Тимин О.А. Лекции по общей биохимии2020 (832729), страница 57
Текст из файла (страница 57)
На ход электрофореза влияет подвижность разделяемых веществ,находящаяся в зависимости от следующих факторов:o заряд (обычно зависит от pH), размеры и форма молекул веществ,o электрическое поле: скоростьмиграции ионов вещества прямопропорциональна силе тока (обусловлена переносом ионов буфераи образца), напряжению и обратнопропорциональна сопротивлению(зависит от типа и размеров носителя и ионной силы буфера),o буфер: состав, концентрация, pH иионная сила, зависящая от концентрации ионов и их заряда,o носитель: учитывается его гидрофильность, адсорбция веществ намолекулах носителя.Количество выделяемых фракций определяется условиями проведения электрофореза.При электрофорезе на бумаге и пленках ацетата целлюлозы выделяют 5 фракций (альбумины,1-, 2-, - и -глобулины), в то время как в полиакриламидном геле – до 20 и более фракций.Тимин О.А.
Лекции по общей биохимии (2020г)biokhimija.ru309При использовании более совершенных методов (радиальная иммунодиффузия, иммуноэлектрофорез и других) в составе глобулиновых фракций выявляются многочисленные индивидуальные белки.На вид протеинограммы оказывают влияние только те белки, концентрация которых достаточно высока.ТИПЫПР ОТЕ ИН ОГР А ММАльбуминыВ клинической практике для сыворотки выделяют 9 типов электрофореграмм (протеинограмм), соответствующих различным патологическим состояниям.ТипФракции глобулиновпротеиноПримеры заболеваний12граммыНачальные стадии пневмоний, острые полиартриты, экссудативный туберкулезОстрые легких, острые инфекционные заболевавоспаленияния, сепсис, обширный инфаркт миокардаПоздние стадии пневмоний, хроническийХронические туберкулез легких, хронический эндокарвоспалениядит, холецистит, цистит и пиелитГенуинный, липоидный или амилоидныйНарушения понефроз, нефрит, нефросклероз, токсикозчечного фильбеременности, терминальные стадии тутраберкулеза легких, кахексииЗлокачественМетастатические новообразования с раз ные опухолиличной локализацией первичной опухолиПоследствия токсического поврежденияпечени, гепатиты, гемолитические процессы, лейкемии, злокачественные новоГепатитыобразования кроветворного и лимфатического аппарата, некоторые формы полиартрита, дерматозыЦирроз печени, тяжелые формы индуративного туберкулеза легких, некоторыеНекроз печени формы хронического полиартрита и коллагенозовОбтурационная желтуха, желтухи, выМеханические званные развитием рака желчевыводящихжелтухипутей и головки поджелудочной железы2-глобулиновые плазмоци- 2-плазмоцитомытомы1-плазмоцитомы, 1-плазмоклеточная-глобулиновые лейкемия и макроглобулинемия Вальденплазмоцитомыштрема-глобулиновые-Плазмоцитомы, макроглобулинемия иплазмоцитомынекоторые ретикулезыАзотсодержащие вещества крови310БЕЛКИО СТ РОЙ ФАЗЫБелки острой фазы – большая группа белков сыворотки крови (в основном -глобулинов) с молекулярной массой от 12 кДа до 340 кДа и различными функциями, объединенныхпо общему признаку – быстрое и значительное увеличение концентрации при бактериальной, вирусной, паразитарной инфекции, физической или химической травме, токсическойили аутоиммунной реакции, злокачественных новообразованиях.
Смысл данного увеличения заключается в повышении резистентности клеток к окислению, в ограничении повреждения тканей, в подавлении скорости размножения бактерий.Синтез белков острой фазы осуществляется печенью, моноцитами, лимфоцитами,нейтрофилами. Их концентрация зависят от стадии заболевания и/или от масштабов повреждений. Синтез белков включается и регулируется рядом медиаторов, среди которых цитокины, анафилотоксины и глюкокортикоидыК белкам острой фазы относят С-реактивный белок, сывороточный амилоид А, гаптоглобин, 2-макроглобулин, церулоплазмин, 1-гликопротеин, 1-антитрипсин, орозомукоид, компоненты комплемента С1-С4, С9. Трансферрин также относят к белкам остройфазы, но его концентрация при воспалениях снижается – негативный белок острой фазы.Увеличение концентрации белков острой фазы в крови является хорошим индикаторомне только явного, но и скрытого воспаления (например, атеросклероз).ФУНКЦИИБЕ ЛКОВ ПЛ АЗ МЫ КРОВ ИМногообразие белков крови приводит к тому, что они обладают многочисленными функциями:1.
Поддерживают постоянство коллоидно-осмотического давления крови.2. Участвуют в регуляции кислотно-основного состояния.3. Удерживают в связанном состоянии и транспортируют катионы кальция, магния, железа,меди и другие ионы, препятствуя их потере с мочой.4. Связывают и транспортируют углеводы, липиды, гормоны, лекарства, витамины, токсичныевещества.5.
Определяют вязкость крови и сохраняют устойчивость эритроцитов и лейкоцитов в кровотоке, обеспечивают нормальный кровоток в капиллярах (реологические свойства крови).6. Специализированные белки участвуют в свертывании крови (фибриноген, протромбин, антигемофильный глобулин и др.).7.
Обеспечивают иммунную защиту организма (иммуноглобулины, факторы системы комплемента, трансферрин и пропердин).8. Являются резервом аминокислот.ОСОБЕННОСТИКОЛИЧЕСТВ А БЕЛКОВЫХФР АКЦ ИЙ У ДЕТ Е ЙУ новорожденных содержание общего белка в сыворотке крови значительно ниже, чему взрослых, и становится минимальным к концу первого месяца жизни (48 г/л). Ко второмутретьему годам жизни общий белок повышается до уровня взрослых.В течение первых месяцев жизни концентрация глобулиновых фракций низка, что приводит к относительной гиперальбуминемии до 66-76%.
Между вторым и двенадцатым месяцами возникает временное превышение концентрацией 2-глобулинов взрослого уровня.Количество фибриногена при рождении гораздо ниже, чем у взрослых (около 2,0 г/л), нок концу первого месяца достигает обычной нормы (4,0 г/л).biokhimija.ruТимин О.А. Лекции по общей биохимии (2020г)311И Н Д И В И Д У АЛ Ь Н Ы Е Б Е Л К И П Л АЗ М Ы К Р О В ИА ЛЬБУМИ НГлобулярный белок плазмы крови, синтезируется исключительно в печени. Молекулярная масса 69 кДа.
существует микрогетерогенность молекул альбумина, что связано с количеством и качеством агрегированных с альбумином молекул.Значение альбумина в крови:1. Поддержание коллоидно-осмотического (онкотического) давления крови (благодаря высокой гидрофильности).2. Транспортная функция – благодаря большому количеству заряженных и гидрофобныхучастков альбумин переноситo пигменты – билирубин, уробилин (одна молекула альбумина может одновременно связать 25-50 молекул билирубина),o длинноцепочечные жирные кислоты – основная физиологическая функция сывороточного альбумина (6-8 молекул на одну молекулу альбумина),2+2+o катионы (например, Ca и Mg ), благодаря большому количеству глутамата, другие металлы (ртуть), также способен связать анионы (Cl–),o соли желчных кислот,o витамины,o гормоны (альдостерон, прогестерон, гидрокортизон),o органические красители,o лекарственные вещества (дигоксин, барбитураты, пенициллин, ацетилсалициловая кислота, сердечные гликозиды).Гиперальбуминемия наблюдается при тех же состояниях, что и гиперпротеинемия.Снижение концентрации альбумина наступает при больших потерях белка, связанныхс кровотечением, при нарушении синтеза альбумина или увеличении скорости его распада. 1 - Г ЛОБУЛИ Н ЫВо фракции 1-глобулинов наиболее исследованными являются 1-антитрипсин, 1-липопротеин и 1-гликопротеин, 1-фетопротеин, 1-антихимотрипсин.1.
1-антитрипсин (1-протеиназный ингибитор), гликопротеин, образуется в печени,белок острой фазы, является ингибитором протеиназ (трипсина, химотрипсина, калликреина,плазмина, эластазы лейкоцитов) и обусловливает 92-94% от общей антипротеолитическойфункции крови. Концентрация возрастает при воспалительных процессах, злокачественныхобразованиях, при действии гормонов (беременность, стероидная терапия), системной красной волчанке. Снижается количество белка при эмфиземе легких, хроническом аутоиммунном гепатите (ювенильный цирроз).2. 1-антихимотрипсин (ранее 1-гликопротеин Шульца) является одним из реагирующих первыми белков острой фазы (уровень в сыворотке может удваиваться в течение нескольких часов), представляет собой слабый специфический ингибитор химотрипсина, вместе с темотмечена его активность по отношению и к другим протеазам.
Увеличение концентрациибелка обусловлено острофазовыми реакциями: воспаление, травма после хирургической операции, инфаркт миокарда, бактериальные инфекции.3. Орозомукоид (кислый 1-гликопротеин) является белком острой фазы и синтезируется в печени. Функцией является связывание стероидов (прогестерон, тестостерон) и лекарств (пропранолол и лидокаин). Повышение уровня белка в крови отмечается при лихорадке, острых и хронических воспалительных процессах, ревматоидном артрите, злокачественных опухолях, травмах, инфаркте миокарда, беременности.