Методы общей бактериологии (том 2) (947293), страница 49
Текст из файла (страница 49)
д. и вновь просчитывают (С~). Отсюда общая эффективность счета равна (С~ — С)!Р,„ а радиоактивность образца равна С ' с,— с. Метод внутренней стандартизации имеет ряд недостатков. Он довольно трудоемок, так как флаконы приходится извлекать из счетчика, добавлять в пих стандарт и вновь просчитывать. После этого образец становится непригодным для повторного измерения. Метод также неудобен тем, что при добавлении стандарта во флакон необходима точная дозировка, которой достигают с помощью специальных автоматических пипеток или шприцев.
Метод отношения каналов. Этот метод основан на том, что амплитудный спектр импульсов в данной системе сцинтиллятор — изотоп при наличии тушения сдвигается. В счетчике с двумя каналами пороги в каждом регулируют раздельно, определяют счет в каждом канале и выражают его в виде отношения. Этот метод можно использовать и с одноканальным счетчиком, однако в этом случае необходимо производить счет дважды, перестраивая канал каждый раз по мере необходимости. Применяя стандарты с разным содержанием тушителя, ЧАСТЬ !Г МЕТАБОЛИЗМ строят кривую зависимости эффективности счета от отношения счета в каналах и затем используют эту кривую в последующих расчетах. В обоих каналах нижний порог устанавливают таким образом, чтобы фиксировались импульсы с амплитудой, превышающей амплитуду фоновых импульсов. Один из порогов — верхний или нижний — может быть одинаковым для обоих каналов, а второй — различным.
Можно настроить счетчик и так, чтобы и верхние и нижние пороги были различными для двух каналов. Поскольку тушение вызывается как бесцветными химическими веществами, например водой и СС!о так п окрашенными, приготовление стандартов с таким же уровнем тушения, как и у неизвес" ного вещества, может оказаться трудным. Следовательно, если в образцах неизвестною состава присутствуют окрашенные соединения, вызываютцне тушение, особенно в высоких концентрациях, неизбежна ошибка в приготовлении стандарта.
Тем не менее данньш метод применим в широком диапазоне условий ~571. Двухканальные системы требуют меньше времени для настройки, если только не приходится иметь дело с очень низкими скоростями счета. В последнем случае для получения отношения счетов заданной точности требуется намного больше времени, чем при использовании метода внутренней стандартизации. Применяя метод отношения каналов, образцы можно просчитывать повторно.
Метод внешней стандартизацаи. Новейшие приборы для измерения радиоактивности оснашены источником у-излучения с известной радиоактивностью, который в нужный момент в соответствии с программой рабо~ы прибора устанавливают прямо под флаконом. Счет производят с источником у-излучения и без него. Калибровочную кривую, отражающую зависимость счета для внешнего стандарта от эффективности счета (эффективность изменяют внесением тушителей), используют для коррекции счета в опытных образцах, Метод чувствителен к изменениям объема сциптиллятора, толшины стеклянного флакона и природы сцинтиллятора.
Ошибки могут возникать из-за негомогенностн растворов или разного размера просчитываемых бумажных полосок. При низких уровнях радиоактивности длительный счет ие требуется, как в методе отношения каналов, Метод ы еизнчаскна мйтоды внешней стандартизации можно усовершенствовать, ес. ли сочетать его применение с принципом определения отношения каналов. В этом случае внешний стандарт считают в дв,х каналах, отрегулировав порог на амплитуду импульсов, превышающую амплитуду импульсов исследуемого изотопа, а затем определяют эффективность счета. Этот метод требует наличия четырех каналов нли двукратного счета при различных значениях порогов. Сцинтилляциочные растворн 1. Для измерения раиоактивностн в неполярных растворителях (минимальная температура — 30'С): 2,5гДифенилоксазол (РРО) 5 ггл 1,445ис-2-(5-фенилоксазолил) бензол (РОРОР) 0,3 гул Толуол Очень высекая эффективность счета (90 — 95Я.
Можно испельзевать для счета бумажных фильтров в форме дисков (М(11!роге Согр.), если они сухие Погруженные в толуол ди «и должны быть прозрачными; если енн белые, то это означает, что высушивание было неполным. 2. Для измерения радиоактивности в гомогенных растворах или эмульсиях (в зависимости от количества воды: в присутствии 4 — 14е/аводы образуются растворы, 20 — 30е)е воды — эмульсии) 161, 62]: Толуол (667 мл), содержащий 04Чз РРО (2,67 г) и 0,1ей РОРОР (0,07 г) Тритон Х-100 (Кейгп апб Нааз Со., РЫ1абе1рЬ!а Ра.) 333 мл Эффективность счета для ыС вЂ” 52 — 68ей, для 'Н вЂ” 7 — !Оты однако она варьирует в зависимости ет партии тритона Х-100.
3. Для измерения радиоактивности в устойчивых гелях свысоким содержанием воды (в присутствии 35е/е воды образуются эмульсии, прн низкой температуре образуются устойчивые гели (до — 5'С), которые при нагревании разжижаются| 1611: Толуел (538 мл), содержащий 0,4св РРО (2,1 г) и 0,1е)е РОРОР (0,05 г) Тритон Х-!ОО 462 мл Эффективность сгета для иС вЂ” 43 — 55зй в присутствии 437е воды. Использование тритин рекомендуется только в том случае, если измеряют радиоактивность геля.
Эффективность счета для 'Н равна -5'с. Полезен при применении с суспензнями тканей, порош- 255 часть 1о матаволизм ками, например карбонатом бария и другими материалами белого цвета. 4. Для измерения радиоактивности в гомогениых растворах с содержанием воды до 33о(о [58): Тритон Х-!00 257 мл Этиленглииоль 37 мл Этанол 105 мл Ксилол 500 мл (до конечного обьема 1 л) РРО 3 г (РОРОР ие используют) Эффективаость счета без тушения — 87% для ыС и 47% для 'Н. При максимальном количестве воды — 82% для мС и 35% лля 'Н. Зависимость между эффективвостью счета и отношением внешнего стандарта [см. ниже) имеет линейный характер. 5. Для измерения радиоактивности в солюбилизированных полиакриламидных гелях: Тритон Х-115 (мойш апб Нааз Со.) 250 мл Ксилол 750 мл РРО 3 г (РОРОР не требуется) Максимальная эффективность счета — 93% для мС и 47!о лля зН.
В присутствии 30% воды эффективность счета снижается до Г>0— боз)з для ' С и 10с)з для зН. При промежуточных значениях концентрации воды образуется устойчивая эмульсия 6, Для измерения радиоактивности в СОт !60): Этаноламин 1 часть Монометиловый эфир этиленгликоля 8 частей Толуол 10 частей РРО 5 г/л 16.4.4. Статистина счета (52, 531 При определении радиоактивности по измерению счета и времени даже в идеальных условиях не исключены случайные ошибки, которые могут привести к неправильным результатам. Поэтому необходимо располагать статистическим способом определения ошибки. Для правильного его применения можно не знать, как получают конечные выражения, но необходимо знать принятые допущения и терминологию статистики счета.
В нашу задачу не входит ни обсуждение применения этого способа, ни приведение соответствующих примеров, так как для этого потребовалось бы множество таблиц и графиков. Тем, кого интересует более подробная информация, мы рекомендуем обратиться к списку литературы в конце данной главы. Однако мы перечислим некоторые важ- 16.
ФИЗИЧЕСКИЕ МЕТОДЫ ные способы статистической обработки и приведем сбответствующие уравнения. К иим относятся способы опре. деления среднего значения счета, стандартного отклонения для единичного и многократного счета, стандартной ошибки счета и скорости счета в процентах (616 5Е), а также времени счета, необходимого для получения результатов с данной стандартной ошибкой при наличии фона и без него с одинаковыми и различными временами счета фона и образца.
Существуют также уравнения и таблицы для определения времени счета фона, а также общего счета с определенной стандартной ошибкой. Эти уравнения и таблицы позволяют устанавливать пределы обнаружения радиоактивности и выбирать правильный способ устранения тех значений счета, которые сильно отклоняются от среднего. Существуют различные виды ошибок: например, если истинное значение лежит в пределах измеренного в 50% случаев, то такую ошибку называют вероятной; если в 68% случаев„ то ее называют стандартной (средней квадратичной) ошибкой, а если в 99 — 100%, то 99%-ной.
Поскольку коэффициент стандартной ошибки во многих статистических расчетах = 1 и это значение используется чаще всего, мы рассмотрим здесь только «стандартные» формы уравнений. Это означает, что любое из ряда полученных значений не отличается от среднего зна; чеиия более чем на стандартное отклонение в 32% слу* чаев. Поскольку ошибки счета постоянны во времени, можно определить число просчитанных импульсов, необходимых для получения результатов с данной стандартной ошибкой, используя приведенные ниже выражения.
![](https://s.studizba.com/z.php?f=/templates/si/i/noavatar.png&w=100&h=100&t=1"){kind=avatar}
