, 528— 530 (1969). 36. Сиатгесазаз Р., Рапуа !. В!осбев)з!гу, 1!, 2291 — 2299 (1972). 37. РагявсМ Р, Моея С. В'.
Арр!. М!сгоЫо1., 17, 262 — 267 (1969). 38. Рииег Л. Х. Вг. Х. Ехр. Ра!Ьо1., !9, 130 — 139 (1938), 39. Ри!тег С. Б., Рраяяегтап В. Н., 3. Вю!. СЬет., 254, 7208 — 7212 (1979). 40. Ноги 2., МаМ!а М., Татига У„СЬегп. !пд. (Ьопдоп), 34, 1494 (1965). 41. Нитте! Х. Р., Огеуег %'. Х., Вгос1шп. В!орЬуя.
Ас1а, 63, 530 †5 (1962). 42. КНябпаа Н., Кги!ша 6., Апа1. В1осЬет,, 70, 18 — 31 (!976). 43. Еа!пе В. А., Еззе!таа ЯГ. Х., Бвее!еу С. С., Ме1Ьобз Епхуто1., 28, 159 — 178 (1972). 44. ЕаНоие К„Н!сй!ая Иг. Х., 9!Ш!атзоп Х. В., 3. В!о!. СЬев., 245, 102 †1 (1970). 45. Еео!л О., МебЬойя Епхуво1., 5, 27 — 33 (1962). 46.
Ре!егзоа Е. А., Бобег Н, А., МеРЬойз Епхуто!., 5, 3 — 27 (1962). 47. ВетИоЫ У. Н., МеЬЬойз Епхуто1., 25, 244 — 249 (1972). 48. Берег Н. А., Оииег Г. Х., ИсуйоЦ М. М., Ресегяоа Е. А., 3. Ат. СЬегп. Бос., 78, 756 — 763 (1956). 49, Бвее!еу С. С., ате!!я 9Г. 9г., Вепг!еу В., Ме!Ьодя Епхуто!., 8, 95 108 (1966). 50. РРМ!а!гег Х. Я., Апа!. СЬегп., 35, 1950 — 1953 (1963). 51.
Уота!сава Т., Не!а Н., Хрп. 3. Ехр. Мед., 34, 36! — 374 (1964). Радиоактивность Общая литература 52. Вгевег Х. М, Реясе А. Х., А!левое!Ь В. В., 'Ехрсг1теп!а! 1есЬпщиее 1п Ыосбев!я(гу, Ргеп!!сс-На!1, 1пс., Епа!евоод С1!!!з, Ы. Х., 1974. В гл. 8 рассматриваются теоретические аспекты намерения радиоактивности 53. Ноггосйз В. О., Репу С.-Т. Огуапк зс!п(!!!а1огз апй !щиЫ аоп61 1аВоп соипВпб, Асадов!с Ргсза 1пс., Ыев УогК 1971. 54. ОЫЬат К.
6 йайоспет!са! те(Ьодз т епхуте аяяау, АтегяЬапт Беаг1е Со., Аг!!па)оп Не!8ЫЗ, 111., 1976. Специальная литература 55. Апйегзоя !.. Е., МсС!иге Иг. О. Апа!. В!осЬет., 51, 173 — 179 (1973) . 56. Аауег Н Б РЕВБ 1.е1!., 7, 293 (1970). 57. ВизЬ Е. Т. Апа(. СЬет., 35, 1024 — 1029 (1963). 58. Рпсье 6. Апа!. В!осЬет., 63, 555 — 558 (1975). 59. ХеНау Н. ОхЫаВоп !есЬпщиез !ог ргсрагаВоп о! !щиЫ зс!пРВ!аВоп завр!ез.
РасКагд Тесбп1са! Вииебп 1П, р. 1 — 8, РасКагй 1пз1гшпеп( Со, !пс., йосКт!1!е, Мб., 1962. 281 чАсть !и, метАБОлизм 60. 1еЦау Н., А!оагее 1. Апа!. СЬелп., 33, 612 — 615 (1961). 61. Райегяол М. В., Огеел й. С. Апа1. СЬепь, 37, 854 — 857 (1965). 62. Тиглег 1. С. Багор!е ргерагаВоп !ог 11цп!д вс(п1111а(1оп соипбпд, ТЬе Вадгосйет1са! Сеп1ге, АтегвЬат, Епи!апд, 1967. Гель-электрофорез Оби!ая литература 63.
Саяйтроо!ая У, 1вое!ес1пс расив1п8: 1ипдатеп1а1 еврее!я., Бер. бес, 1О(1), 55 — 75 (1975). 64. Раг!я В. 1. Ргвс е!ес!горйогев!в. !!. Ме!Лод апд арр1!са1юп 1о Ьитап вегшп рго1егпв, Апп, Ы У. Асад. Бсп, !2, 404 — 427 (1964). 65. Косйта 5. Е!ес1горйогейс апд пппшпое!ес1горйогеВс сЬагас1епяаЬоп о1 !тпшпои1ойи!гпв, р.
!21 — 134. 1п: Х. В. Вове апд Н. Рг1едтап (ед.), Мапиа1 о( с!1пюа1 1тпшпо!о8у, 2пд ед. Атег!сап Яос1е1у 1ог М!сгоЫо!оду, Уе'авЬ1пб!оп, Р. С., 1980. 66. Маиег Н. й. Р!вс е1ес1горЬогеив апд ге!а1ед 1есйп1цпев о! ро1уасгу!агптде бс! е!есоорЬогсыя. 91. дс Огиу1ег, Ыеиг Уогй, 1971. 67. Оглягет ь. Р1яс е1ес(горЬогевв. 1. Васу-8тоипд апд 1Ьеогу. Апп. Ы.
У. Асад. Бс!., 121, 321 †4 (1964). Слециальноя литература 68. В!айея!у й. 27., Воея! 1. А. Апа!. ВюсЬет., 82, 580-582 (1977). 69, Сая!!трао!ая Л'. Апа1. В!осйет.,26, 480 — 482 (1968). 70. Сгея!(!е!д А. М., Мооге В., В!е!л От. Н. 1.
Вю1. СЬет., 238, 622— 627 (1963). 71. Рилйег А. К., йиесйег! й й, д, В1о! СЛет., 244, 5074 — 5080 (1969). 72. ВВол Е., 1опл Т. М. Апа1. ВюсЛет., 27, 193 — 204 (19Б9). 73. Огаяяйп Р„Фе!сйег Н., Ватагой Р. 2. Е. К1гп. СЬет. К11п.
В(осйет., 8, 288 — 291 (1970). 74, Недггтсй 1. с., Втлй А. 1. АгсЬ. Вюсйет. В!орйув., !26, 155 — 1Б4 (!968). 75. !.оел!лу У. В. В!осйет, Л., !13, 131 — 138 (1969). 76. МсРМе Р., Ноилвей 1., Огагтег Ог. В. В)осйет!в!гу, 5, 988 — 993 (1966). 71. О'Роете!! Р. А В!о!. СЬет, 250, 4007 †40 (1975).
78. Реасосй А С., Облетал С бт. В!осйет!в!гу, 7, ББ8 — 674 (1968). 79. ййеу й. Р., Со!етал М. К. 1. 1.аЬ. С11п. Мед., 72, 714 — 720 (1978). 80. (РеЬег К., ОяЬогл М. Л. Вга! СЬет, 244, 4406 — 4412 (1969). 81. ргг!дй! О. !. Сапа1со )(еигь!е!(ег, по 10, р. 6. Сапа1со !пс., Восйч!Пе, Мд. (!968). Манометрия Общая литература 82. Нтйгей 2!г. От., Вигг!я й Н, В!аи((ег 1. Р, МапотеЬдс (есйпияие, Виг8евв Риб!!вЬ1пд Со., М!ппеаро1!в, 1957. 282 Глава 17 ХИМИЧЕСКИЙ СОСТАВ БАКТЕРИАЛЬНОЙ КЛЕТКИ Р.
Хансон, Дж. Фаллипс Методы, описанные в этой главе, широко используются в научно-исследовательской практике; вместе с тем их можно применять н в лабораторных занятиях студентов старших и выпускных курсов. В конце главы приводится список работ, в которых описаны другие методы, а также — более подробно — методики, рассмотренные в данной главе. Мы не обсуждаем здесь методы, требующие дорогостоящего оборудования или специального обучения персонала.
Потребность в специальных методиках с вариациями в зависимости от природы анализируемых образцов, оборудования и квалификации сотрудников мы старались удовлетворить преимущественно за счет ссылок на другие источники информации, а не путем описания экспериментальных деталей. 17.1. ОСНОВНЫЕ ХИМИЧЕСКИЕ КОМПОНЕНТЫ: ФРАКЦИОНИРОВАНИЕ И ОПРЕДЕЛЕНИЕ РАДИОАКТИВНОСТИ Включение меченых соединений в бактериальные клетки применяется для определения скорости синтеза и количества синтезированных веществ, а также фракционирования низко- и высокомолекулярных соединений, содержащихся в клетках 121. После инкубации клеток с меченым субстратом и фракционирования метабо.
литов в каждой фракции можно определить радиоактивность. Макромолекулы осаждают с помощью охлажденного разбавленного раствора трихлоруксусной кислоты (ТХУ) и отделяют от низкомолекулярных веществ центрифугированием. Надосадочная фракция низкомолекулярных веществ содержит пулы таких метаболитов, как углеводы и их производные, органические кислоты, аминокислоты, нуклеотиды и коферменты, а также олиго- 283 ЧАСТЬ !У, МЕТАБОЛИЗМ БАКТЕРИАЛЬНБ!Е КЛЕТК' 1 з:алод аз ТКУ НИЗКОМО~ЕКТЛЧз 5 Е БоЮОКОАЛОЛЕК ТЛЯРНЬ Е ЙЕБ Е СА БЕШЕСТБА НаОН РНК ДНК БЕЛКИ р ПЧ А~К БЕЙКИ Рис.
1тд. Схема фраккионира- ваиия бактериальных клеток на основные химические компонен- ты. 17.1.1. Реактивы и материалы Физнологичесхий раствор: 0,85%-ный (вес/объем) раствор (ЧаС! в дистиллированной воде. Растворы 50, 20, !О и Бз(з-ной (вес/объем) ТХУ в дистиллированной воде. (Лредостерелселие! ТХУ проникает через кожу, растворяется в лнпидах н вызывает раздражение кожи. В связи с этим с ней следует работать в резиновых перчатках, соответствузошей лабораторией одежде и защитных очках ) 284 нуклеотиды и основные белки с числом нуклеотидных или аминокислотных остатков соответственно менее двадцати [2).
Осадок, содержащий макромолекулы, последовательно экстрагируют: липиды — органическими растворителями, РНК вЂ” щелочами, ДНК вЂ” горячей ТХУ. Осадок, остающийся после такого экстрагироваиия, содержит клеточные белки. На рис. 17.1 изображена схема процесса фракционирования. Полное разделение всех химических компонентов и выделение макромолекул определенного типа в одной фракции невозможно осуществить с помощью какого- либо одного метода. Как правило, для этого приходится применять несколько методик. Ниже приведены методики фракционирования, описанные Кеннелом ~~11, которые представляют собои модификации методов Робертса и др. (21.
!7. ХИМИЧЕСКИЙ СОСТЛВ Этанол: 70тюный раствор (объем/объем) в дистиллироваяиой воде. (Предостереэсение! Этанол легко воспламеняется, Следует избегать работы вблизи открытого огня и электрических приборов, вызывающих искрообразование ) Гхиэтиловый эфир. (Предостережение1 Эфир легко воспламеняется при контакте его паров с огнем или электрическими искрами. В лаборатории следует хранить минимальное количество эфира. Все растворы эфира нужно нагревать в герметичных контейнерах на водяной бане, а не в термостате. Чтобы избежать вдыхания паров эфира, следует работать под тягой.) Гидроксид натрия (0,5 н.): растворяют 2,0 г в 100 мл дистиллированной воды Бычий сывороточный альбумии: растворяют О,1 г в 1О мл дистиллированной воды и хранят в холодильнике. Стеклянная посуда.
20-мл пирексовые стеклянные химические стаканы, 1О-мл колбы Эрленмейера, 25-мл мерные колбы, 15- и ЗО-мл центрифужные пробирки с крышками. Фильтры с синтетическими мембранами или мембранами из стекловолокна с размером пор 0,45 мкм и диаметром 25 мм. Фильтры должны быть устойчивы к кислотам и растворителям. Пирексовый держатель для фильтрования должен быть снабжен пористой стеклянной прокладкой.
![](https://s.studizba.com/z.php?f=/templates/si/i/noavatar.png&w=100&h=100&t=1"){kind=avatar}
