Sambrook, Russell - Molecular cloning. Laboratory manual - v.3 (522944), страница 53
Текст из файла (страница 53)
Рго1осо! 8 нгм твтлвг(внто чч(тн оыстнсг лно ыю чч(тн слкт, геггасусИпе-геаропяче ехргеядоп ауагешь ойег ап е1ецапс гпе(Ьос1 го ша(пга!п согиго! очег (Ье ехргеамоп ОГ цепеа сгапагессед (пго еиЬагуодс сеця ТЬе ауагеша йасиааед Ье!очг Ьаче ечо1чед очес (Ье уеага аидЬаче Ьееп иаед хиссеаагиИу го сопгго1 репе ехргеаяоп ш а ччЫе чапе(у ог" огцашяпя 1пс1ийпц си1(игед шашптацап, аптрЬИЪ!ап, апс1 р!апг сеца (тог геч!ечч, р1еаае аее Егеипд1геЬ ег а1. 1997), апд Бассвггготусег сегечВЫе (Сап' ег а1. 1997; Вецг ег а1. 1998); гп ггапкцеп)с огцап(аша (Ьаг гис1иде 33гогорЬ()а те!апоцаггег (Сиагд ег а1.
1998), р1апга (Ч'ешшапп ег а1. 1994; ХеЫ1ег ег а1. 1996), апс1 шапииаЬ (Еиг(Ь ег а1. 1994; Е!таг ег а1. 1995; Ежа!д ег а1. 1996; К(а(пег ег а1. 1996; Верги ег а1. 1999), апс1 шаиипаИап г(ахиеа шго тчЬ!сЬ цепей Ьаче Ъееп с1Ьесс!у (п)есгес1 (р(аЬшап ес а1. 1994; РЬагчап ег а1. 1995). Рог гиг(Ьег цепега1 ш(отша((оп ои ауагепь (ог (идис)Ые ехргеаяоп, р!еаае атее, гог ехашр1е, Коаг (1997), цаех ег а!. (1997), 5Ьос1сеп апд цсЬагк (1997), апд Воаа) апд В!аи (1998). ТЕТгсАОгС Е1 М Е ТЬе Вгьг ог" (Ье сеггасус! шеа — сЫоггесгасусИпе — тчаа йьсочегед (и 1948 аа а пагш аИу оссигппц апг(Ь(ог(с (Ьа( гчаь ьупВЬеягед Ъу 5ггерготусег аигео)ис(ет апд тчаа аспче ацашаг а тчЫе гапце ог Сгаш-роядче апс1 -пецати е Ьасгепа апс1 ргогохоа.
Ву 1980, -1000 геггасусИпе дег(чаИчеь Ьад Ьееп Во!асед апйог асуп(Ьеа!гед, апд (Ье еяииасед 81оЬа1 ргодисдоп оу(Ье дгица гчах в Нас Сна ОН з., >н., >н нас сна НО~ СН3 он нн, сон о но о о нн, с. он о но о о Мдг~ г!С1)!1Е т 7-6 Ягис1иге от те1гасусцпе апд 0охусусцпе тне сагЬои а(опт !и гце ге(гасус!(пе а(се!егоп саггу аиЬьг!(и(е цгоорь (и чаг!ооа ге(гасус!!пе деичаггчея СЬет(са! Ьопда (со!огед аггогчвеада) арреаг аЬоче гце р!апе от гце Вциге; Ыйс Ьопда Уагвед 1гоег! арреаг Ье!ои гце р!аие о( (Ье Вциге. (4) те(гасус!(ие-М82~; (В) дохусус!(ие.
17.52 Те1гасус!~пе аь Кеды!аког ог! пдис~Ые Сепе Ехргеююп ~и Магпгпа!~ап СеВ Ргогосо! 8: Теггасус!те ак Кечи1агог оГ1иг!ис)Г|!е Сеие Ехргея|он т Матти!!ап Се!!к 1753 |и ехсекк оГ 500 п|е|гк |опк !Гог ге|Нем, р1еаке кее СЬорга е| а1. 1992). АП оГ |Ьеке соп|роипйк кЬаге ап Ыепйса1 Гоиг-пп8 сагЬосус!к к!|е1есоп йа| киррог|к а чапе|у оЕ роирк а| сагЬопк 5, 6, апг) 7 апг! Ъ)пг)к Мйп |Ьгои8Ь охуйеп а|опь айасЬе|! |о сагЪопк 11 апг) 12 (Бр|ге 17-6). Еп|гу оГ |есгасус1ше )псо Ъас|епа1 се11к гоно!нек ракяне сййияоп асгокк йе ои|ег п|ешЬгапе |ЬгоиПЬ ропп сЬаппе!к, кчййсЬ аге сошроке|1 оЕ |Ье О|прр рго|е)п. Ноччечег, оп|наг|) шонеп|епс йогп |Ье репр1акп|Ы красе |п|о йе су|ор1аяп г)оек по| арреаг |о !пно!че а крес|йс рго|е|п сЬаппе1.
1пяеай |есгасусйпе сгоккек йе су|ор1аяпк гпешЪгапе Ъу Гасй)гагег) г!|ТГик!оп |и а ргосекк г!пчеп Ьу рН ог е1ессгоро|епйа! 8га|Е!епгк. Те|гасус1ше шЬ|Ьйк Ьас|епа! Вгонч|Ь Ьу Ь!пг)!п8 |о пЬою|пек (К, -10" м '] ап|1 сйкгирйп8 сог)оп-апг)сог)оп ш|егас|юпк (Гог геч|енчк, р1еаке кее Тппоп 1977; Оа1е е| а1. 1981; СЬорга 1985; СЬорга е| а1. 1992). 5рес)йсайу, |е|гасус1ше ргечепь аиасЬшеп| оЕ аш!поасу1-гй)н)А |о |Ье ассер|ог я|е оп |Ье 305 пЪоюгпа1 юЬипй. Те|гасусйпе Ъ!п|)к ПВЬйу, а1Ъей гечегяЫу, |о а яп8!е я|е оп |Ье 305 юЪипй йа| ь сошрокег) оЕ геяииек йогп а| 1еак| Еош рго|е|пк Г53, 57, 514, ап|1 519) ап|1 гея|1иек Егогп |Ье 893 — 1054 героп оЕ 165 гй)4А.
ТЬе сЬ~еЕ п|есЬапйп| Ьу |чЬкЬ Е. сой Ьесо|пек геяяап| со Ь18Ь сопсеп|гайопк оЕ |е|гасусйпе |и| о1нек пш!|ипепс ап||рог|ег ргосе|пк, 1|поъчп ак Те| рго|е|пк, |Ьа| аге ешЬегЫег! |и йе Ьас|епа! шпег п|е|пЬгапе апй, ш ехсЬап8е Еог а рго|оп, сага!ухе йе оигъчаг|Е |гапкрог| оЕ |е|гасус!ше-М8|+ соп|р!ехек Его|п |Ье су|ою1 (ЕгапИш 1967; МсМиггу е| а1. 1980; Капе)со е| а!. 1985; Нк)опап апг! Еечу 1988; гаша8исЬ! е| а1. 1990; ТЬапакя е| а1.
1995). ОГ йе кечега1 )спо|чп с1аккек оГ Те| апйрог|егк, |Ье Те|А ргосешк епсог!ег! Ьу |гапкрокоп Тп10 апг! йе р! акгпЫ р ВЕЗ 22 аге йе пюк| ш|рогсапс ш гпо!еси!аг с1ошп8; 399 апипо асЫк |п 1епйй !ВасЬпап апг! Воуег 1983), |Ьеу сопык| оГ г|чо г!оша!пк, еасЬ соп|а|п|п8 ях ггапяпе|пЬгапе керпепь. ТЬе г|чо г)оша)пк аге соппесгес! Ьу а су|ор1акпис 1оор оЕ 30 — 40 апипо асЫк гкЬ !п рояйче!у сЬаг8ег! геяоиек (Еог геч)е|ч, р1еаке кее СЬорга е| а1. 1992). ЪНЬеп Те|А ь ргекепс 1п Ь18Ь сопсеп|гайопк, са|юпк аге ггапкроггес) Ггогп йе Ьассепа1 сей ас ысЬ а гаге йа| йе шешЬгапе Ъесошек с!еро!апхе|Е ап|Е йе н)аЪП)су оЕ йе сей ь |Ьгеагепе|Е ГЕс)гегг ап|1 Вес1| 1989).
То ргечеп| са|ак|юрЬе, ехргеккюп оГ ТесА ь щЬ11у сопсгойе|1 Ъу а Ьейх|игп-Ьейх гергекког рго|еш (Тегй, 24 ИЭ), |Ье ргог!исг оГ |Ье гегам 8епе. 1п |Ье аЬкепсе оЕ апйЬ~- о|к, Ьоп|огй|пегк оГ йе гергекког Ъ)пй 118Ьг1у (Кд — — 10 " м) |о йе ша!ог Пгоочек оЕ ||но 15-Ър райпдгопис орега|ог кег)иепсек !ге|01,2), |Ьик ргечепйп8 ехргекяоп оГ |Ье ейчегйепйу |гапкспЪес! Пепек геИ ап|1 ге!А (НП!еп ес а!. 1984; Неиег апг! Н)Пеп 1988; К1е!пксЬпи|й е| а1. 1988; Н|Пеп апг! Вегепк 1994; НшпсЬк е| а1. 1994; Не1Ы е| а1.
1995; Ог|Ь е| а1. 2000). Тегй ыЬегеЕоге а ро|чегГи) пейа||че гейи!а|ог оГ сгапкспрйоп Ъой оГ йк ончп депе ап|Е оЕ ге|А. В|псйп8 оЕ |е|гасусйпе-М8| |о Те|В (К, = 10ч м ') )п|1исек а сопГоппайопа1 сЬапйе йа| гег)осек йе арйш|у оГ|Ье герге|ьог Еог гегО Ьу п|пе ог|1егк оЕ шайп||и|1е ЕК!ешксЬписй е| а1. 1988; 1ег!егег е| а1.
1995). ТЬе сййегепйа!к Ьепчееп Ьшейп8 сопк|апь епя|ге |Ьа| |гапкспрйоп оЕ гегрс ь кирргеккег! ш йе аЬкепсе оГ |е|гасусйпе апй шг!исег! Ъу сопсеп|га|юпк оГ |Ье г)ги8 йа| аге соо 1о|ч |о айес| рго|е)п куп|Ьеяк (р1еаке кее Б8иге 17-7). Сгук|а1 к|гис|игек аге поъч анайаЬ)е Гог Егее Тегй 1Ог|Ь е| а1.
1998), йе сошр1ехек Ьеичееп Тегй ап|1 сеггасусйпе-М8|+ (Н)ппсЬк ес а). 1994; К)к)сег е| а1. 1995), апг! йе со|пр1ехек Ъегнчееп Тегй ап(! Те|О !Браге 17-7) (Ог|Ь е| а1. 2000). ТеЕО АМ0 ТеЕК АКЕ Е)ЯЕ0 ТО СО)н!ТКОЕ ЕХРКЕБЯОМ ОЕ СЕМЕЬ ТКАМЬЕЕСТЕ0 ИЧТО ЕЕ)КАКУОТ!С СЕЕЕЬ Напоик Гоппк оГ Тегй апг! Те|О аге икег) |о гейи1а|е ехргеккюп оЕ |аг8е| 8епек ггапкЕесгег! |п|о еи)|агуогк сейк.
Весаике оГ ай йе согпропепь — гергекюг, орегасогк, апи ейес|оь — аге рго)сагуог!с |и опрп, |Ьеке кук|епь Ьане Ее|ч |Т апу я8шйсапс ейесь оп йе ехргеккюп оЕ геяс!еп| Ьок| Пепе|. 17.54 о|ар|ей 17: Апа!уг(г оГ бепе Вхргеыоп т Си!гигег[ Матти[сап Се1П р — Иергееесг -Ап (ае) ае 1 Епиапсег — — — 1) — ТАТА — --.! —..~ Те ) Орега|ог Епиапсег †-((- ТАТА Орега|сг Есбс)ЙЕ 17-7 5сЬета6с [йе гееепйай[оп оЕ а сйе геее[оп 5 ейет )п сйе гергегь[оп еуесепз, сЬе гергегьог (П) 'ь еупсйеяке|1 ипг[ег сЬе сои|го[ о| ап арргорпайе ргогпосег (Р).
ЪЛ|Ьеп |Ье е((ессог (Е), (ог ехап|р[е, сесгасусдпе ог дохусусдпе, ь аЬеепс, сйе гергеяог Ь(пг[е опе ог еечега! Есгасед[са[)у р[асег[ орегасог еег[вепсее (г[уаг[ еугпгпеспее аге [пг[(саге|[ Ьу япаП аггоъче) млйй~п а ргогпойег!епЬапсег гед[оп ар|3 )тег(егее ъч|Ь Сгапеспрйоп (п(Сабри ПЬе ТАТА Ьох апг[ йгапеспрбопа] айаг( ясе 3+1] о[ сЬе ргоп|осег аге [пг[(сайег[). (п сйе ргееепсе о( е((ессог, гергеееюп 'ь гедечед (РЕ), СйегеЬу аПоъчпд Сгапесг(рй(оп о( Сйе сопй оПег[ депе (Х).
Верги|[осей[, ъч|Ь репи)яюп, (гоп| богьеп ей а[, 1994 [ОгЕ[ееч(ег 5с(епсе].). Т]се Те$ Тгапх-ас1счайог ЬуМепт Ехргея[оп оГ депее сгапеГессег[ |иго еи[сагуос[с се[В саи Ье сои|гойей тоге еГйс|епс!у Ьу соичег6пд Тесй со а сгаиеспр6опа! ггапг-асс[часог. Рияпд Тесй йо сЬе сагЬоху-сегиипа! асЫк |[оташ оГ |Ье Ьегрее ятр1ех суре-1 (Н5'ъг-[), ъгр]б ргосе[п сгеасее а Сгапеспрбоиа1 ассиасог (|ТА) (бояеп ап|1 Ви)агг] 1992; ъгъге[пгпапп ес а1. 1994; бояеп ес а!. 1995) СЬас, |и |Ье аЬеепсе оЕ сесгасус![пе, Ь|п|Ь со сапг[ет]у аггапдег[ ге|О еег]иеисее [пеегйег[ шсо а пишта1 рготосег апг[ |ЬегеЬу [пг[исее сгапесйрбоп оЕ а доъчпесгеат сагдес депе. Ноъчечег, Похусусйпе, а ъчасег-ео!иЫе аиа]од оЕ сейгасусйпе, аЪо[[еЬее |Ье аЬ|!Пу оЕ сТА со Ь|п|1 со ге|О еег]пепсее апг[, |п а г[оее|1ереп|1епс ГаеЬюп, г[еесгоуе сйе ггапг-асс[ча6пд аЬ|1иу оЕ сЬе сЫ|пепс ргосеш апд геесгаше ехргея[ои оЕ сЬе сагдес депе.
Айег ъч[(Ьг[гаъча! оГ |Ье аис|Ьюбс, |ТА асс[часее сгапеспрсюп оГ |Ье Сагдей депе. ТЬе депе ргог[исй асспти[айее ай а Ппеаг гаСе Гог еечега! Ьоше апг[ тау [исгеаее [и сопсеисгасюи Ъу >100,000-Го[И. с ссе Тес Керге553ОП Ьу51епт 1и сй~е еуесет (ии6айу г[ееспЬес1 Ьу Сояеп апд Вщагс1 1992), сйе ип6абоп оЕ сгаиеспр6оп оГ а сагдес депе ь сои|гойе|1 Ьу сЬе Тес гергеяог, ъчЫсЬ [е еиррйег[ |и ггапг. А гесотЪ|паис ь сопеспксес1 |Ьас сои(а[па еечега[ сапдет сор[ее оЕ сЬе се|О е1етепя иресгеат оЕ сЬе сгапеспр6опа! айаг( яСе оЕ СЬе депе оГ !ийегеей апг] г]оъчиЯгеаги Егоги а иишп|а1 рготоСег.
Ехргея[оп йгот сйь рготосег саи Ъе 6дйс1у сопсгойе|1 ш еп[гагуос[с се1Ь |Ьас ехргея Тес гергеяог. !п сйе аЬееисе оЕ сесгасусйие, сйе гергеяог Ь[пг[е со сЬе сй-ас6пд е1еп|еисе апд [исегГегев ъчйЬ |п|6а6оп оГ сгаиеспрбоп Ьу К[ъ[А ро!утегаае 11 (Не[па ес а1. 1992). 1п |Ье ргееепсе оЕ сесгасусйпе, сергея[оп ь гейече|1, айоъч[ид сйе депе оГ [исегеес со Ье сгагьспЬед.
![](https://s.studizba.com/z.php?f=/templates/si/i/noavatar.png&w=100&h=100&t=1"){kind=avatar}
