Sambrook, Russell - Molecular cloning. Laboratory manual - v.3 (522944), страница 54
Текст из файла (страница 54)
Т[ яие ерес[йсйу ь асЬ[ечег[ Ъу ее[ее([оп оЕ ап арргорпасе ргогпосег Еог ехргея[оп оЕ |Ье Тес гергеяог |и йЬе сагдес сейя ТЬе Тес гергеяог еуесет Ьае Ьееи сьев еиссеяс пйу |п сгапедеик р!аисе (бояеп аис[ Ви)ай|1 !992; Риг(Ь ей а1. 1994; ъъги ап|1 СЬ|апд 199б), ъч[СЬ сЬе Ьеей гееп!Я Ье|пд асЬ[ечег[ ш СоЬассо [байк еС а]. 1991, 3992; Гог геч|еъчя р!еаее еее бояеп еС а[. !993, 1994; байк 1995). Ноъчгечег, ейогь со еесаЬПеЬ а соггеероигйпд зуесет ш тапииайаи сейе Ьаче Ъееп оп!у рагбайу епссеяГи] ас Ьеес, регЬаре Ьеса|ье гергея[оп оЕ а есгопд рго|иосег гег[и[гее а сопсепсгасюи оЕ гергеяог ЫПЬ епопдЬ со еасигасе сйе се|О е]етепся 5исЬ сопсеийга6опе оГ Тес гергеяог аге с[|ТЕ|си[с со апаса[и [и тапипа1[ап сейе (бояеп ес а1.
1994). Ртптосо! 8: Те|тасусдпе ав Леди)атос о~ГЫнс|Ие бене Ехртеттюп !и Маита!~аи Сей 17.55 ТЬе с!у||апис гапде оЕ |Ье Те| вув|еш )в пшсЬ!отчет ш |гапяеп|1у тгапвГессет) сеПв |Ьап и| в|аЫе сеП Ппев саггу!пд !п|едга|е|1 сор!ев оЕ |Ье |агде| депе апт) |ь тгаив-аст)часог (е.д., р1еаве вее РгеипППеЬ е| а1. 1999). То асЫече ййегепсев оГ 1000-Го!6 Ъетъчееп йе гергеввет! апт) !пт!исес! в|алев, Ь 1в песеввагу |о сгеа|е в|аЫе сеП Ппев сопсашшд |п|едга|е|1 сор!ев оГ йе |ТА депе апт! йе |агде| депе. ТЬ)в сап Ье |1опе |и |ъчо ъчаув: ° ТЬе |агде| депе оЕ !псегея )в с1опес! и||о а "гевропве" р1аяпЫ епсосдпд а сошроипс! ргогпо|- ег йас |уркаду сопявь оЕ вечеп таит!еш1у аггапде|1 сор|ев оГ Те|О ап|1 йе пипппа! !пипе|11- а|е еаг)у ргошо|ег оЕ сугошеда1оч)гив.
ТЬе депе епсосПпд йе ттапв-аст)чат)пд рго|е|п |ТА ь с1опет) !псо а верата|е "теди1а|ог" р1аяпЫ |1оъчпв|геагп Ггош а яшаЫе шапипаПап ртошо|ег. ТЬе тъчо р!аятпь!в аге йеп |гапвуес|ед !п|о йе шапипаПап сеП оЕ сЬоке |о сгеа|е ЫоиЫе-втаЫе*' сеП 1шев. Ттапв|ес6оп ь ивиаПу сатпед оит !п |ъчо владев. Р)гвт, йе геди!а|от р!аяпЫ ь иве6 |о депега|е яаЫе сеП 1шев |Ьа| ехргевв |ТА сопв6|и6че!у, ТЬеве сеПв аге |Ьеп ттапвГесте|1 ъчнЬ тЬе тевропве р1аяпЫ апъ) рог|Пег ялЫшев аге ве1ес|е|1 йа| ехргевв ъ)еягеъ) |)иап66ев оЕ |Ье |агде| депе ргос!ист оп1у ш |Ье аЬвепсе оГ |е|гасус1ше ог дохусусдпе.!п воше савев, П ь ровяЫе |о тедисе йе 1аЬог оЕ ве|рлеп6а1 |гапвЕес|юп агн1 всгееп!пд Ьу ияпд сеП 1|пев |и ъчЬ!сЬ 1птедгате|Е сор!ев оЕ |Ье геди1а|ог р1аяпЫ Ьаче а!геа|1у Ьееп !пв|аде|1 (е.д., р1еаве вее Совдеп апъ) Ви)ать) 1992; "ъЧи апъ) СЬ|апд 1996).
5ечета! сеП 1шев оЕ |Ьь туре аге сопипегс|а!- 1у ачадаЫе Егош СЬО)ъ)ТЕСН. ° А1тетпат)че!у, |Ье ттанв-асг)чалит депе ап|1 |Ье сагде| депе сап Ье с!опес! |п|о а япд1е р!аяпЫ. Весаиве |гапв|ес6оп оГ тпашп|адап сеПв ъч)тЬ Ьо|Ь депев ь сагпе|1 ои| в!пти1|апеоив!у, опе гоип|1 оГ |есдоив всгеешпд ь е!шипа|ей 1п а|ЫЬюп, йе чапа|юп !п ехргевяоп йа| тпау оссш.
!Е йе геди!а|от апт! |агде| депев аге !птедгатес! а| верага|е сЬгогповоша! я|ев п|ау Ъе )еввепед (дс1пйхе е| а1. 1996). 'чЧЬетЬег в|аЪ)е сеП!шев аге евтаЫьЬес) ъчнЬ опе р1аяпЫ ог тъчо, ЕиП оссирапсу оЕ |Ье таит!еш1у аггапдес! |егО ве|)иепсев ь по| ге|)и!тес! Еог шахппа1 ехргевяоп оГ йе |агде| депе. Ветъчееп 6,000 апс! 10,000 гпо!еси!ев оЕ |ТА рег сеП аге виГПс!еп| |о !псгеаве йе 1ече! оГ ехртеввюп оЕ !тыедгатет! сор|ев оЕ гевропве р!аяпЫв Ъу а Гас|от оЕ 10'. |агдег |рлап66ев оЕ |е|гасус1ше|1ереп|1еп| паив-ас||ча|огв шау, |и !ас|, Ъе |охте (е.д., р1еаве вее Ноъче е| а1. 1995; ВЬос1|еи е| а1.
1995; даег е| а1. 1997). ТЬе СЬОХТЕСН ЪътеЬ 5!те соп|ашв а Ъ|ЫюдгарЬу оГ вечега! Ьшн1ге|1 рарегв (ъчъчъч.с!оптесЬ. сош)тет! КеГв))пс!ех.Ьтгп)) йас ПевспЬе йе внесений! гье оГ йе |е|тасусПпе ас6ча6оп вув|епь !п сиПиге6 се1Ь апс! |гапвдешс огдашяпя Но нечет, виссевв !в пос диагаптеет). ТЬе |ТА вув|еш саппо| Ъе в|аЫу евтаЫьЬед |п ваше сеП 1шев, апд, !п о|Ьегв, йе |гапвспр|юп оЕ |атдес депев р1асет! ип|1ег |Ье соп|го! оЕ Те|О саппо| Ъе геди!а!с|! Ьу ПохусусПпе (е.д., р1еаве вее АсИапс)-Ветд1ипъ) апъ) 1.е|Ь 1995; Ноъче е| а1. 1995; МП!ег апс! П)хг!по 1995). 1п|едтабоп оГ |Ье |агде| депе 1п|о ап асбче!у СгапвспЬе|1 гед!оп оГ сЬтоп|овоп|а1 ГЛнъ)А и|ау 1еаъ) |о сопв6|и6че1у Ь!дЬ 1ечеЬ оГ ехргевяоп |и йе ип!пс!исет) власе. ччаув |о ачоЫ |Ьеве апт! ойег ргоЫетпв ап6 |о оргии|хе |Ье еЕГтс!епсу оЕ |Ье вуяетп ате сдвси|ьед Ъу Оо|ьеп ап|1 Ви)агт! (1995) апс) л)п е| а1.
(1996). 1п а|Ышоп, р1еаве все |Ье рапе1 оп Тйо!|ВЕЕ5НООТ1|ыъ а| йе еттс) оЕ йь !отто|!истюп. ТЬе ТеЕ Кечегдег! Ас$!чаЕог Ьу51етть 1п йе сопчеп6опа! Тес |ганг-аст!ча6отт вуяегп, 1очт-то-шос)егате сопсеп|га|юпв оГ с!охусус!ше аге сопв|апбу гет)и)тес) со вирргевв |гапвспр|юп оГ йе |атде| депе, ап|1 !п|1ис6оп аЕ|ет ъч)|Ь6гаъча! оЕ |Ье ап6Ью|к 1в в1оъч апс! авупсЬгопоия Моте еГЕ|с!епс !пт!ис6оп оЕ ехргевяоп оГ йе сагде| депе сап Ье оЬташет) ъч)тЬ тЬе Те| гечегве|1 вув|е|п, ъчЬкЬ ъьев а шшап| Те| герге|ьог (гТетК) йас ййегв Егоп| йе ъчдс$-туре рго|е!и а| Гонт апПпо асн!в (боввеп е| а1.
1995). ччЬеп Ргогоср! 8г Теггасус!те аа Яеди!агог оу 1пг]ис]Ые Сепе Ехргея]оп т Матта!]ап Се)Ь 17.57 гтах (Теиор)у гпмнп)пга) ргогпоГег ПеГ-ор)у гп~пггпа) ргогпоГег ртеГ-Гтак ртеГ-ГТАХ (е) ГагаеГ репе гагаег репе Пег.ор)у гпгпепа) ргогпогег (ТеГ-ор)у гп(п~гпа) ргогпоГег ртагреГ Ртагрег Е)СЕ)3ТЕ 17-8 Аи(огедо1а(огу 5(га(еду 1ог 1пг]ис]Ые Сере Ехргеее(оп ТЬе ЕоПоилпд рго(осо! гьеа ап аи(огедп!агогу ауагегп ш иЬкЬ йе ггапхсНРПопа1 !Ташас(]чагог ((ТА) с]г]чеа па охчп ехргеаяоп апс1 йаг ог'а (агдег депе ]и спЬигег] сеПя Аа с]]асиааес] аЬоче, (ТА ]х а ]пяоп ргосе]п сопяядпд оу (Ье сесгасус!]пе гергегьог оу Е, соП апс1 йе ггапасНРПопа] асПчаПоп г]ошаш оу йе чгр]6 ргоге]п оЕ Ьегрее яшр1ех чггця !и ГЬе аЬаепсе оу Се(гасусПпе, (ТА Ыпс]а го апс] асПчасеа депеа ргесес]ес] Ъу а Ьергашег]Тес] чегяоп оу йе Те( орегагог аес]иепсеа (гегО) р!Ть а пниппа! сугогпеда1оч]гиа ргогпогег (Ьеге соПесги е1у геуеггег] То ае Те(Р).
В]пйпд оу(ТА го Тегр апг] аиЬаег]иеп( депе асг]ча(юп аге Ыос]сес] ]п йе ргеаепсе оусе(гасус]]пе (Р]доге 17-8). ТЬе р]аяп]с] РТе(-5Р1ке (Р]доге 17-9А) соп(а]пе Те(Р прягеаш апс1 5Т)40 ар1ке апс1 ро]уас]епу]агюп ядпа]а с]пипа(геаш ]гош а пш1ПР1е с1ошпд я(е !иго тчЬ]сЬ аес]иепсее епсосдид (Ье ореп геасдпд )таше оГ а (агдес депе аге еая1у ]пает(ей Ап(огедп]а(игу (ТА ехргея яоп и г]Нчеп угори йе р!аяп]с] РТе(НТА1с (Р]доге 17-9В), ]и иЬ]сЬ йе (ТА ореп геагПпд ]саше (гпс!пгдпд ап оргппа1 аес]иепсе (ог шгдаПоп оуггапа!агюп ассогсдпд го Кока]с ]1984]) Ьаа Ьееп ]паеггес] гп(о РТеидр!ке. ТЬе (оПочч]пд ргососо1 ь сПч]с]ег] ]п(о йгее згадея яаЫе ггапауесг]оп о! 6ЬгоЫаага ич(Ь РТег-(ТА1с, а(аЫе (гапхуес(юп оупн]ис]Ъ|е (ТА-ехргекяпд Х1Н-ЗТЗ се!Ь, апс1 апа1уяа о1 (Ье рго(егп ехргекяоп ]и ггапауес(ес] се1Ьс 5(аЫу (гаиаГесгес] сеП 1]пеа ехргеяяпд ггапяасггчагог апс] гаг- Аи(огедо)а)огу ехргегьюп о( (ТА ь ассотрдаЬег) )п рТешТа1г Ьу р)ас)пд (Ье (ТАЕ депе ипг]ег (Ье соп(го) о( ге(Р сопя ягпд о( вечер (апдегп)у аггапдег) сор!ее о( йе ге( орега(ог еег]персе [(Тег-ор),] иреггеагп о( йе гпгпггпа) ЬСМЧ ргогпо(ег гед)оп игЫсЬ соп(а!пе а ТАТА Ьох апг( (гапеспрдопа] а(агг я(е.
Ехргееяоп о( (Ье (агде( депе 'ь а]ео соп(го)!ег) Ьу (е(Р. ТЬе (ТА рго(егп 'ь едои п ае ичо аг])о)п)пд еИраее йа) гергеаеп((Ье )ию г]огра)пе о(йе рго(егп (Тог 0й)А Ыпг]!пд апг] ггапяас()ча)!оп). (А) )п йе ргееепсе о((еггасусдпе (ТеО, (Ье Ьаеа1 асдч)(у о( )Ье пппппа) ЬСМТг ргопю(ег геаоИе )п чеку 1очч )ечед о) йе (ТА рго(е)п, апг] апу (ТА рго(е)п ргог]осег) ь ЫосЕег) (гоги Ыпс))пд (о Те(-ор. Во(Ь (агдег депе апг] (ТА ехргегьюп аге (Ьегетоге гпа)п(а)пег] а) ]ои !ече)я (8) ИгЬеп (е(гасус(гпе 'ь гегпочег], йе егпа13 агпооп(е о( (ТА ргеееп( Ьгпг] Те(-ор, адпго)адпд ехргеаяоп о( (Ье )ТА депе, Н)дЬег!ече)е о( йе (ТА рго(е)п почч а(!гпи]а(е ЫдЬег )ече)е о( (ТА апг] )Ьоя (агде( депе ехргегь)оп. (Мог]1()ег], ип!(Ь реппьеюп, (гого 5ЬосЕе(( е) а).
1995 (©Ь)агюпа! Асаг1ету о(5с(епсея Т).5.А.].) 1758 С)гар(ег 17: Апа1уж 0Е Сепе Ехргеягап и Си!(игег( Митта!гап Се(!1 = > — — О О яв а о 0а Тег р 9940 ~01гоп апб Р01у(А) в9па1 и ~пгегдеп~о ге9юп Гег ргогоогаг 1ТАИ и ~пгегд гедюп 9940 ~01гоп апб ро1у(А) вдпа1 Е!а,а)КЕ 17-9 Те(-ге о1а(ег3 Ехргеаа)оп чес(огь Тччо р!аяп(г(а аге оаег( Го с)опе йе гагцег депе апг( р1асе и опг(ег соп1го) о( ап (пг(ос(Ые ргопаогег.
ТЬе гъчо чесгога аге со1гапд(есгег) 1п(о гпапппаПап сеПя апг( ехргедаюп о( (Ье гагПе( Пепе 19 сопггоПег( Ьу а!(ег!па йе апуоопг о( (еггасус3)пе )п йе со)гоге грег((огп. (А) ТЬе гагдег депе 19 с)опег( )иго (Ье п10(Пр(е с!оп(пП яге (А4С5) о( р(аяп(П рТеп5р()се. 109 ехргеаа|оп 39 сопггоПег) Ьу йе Те1 ргогпо1ег аег)попсе. Ргорег ргосеяппц о((Ье (гапаспрг (п гпапугпаПап сеПа 39 (асП)гагег( Ьу (Ье ргеаепсе о( йе 5Ч40 1пггоп апг( ро)уаг(епу)агюп а)апа!. (В) рТег-(ТА31 СОП(а(па йе депе (ог йе ге(гасусПпе ггапяаспча(ог ПТА) опг(ег (Ье соп(го) о( йе геггасусПпе орегагог (Те(О) апг( йе Ьааа) сугогпеца!оч(год ргогпогег, (А40433()ег(, учПЬ репп)аа!оп, (гога Ие ТесЬпо)оа(ея )пс.) це( Пепе(д) аге гаег1чегг ш (гчо дгацея 1п 5(аПе 1, ипггапдЕогшег) се1!д аге со(гапдЕесгед ач(ГЬ РТе(- (ТА11 апг( а р1аяп(41 епсойпа а де!есгаЫе шаг)сег. ЯгаЫе ггапдЕогшапгд ехЬ(Ь(г(пП шг(пс(Ые сТА ехргедяоп аге ье!ес(ед.
![](https://s.studizba.com/z.php?f=/templates/si/i/noavatar.png&w=100&h=100&t=1"){kind=avatar}
