Sambrook, Russell - Molecular cloning. Laboratory manual - v.2 (522942), страница 95
Текст из файла (страница 95)
!Г йе ппс1ек асЫ |п Ьапд !я пог япйк)еп(1у сопяегнег( го ргог(псе ге!|аЫе яцпа1в оп 5опгЬегп апг! погйегп Ь!огя оу Е)ЫАя апг( К)я)Ая Ггогп йе гагцег яресгея, пчо а!(егпаВне яггасец!ев сап Ъе ехр!огед. Р!гвг, йе ппс!ек асЫ сап Ье пяег! го ргоЪе ихоо" Ыогя, иЬкЬ сопгатп цепоппс 0)н)Ая !гогп а ипЫе чапе(у ог" яресгея. 1( !я ойеп йе саве йаг а цепе )во!а(ей Тготп уеаяг, (ог ехагпр!е, ип11 пог сговв-ЬуЬгЫ!хе ич(Ь (Ье Ьогпо1- оцопя цепе Ггогп, яау, Ьпгпапя. Нончечег, йе уеаяг цепс гпау нче11 сгояя-ЬуЬг|йхе ип(Ь (Ье Ьопю1- оцопя цепс !гого РтояорЫ!а ог Хепория.!п гпгп, йе целе !гогп йеяе "(пгеггпейаге ' ярес!ея гпау Ье с1ояе епопцЫп яег!иепсе го йе гпапппа1гап цепе го Ъе пяег! ав а ргоЬе |п ясгеепя оу цепоппс ог с1Э)н)А!!ЬгаПев.
5есопй ргоЬея сап яогпегппея Ье цепегагег! !п РСКя рг(тпег! Ьу яегя оу г!ецепегаге о!!цоппс!ео(Ыев (р!еаве вее СЬаргег 8, Ргогосо1 11). 1п (Ь!я саяе, йе гегпр1аге !ог (Ье РСК !я Епсгог(ис((оп 11.29 тг тз Г!СОКЕ 11-12 СМЧ-5сп! рСМЧ-5спрг 'ь а чесгог ъ(еъ(8пег) го Еас(((гаге ЫВЬ-!ече! ехргеъа(оп о( с(опег) сРХАк (и гпатгпа((ап се(рп (1 соп1а(па йе оп8(п о( гер((са1юп о( ЬасгепорЬа8е (1 (ог асуп(Ьеа(а о( ь(п8!е-ягапг(ег! РМА (и Е. со!(, 1Ье со!Е1 ог(8(п (ог гер((сагюп (и Е. со!), апг! йе 5Ч40 ог(8)п !ог гер)(саг(оп (и гпашгпа((ап сеНь апг((Ье ргогпогегь (гогп СМЧ апг( 5Н40. ТЬе гпту)1(р(е с(оп(п8 яге (МС5) ь ((апхег( Ьу ЬасгепорЬа8е 5Р6 апг( Т7 ргогпогега 1о аПоъч (и ч(гго 1гапьспрг(оп о( е(1Ьег ъггапг) о( йе (пьеггед Еоге(80 РМА. Ехргеъъюп 'ь с)пчеп Ьу 1Ье СМН (шгпег((аге еаг!у ргогпогег. ТЬе ргеьепсе о( 0418, 1Ье депе соп(егг(п8 геъ(агапсе 1о пеопъус(п апг! (ъапагпуап, ргочЫеь Еог ае!есг(оп о( ъгаЫе с(опт )и гпапъпъа)(ап се((к ъи)(Ь ехргеьяоп г!ггчеп Ьу 1Ье 5Ч40 ргопъогег (Р.
44), апг) ье)ес1(оп о( с(опеь (и Е. сой ъи1Ь ехргеъа(оп г(г(чеп Ьу 1Ье ()-!асгашаье ргогпо1ег (Р „). (Аг(аргег( ъий реггпььюп, ©1999 5(га1а8епе.) 1Ье РМА ог КМА оЕ йе гаг8ег ог ап !пгеппеЕВаге арес!ея апг( 1Ье рг(гпега аге г!ег(чег( Егопь ге8(опа оЕ 1Ье апппо асЫ аег)пепсе ъчЬоае сог(опт аге попъ)еВепегаге. ъЧЬегечег рога!Ые, йе о1гВогшс1еогЫе рг!шега кЬоп10 соггеаропг( го ге8!опа оЕ йе Вепе 1Ьаг аге 1гКе1у го Ье сопаегчег) Ьегъчееп арес!еа (е.8., асг(че а!(еа оЕ епгушеа апг1 Ь(ВЫу сопаегчег( а(гас(пса! шог!Еа). ТОТАЕ СОМА РКОВЕ5 Тога! СОМА ргоЬеа аге ргерагес1 Ъу шпЕопп (псогрогаг(оп оЕ гаг)!01аЬе1ег) пцс1ео(Ыеа ш ш чпго геасКопа сага!убег) Ьу гечегае ггапьсг!ргаае апг1 соп1агпгп8 шКМА аа гешр1агея ог Ъу епг)-1аЪе!- ш8 оЕ соса! ог Ьасйопагег) ро!у(А)+ гпКМА.
ТЬе геап11108 ргоЬеь сап Ье паег( 1о асгееп сРМА 1!Ьгаг!еа !Е йе сРМА с1опеа оЕ шгегеаг соггеаропг) го гпКМА арес!еа ргеаепг ш 1Ье !011(а! рорп1аВоп аг а Егег)пепсу оЕ аг 1еаа 1 гп 200 (р1еаае аее Сег8еп ег а1. 1979; РъчогЫп апг( ОаъчЫ 1980; Тгала ег а!, 1987). !)яп8 1ога! сРМА ргоЪея К (а пог роаяЫе го г(егесг сРМА с1опеа Ьошо108опа го арес(еа йаг аге гергеаепгег( гаге1у !и 1Ье шКМА ргерагаВоп. 513ВТКАСТЕР СОМА РКОВЕ5 50Ь(гас1ег( СОМА ргоЪеа аге оЕ(еп паег( го асгееп сРМА 1!Ьгаг(ек Еог с!опек соггеаропеВп8 го гпКМАа йаг аге с))ЕЕегепг)а!1у ге801агед (р1еаке аее Ьой 1Ье шЕоппаВоп рапе1 оп !50!АТ)МС 11.30 СЬаргег 11: Ргерагаг!оп оу" СОХА Е!Ьгаг(ег апг( бепе 1г)епгфсаг!оп (+)Т7 — Фв- (-)Т7 па! а~у(А) а япа! Г1ССЙЕ 11-13 с0ХА3.1 рсОХА3.) 'ь а чесгог г)еа!дпес( го (ас)!)1аге ЫВЬ-|ече! ехргеьа)оп о( с)опег) сОХАв )и гпашгпа!(ап се))я 11 соп(а(пь йе ог)д)п о1 гер!гса()оп о1 ЬассепорЬаде П 1ог асуп(Ьеьь о( а)пд)е-ьггапс)ес) ОХА !и Е.
со!), (Ье рМВ) (рОО ог)д)п (ог гердсагюп )и Е. со!), (Ье 5Н40 опд(п Еог гердсадоп !и гпагпгпа!)ап се)!я апг) (Ье а)дпа)а Еог ро)у(А) агЫ(1!оп (гогп 5Н40 апг) Ьояпе дгоипЬ Ьоггпопе (ВСН). ТЬе гпи!1)р!е с!оп!пд я(е (МС5) 'ь 1)ап)гег( Ьу ЬасгепорЛаде Т7 ргогпогегь Го а!!ои )и чдго 1гапасг!рг)оп о( е((Ьег аггапг) о1 (Ье )пьес(ее) 1оге)дп ОХА. Ехргеаа)оп 'ь г)г(чел Ьу 1Ье СМН ргогпогег. ТЬе С418 геяяапсе депе 'ь иаег) Го ае!ес( с!опеь о1 гпагпгпа!)ап седа ГЬаг Ьаче Ьееп ьгаЫу (гапа(оггпег) Ьу рсОХА33Ь (Ас(аргег) чий реггп!аа)оп, ©1996-1 998 1пчдгодеп.) 01ГГЕКЕХТ1АПУ ЕХРКЕВВЕ0 с0ХА5 ВУ 01ГГЕКЕХТ1АЕ 5СКЕЕХ!ХС АХ0 СЕОХ)ХС апг) Ргососо1 9 !и СЬаргег 9).
А (аЪе1ег( СОХА ргоЬе ргерагег) 1гош опе суре оЕ шКХА !а г)ер!егег( оЕ аег)иепсеа (Ьаг аге ргеьепг !и а аесопг! (уре оЕ шКХА (Т!шЬег1а)се 1980; 7ппшегшапп е1 а1. 1980; ЪЧапд апг( Вгоип 1991). Кешоча1 оЕ ипччапгег) аег)пепси (а асЫече8 Ъу ЬуЬг!йх!пд япд!е-аггапг)ег( СОХА ргерагег! Егош гпКХА ехггасгес) Егогп ГЬе 1!ааие оЕ (п(егеаг Го а 10-20-Ео18 ехсеаа оЕ ОХА ог КХА (г(г!чег) ргерагег( Егогп апо(Ьег аоигсе ГЬа( доев по( ехргеаа йе депеш оЕ !пгегеаг.
АЕ(ег ЬуЪг!г(а сопсапипд йе СОХА Ьаче Ьееп гегпочег), (Ье геяг1иа! СОХА пю1еси!еа аге иаег( го ргоЬе а СОХА 1(Ъгагу Еог с1опеа сопгашшд Ьогпо!одопа аес)иепсея Ояпд аиЬ(гасгег! СОХА ргоЬек, К !а роаа!Ые го г!есесг гаге гпКХАа (Ьаг сопя(1(иге аа !ггг!е аз 0.01% оЕ йе гога! роро!агюп оЕ шКХАа аа !опд аа (Ье аиЪ(гас(!оп яер гепючеа аг !еааг 95% оЕ йе ог!д!па!!аЬе!ед СОХА (дагдепг 1987). 5иЪггас1ег) СОХА ргоЪеа аге рагг(си1аг1у ча!иаЫе ччЬеп чегу Ееиг гИЕегепсеа ех(аг Ьегиееп йе 1и о агагг(пд гпКХА ргерагагюпя !.еп игЬеп шпаг арес!еа оЕ шКХА аге гергеаепгег! ег)иа!1у ш йе (и о ргерагагюпа апд а япаП ргороггюп (<2%) оЕ (Ье гпКХАь аге пог ргеаепс ас а11 !и опе ргерагаг(оп. сОХАа гЬаг Ьаче Ьееп с!опес1 ияпд аиЬ(гасгег( СОХА ргоЬеа !пс!иг1е (Ье ппгппе 1 Епггодисг)ои 1К31 пппшпоц1оЪиПп сЬа(п (Ма|Ьег е| а!.
1981), |Ье птдпе Т-сеП гесер|ог (Недгк1| е| а1. 1984), МуоР (Рач)з е| а1. 1987), апд а рогсше 8!исозе |гапзрог|ег ( ъъгеПег-Сюг|1ег е| а1. 1989). А зПВЬг1у сППегеп| арргоасЬ ь изед ъчЬеп гъчо ргерагадопз оЕ тКХА соп|а|п д|ТГегепг сопсеп|гадопз оЕ сег|а)п зеииепсез. Ехатр1ез оЕ зисЬ яЬ ра!гз т(ПЬг Ъе гпК!ъ)Аз ех|гас|ед Ггогп соп|го1 сеПз апд сеПз |Ьа| Ьаче Ьееп ехрозед |о Ьеа| зЬос)с, дги8з, ог Ьоггпопез.
сРХАз соггезропсПп8 |о тКХАз ъчЬозе ехргеззюп (з а1|еге|1 Ъу я|сЬ ггеа|гпепь сап зоп|едгпез Ье |1е|ессед Ьу д|ТГегепг)а! ЬуЬгЫ(хаг(оп. ЬаЬе!ед Пгз|-з|гапд сРХАз аге зуп|Ьез(хед |п |4|го ияп8 Ьо|Ь тКХАз аз |егпр!агез, Моз| оЕ |Ье сР!ъ)А зес)иепсез соггезроп|1 Со тКХАз ъчЬозе сопсеп|га|юпз аге по| арргес(аЫу сЬап8ед Ьу йе |геаг|пеп| со ъчЬ(сЬ гЬе сеПз ъчеге ехрозед. Ноъчечег, а т(погПу оЕ |Ье сРНАз илП Ъе сор|ед 6. огп гпК!ъ)Аз ъчЬозе сопсеп|га|юпз аге я8т6сап|1у (псгеазед ог десгеазед. ТЬе |ъчо сР)ъ)А ргоЪез аге йеп изед го зсгееп гер!каз оЕ а сРХА ПЬгагу сопз|гиссед !гот гпК!ъ)А ех|гас|ед Ггогп соп|го! сеПз (ъчЬеп зеагсЬ)п8 Еог тКХАз йа| аге гергеззед) ог Сгеа|- ед сеПз (ъчЬеп зеагс)дп8 Гог тК)ъ)Аз |Ьа| аге ш|1исе|1).
ТЬе с1опез йа| ЬуЬг(д(хе ргеГегеп6аПу |о опе оГ |Ье сРХА ргоЪез аге сЬозеп Еог Еигйег апа!уыз. Апюп8 |Ье тапу ехатр1ез оГ Пепез с1опед ш гЬ(з ъчау аге |Ье Па!ассозе-Епдис!Ь(е Пепез оГ уеаз| (5|. !оЬп ап|1 Рач(з 1979), Ьшпап Г|ЪгоЫаз| (п|егГегоп (Тап|8исЬ| е| а1. 1980), йе 8!исозе-ге8и!а|е|1 рго|ешз оЕ тапипаПап сеПз (Ьее е| а1. 1981), ЬогтопаПу )пдисед ргогешз (Вис)|Ъ(пдег апд Вгоъчп 1992; Ко!т апд |Пче 1995), Пгоъч|Ь-ге!асед рго|е|пз (розгег ег а!.
1982; СосЬгап е| а1. 1983; (апгег апд Ха|Ьапз 1983), д|ТГегепдагюп-зрес|6с ргосе(пз (5р!е8е1гпап е| а1. 1983), апд а чаде|у оЕ Ьеас зЬос1| рго|ешз апд з|ге|ь рго|ешз (е.8., р1еазе зее Маюп е| а1. 1986). ТЬе ргоседиге Ьаз а!зо Ъееп изед Со Ыепъ(Гу сРХА с!опез оЕ дече1ортеп|аПу ге8и!а|ед тК!ъ)Аз Ггот ог8апьпь оГ тапу д(ЕГегепг зрес|ез, Гпс!игПп8 Хепориз (14|ППапь апд Е.!оуд 1979; чъгее)сз е| а1.
1985; Яче е| а!. 1989; Ее ОиеПес е| а!. 1991; Ко!оп е| а!. 1997), Исгуозге1шгп (Коъче)сатр ап|1 р(гге! 1980; МеЬду е| а!. 1983), зеа игсЬ|пз (1.аз1|у е| а1. 1980), тке (боггпап ег а1. 1985), апд хеЬга6зЬ (5а8егз|гоп| е| а1. 1996; Сг)пЫаг е| а!. 1998). 5|Ь(ТНЕТ!С ОПСО!ъ)ъ)С).ЕОТ!РЕ РКОВЕ5 5упйедс деохуо68опис1еогЫе ргоЪез аге |гась оЕ дебпед зег)иепсе |Ьа| Ьаче Ьееп зуп|Ьеягед 1п ч(гго. ТЬе зес)иепсез оЕ йезе ргоЬез аге дедисед, ияп8 йе Пепедс соде, Егот зЬогг ге81опз оЕ |Ье Кпоъчп агпшо асЫ зеииепсе оЕ |Ье рго|е(п оЕ ш|егез|. 1п йе чаз| гпа)оН|у оЕ сазез, Ьесаизе оЕ |Ье де8епегасу оЕ |Ье Пепедс соде, |Ье зате зег!иепсе оЕ апипо асЫз сап Ье зрес|6ед Ьу гпапу сПйегеп| о68опис1ео|Ыез. ТЬеге 1з по ъчау |о 1|поъч ъч1|Ь се||а(п|у ъчЬ~сЬ оЕ |Ьезе оППопис1ео|Ыез ь астаПу изед (п йе Пепе оГ (п|егез|.
![](https://s.studizba.com/z.php?f=/templates/si/i/noavatar.png&w=100&h=100&t=1"){kind=avatar}
