МУ (830995), страница 18

Просмтор этого файла доступен только зарегистрированным пользователям. Но у нас супер быстрая регистрация: достаточно только электронной почты!

Текст из файла (страница 18)

Пробы биоматериала и иммуносерологическиеметоды определения возбудителейинфекционно-воспалительных процессов8.1. Общие положенияПроведение иммуносерологических исследований основано наприменении технологических приемов (методик), позволяющихопределять специфические антигены возбудителей инфекционных,и инфекционно-воспалительных заболеваний, и/или вводимых привакцинации, и ответной реакции на них организма образованиемантител.

Это необходимо для объективизации клинического диагно­за, результатов терапии, оценки качества вакцинации, своевремен­ной организации и проведения противоэпидемических мероприятий.Тест-системы, предназначенные для определения специфическихантигенов, используются для идентификации конкретного микроорга­низма в гробе клинического материала или выращенного in vitro.С помощью методов, предназначенных для определения анти­тел, дается характеристика ответа организма (человека) на конкрет­ный антиген без учета или с учетом специфического класса имму­ноглобулинов (Ig), в котором они находятся.

IgM-ранние антитела(4—7 сут. от первичного инфицирования микроорганизмами), IgGпоздние антитела, которые (в зависимости от антигена) могут нахо­диться в организме от 5—7 суток до 3—4 недель (период реконвалесценции) и даже всю жизнь. Сывороточные IgA при всей их вари­абельности по срокам образования (11— 15 суток) и персистенции ворганизме (до 30 суток) отражают не столько реакцию на конкрет­ный бактериальный антиген, сколько на деструкцию органа, обу­словленную воспалительным процессом микробной этиологии.Уровень секреторного IgA - прогностический признак вероятностиразвития инфекции на слизистых оболочках при нарушениях микро­экологии, т.

е. микробиологического аспекта системы антиинфекционной резистентности (САЙР), а также вероятности проникновения(транслокации) возбудителя в другие органы и ткани. Уровень IgEантител увеличивается в ответ на паразитарные инфекции, но спе­цифическая реакция на другие инфекционные агенты в этом классеIg отсутствует.96МУ 4.2.2039—05Возникновение инфекционного и инфекционно-воспалительногозаболевания, течение патологического процесса и эффективность тера­пии в большой степени зависят от состояния защитных сил организма,т. е. от факторов системы антиинфекционной резистентности, в част­ности, в ее иммунологическом аспекте.

Нарушения в синтезе и функ­циональной активности терминальных компонентов каскада компле­мента (мембран-атакующего комплекса) - фактор, предрасполагающийк развитию рецидивирующих нейссериальных (N. gonorrhoeae) инфек­ций. Мутация в рецепторе у-интерферона - основа тяжелейшей диссе­минированной микобактериальной инфекции и фатального исхода отMycobacterium bovis - основы противотуберкулезной вакцины Кальмет-Герена. Полиморфизм генов человека - основа устойчивости к ма­лярии, а врожденное отсутствие некоторых эритроцитарных антигеновсреди определенной человеческой субпопуляции определяет их абсо­лютную устойчивость к парвовирусам. Недостаточность или наруше­ния в функционировании бактерицидных систем в клетке нейтрофилаи/или в целом в процессе фагоцитоза - основа развития воспалитель­ного процесса, вызванного условно-патогенными микроорганизмами.В настоящее время имеется возможность определения и подсчета ко­личества В-лимфоцитов, активирующих плазменные клетки, образую­щие антитела, с паралллельным определением специфических антиге­нов.

Для этого используют гробу периферической крови, в которойтакже определяют вирусы лихорадки Денге, гриппа, респираторносенсициального, вируса иммунодефицита человека (ВИЧ).Учитывая важность иммунологического и микробиологическо­го аспектов системы антиинфекционной резистентности организма вразвитии и течении инфекционно-воспалительных процессов, в т. ч.внутрибольничной природы, в научно-практических лабораторияхрекомендуется проводить комплексные клинико-микробиологичес­кие и иммуно-серологические обследования.8.2.Иммуносерологическое обследованиеИммуносерологическое обследование включает определение:♦ антител к эндо- и экзотоксинам, клеточной стенке и ее ком­понентам микробов-воз будите л ей воспалительных процессов;97МУ 4.2.2039—05♦ С-реактивного белка (СРБ) и других белков острой фазы какпоказателей наличия и активности воспаления инфекционной при­роды;♦ бактерицидной активности сыворотки (БАС) и/или другихжидкостей тела с аутоштаммами пациента; этот тест до назначенияантибактериальной терапии свидетельствует о состоянии комплексагуморальных факторов защиты организма, при наличии антибакте­риальной терапии позволяет проводить мониторинг ее активности;♦ иммуноглобулинов М, G, А классов в сыворотке крови идругих жидкостях организма как показателя остроты и длительно­сти инфекционно-воспалительного процесса, способности обследо­ванного реагировать на возбудитель, а также как необходимых ком­понентов, участвующих в фагоцитозе нейтрофилов в качестве опсонинов (IgM, IgG) и показателя наличия деструкции органа (IgA) врезультате воспаления;♦ активности комплемента и его компонентов в качестве суб­станции, приводящей к лизису клетки микроорганизма, если ком­плекс антиген—антитело находится на ее поверхности, и как иници­атора выброса нейтрофилов, если комплекс находится в тканях, атакже как опсонина;♦ лизоцима как показателя состояния лейкоцитов, способно­сти организма к лизису грамположительных кокков и в крови - Е.соН;♦ фагоцитарной функции нейтрофилов в незавершенном и за­вершенном вариантах с контрольными и аутоштаммами, выделен­ными из очага воспаления;♦ В-лимфоцитов, учитывая их способность к дифференциациив плазменные клетки и образованию специфических антител в раз­личных классах иммуноглобулинов;♦ Т-лимфоцитов и их субпопуляций как контролирующих ак­тивность В-лимфоцитов и реагирующих с клетками с более низкойстепенью специфичности, чем те, с которыми реагируют цитотокси­ческие Т-лимфоциты.Стерильную посуду для сбора проб и их транспортирования(кровь и другие жидкости организма обследованных) накануне по­лучают в лаборатории.98МУ 4.2.2039—05Иммуносерологические исследования проводят параллельно смикробиологическими, анализирующими материал из очага воспа­ления, обсемененность слизистой верхних дыхательных путей (нос,зев), гениталий и содержимого кишечника.Все пробы готовят в один и тот же день: при поступлении,накануне операции или с операционного стола (до операции), на 3—4-е сутки после операции (2—3-е сутки после госпитализации у те­рапевтических больных), на 14— 16-е сутки после операции (послегоспитализации терапевтических больных), перед выпиской из ста­ционара или в сроки, оговоренные клиницистами.Комплексные исследования с анализом проводят с целью изу­чения патогенеза воспалительного процесса определенной локали­зации, вызванного условно-патогенной микрофлорой, которые поз­воляют установить нарушения в системе антиинфекционной рези­стентности организма, определить возможность развития внутри­больничной инфекции и реакцию на нее конкретного больного, атакже способность пациента реагировать на определенный возбуди­тель (возбудители), проводить мониторинг эффективности антибак­териальной и специфической иммунотерапии и других лечебныхмероприятий.8.3.Методы исследования,применяемые в иммуносерологииВыбор оптимального метода определения антигенов и антителзависит от соответствия собранной пробы целям и задачам исследо­вания (сроки от начала заболевания, отсутствие гемолиза и липолизапробы, контаминации посторонней микрофлорой) и требований кспектру исследований, которые могут быть выполнены в конкрет­ной лаборатории.Используют следующие методы исследования:Реакция агглютинации - используют для подтверждения нали­чия инфекции, вызванной определенным бактериальным антигеном.Непрямая (пассивная) гемагглютинация (РИГА) с латекснымичастицами или эритроцитами барана - используют для определенияналичия антител к возбудителям кишечных инфекций, в модифика­ции с использованием латексных частиц (диагностикумов) - для99МУ 4.2.2039—05диагностики бактериальных менингитов, определения антигеновCandida, гонококков, гемофильной палочки.Ингибиция гемагглютинации - модифицированная РГТГА, ис­пользуют для определения антител к вирусам краснухи, гриппа, па­рагриппа, респираторно-синцитиального.Преципитация - реакция между растворимыми антигенами иантителами, используют метод диффузии в геле.Радиальная иммунодиффузия - определение анигенов или ан­тител в моноспецифической системе с чувствительностью 1—10 мг/л, используют для сравнения антигенов (чувствительность несколько наннограмм/мл).Электроиммунодиффузия - подобна радиальной, но миграцияреагентов направляется электрическим полем, и ее чувствитель­ность в 5— 10 раз выше, чем в радиальной иммунодиффузии.Бы стры е методы определения антигена и антител (15—20 мин) - основаны на использовании коллоидных, меченых золо­том антител.

Определяют антитела к ВИЧ и антиген хламидии тра­хом атис. Диагностику лихорадки Денге осуществляют с помощьюиммунохроматографического определения сывороточных IgM иIgG.Методы с меченными антителами - специфичные высокочув­ствительные методы для определения антигенов в клетках и тканях:прямая (ПИФ) и непрямая (НИФ) иммунофлуоресценция, а такжеантигенов микроорганизмов. Используют для определения класте­ров дифференциации и антигенов на поверхности лимфоцитов.Можно определять антигены в мазке материала (инфекции, переда­ваемые половым путем).

Характеристики

Список файлов книги