Sambrook, Russell - Molecular cloning. Laboratory manual - v.2 (522942), страница 94
Текст из файла (страница 94)
чессог. Апюпд йе адчапсадеа оЕ ИВУАР аге (1) гЬе ргеаепсе оЕ ях ип(с)ие геагпс6оп ягеа чч(й|п йе ро1ус!опшд гед(оп йаг тау Ье илес) Еог г((гес6опа! с1отпд оЕ сР!ч)А то1еси!ея (2) гЬе ргея епсе оЕ рготогега Егот ЬасгепорЬадеа ТЗ апг( Т7 гЬаг Вап)с йе ро1ус!опшд гед(опа; гЬеье рготосега сап Ье иае6 го аупгЬеяге ягапйарес16с ЯМА ргоЪеа сотр1етепгагу со йе с1опег( сР!ч(А; апг( (3) йе ргеаепсе оЕ Ьаслег(орЬаде-Е1-г)ег(чес( зег)иепсеа Еог !п чгчо сопчегяоп оЕ гЬе РМА (пьегг !толп йе ЬасгепорЬаде Х чесгог го ЕЬе В!иеьспрг р1аяпЫ, ъчЬоье аес)иепсеа аге сопла(пег( ъч(гЫп ХУАР.
Ехс(аюп !а Еас(16агед Ьу роягюпшд ЬасгегюрЬаде Е! лег)иепсеа ГЬал епсол)е ядпа1ь Еог шг6алюп ап6 Еог Геппшалюп оЕ япд1е-алгапг(ег) Р)ч(А ьупгЬеяа оп елйег аЫе оЕ йе ро1ус!оп)пд яге (Рог!о ег а!. 1984). 33гЬеп р' се1!ь (пЕесгес1 лч(гЬ ).УАР аге яирег(пЕесгел3 ъч(гЬ а Ел1атепгоиа Ье1рег ЬасгепорЬаде (е.д., Е1 К408 (Киаае1 ег а1.
!98б]), гЬе депе 11 ргос1исс аупгЬеяхег( Ьу йе аирег(пЕесг!пд рЬаде пк)сз опе оЕ гЬе пчо ьггапл)а оЕ ).УАР Р!ч)А аг гЬе лт6а6оп алле. дупгЬеяа оЕ япд!е-аггапл(ег) РЬ)А ргосеел(а йгоидЬ йе ро1ус1опшд яге (апл) апу сР)чА аел)иепсеа шаеггел( (псо (г) апл3 гегпипагеа аг ЕЬе г(оччпяггеат гегпипабоп яге. Боте оЕ йе япд1е-аггапг(ег( ргодепу РЬ(А пю!еси1еа с(гси1аггхе апд Ьесогпе рас)садег( шсо 61агпепсоиа ч!гиа рагг!с!еа гЬаг аге ьесгегег) Егогп йе се!1.
Ъй~еп Г Ъасгепа аге 1пЕессе6 чч(гЬ гЬеае раггк!ея гЬе лпсопипд япд1е-аггапг(ес( РМА (а сопчеггег( (пго а 6оиЫе-аггапл(ег( то1еси!е йаг сагпеа а со1(с(п Е! (со1Е1) ог(д(п, ехргеяеь !3- 1асгатаае, апс( гер!кагеа аа а сопчепбопа1 р!аяпЫ, ччЬкЬ сап Ъе атр11Елег( апг( рипде6 Ьу сопчеп6опа! гпегЬосЬ (р1еаье атее СЬаргег 1). Весаиве гЬе р1аяпЫ сагпеа а Еипсгюпа) ог(д!и оЕ ЪассегюрЬаде Е1 гер!кабоп, се1!а аирег(пЕесгег! чч(гЬ а аи!гаЫе Ье1рег Ьасгег(орЬаде у(е16 ргодепу раггк!еь йаг саггу а!пд!е-аггапл(ел( сор(еа оЕ йе РЬ)А!улпд Ьегъчееп йе лпВла6оп апг( гегт(па6оп ягеа (п йе ЪасгепорЬаде Х депоте.
° ).УАР11 !а ег)и(ча1епг го ) УАР ехсерг йас а Яат100 пшгагюп Ьаа Ьееп геточед. Кеточа! оЕ йе 5ат)00 пшла6оп а1!олча Ъеллег дгоччГЬ оЕ ЬаслепорЬаде Х, ччЬ~сЬ, лп Гигп, саиаеа ГЬе р1ал)иеа Со гигп Ыие пшсЬ аоопег лп г!ле ргеаепсе оЕ !РТА ((аоргору1-/3-Ел-гЬюда1асгоругапояс1е) апг( Х- да1 (5-Ьгото-4-сЫого-3-1пл)о1е-(3-Зл-да!аслоте). А плар оЕ ).УАР11 га ргеаепле6 ш Р(доге 11-7. ° ).УАР Ехргелл 1а япп1аг со огЬег тетЬега оЕ гЬь аепеа оЕ чесгога ехсерг гЬаг йе ехс!аел( р1ая тЫ сагпеа сопгго1 е1етепга Еог ехргеааюп оЕ йе с1опел( сРМА (п еи)гагуог(с се!1а (р1еаье аее р(диге 11-8). ТЬеае е!етепга (пс!ил)е йе роччег(и! нпте6(аге еаг!у гед(оп ргопюгег оЕ йе Ьшпап сулотеда1оч(гиа роя!!опел3 иралгеат оЕ йе пш16р1е с1отпд яле апг) ап Я'лг40 Сегпп'- палюп лег)иепсе 1осагег( 6олчпалгеагп Егот йе сР)ч)А шаегл.
Ехс(яоп оЕ йе ехргеааюп р1ая гпЫ Егот ИВУАР Ехргеаа спел(!асес( Ъу аиреппЕесбоп лч(гЬ а 61агпепгоиа Ье1рег ЬасгепорЬаде, ТЬе ехс(лес( р!аатЫ сагпеа зециепсеа пеег)ел3 (1) Еог ггапьспр6оп оЕ йе сР)чА ш Е. !ОГ Ос(исс(оп 11.23 ТЗ МСВ Т7 С05 СО5 сопьгис1 0ГСА ИЬгагу апи Ьо|в1е роядне с|опев ТЗ Т7 — 33!в- 0ГСА !пвеП фай†СО5 СО5 ехсье йе РВ!иевопр1 ровде!п!б сопса!и!пд Фе с|опеи 0г(А !пвео Ьу со~о(ес!!Оп нг!1Ь а Магпеп1оив Ье|рег Ровде 1епп!пв1ог 0ГСА !пвег1 Е|СЕ|ЙЕ 11-7 ХУАР|1 ХУАРИ !в сопв(гис(ес( (гого а (гадгпепс с|ег(чед (гого (Ье (ей аггп о( Ьас(епорЬаде Х саггу|пд Х депев Апд а (гадгпеп( с(ег!чес( Ьсхп (Ье пд61 апп о( !.
саггу!пд с10857; (Ье депе епсойпд(Ье (его рега(иге-вепв!1!не гергеввог; апс3 рВ(иевспр1 5(С рЬадегпсй ТЬе гпи|6р|е с|оп|пд 51(е (МС53 сагпес| сч(1Ь|п !Ье рЬадегп!с( вес(персе ь 31ап(сес( Ьу 1гапвспр1юп |пуда(юп 5|1ев (ог Ьас(епорЬадев ТЗ апс3 Т7. ТЬе чес(ог сагпев 1Ье опд(пв о( гердса(юп (гого (1 апс( со|Е1 апс( (Ье депе соп(егппд агпр!С|И|п гев(5(арсе.
(пс(!ч|с(иа( Ьас(епорЬаде Х с|опев ог ап агпр66ес| ИЬгагу сап Ье ивес| (о сп(ес( Е. сод 1Ьа( аге со(пТес(ес( ил(Ь 6|агпеп(ось Ье|рег рЬадев. (пв|с$е |Ье сеИ, сгапв-асдпд рго1е|пв епсос(ес( Ьу (Ье Ье|рег рЬаде гесодйке (п(да1ог (1! алс| (егпппасог (Т| догпа|пв сч(1Ь|п (Ье ХУАРИ чес1ог аггпв. Во(Ь 5(дпа(5 агЕ ГЕСОдо|хес( Ьу 1Ье Ье1рег рЬаде депе П рго(е!и апс| а певуч С|Ь(А 5(гапс( св вуп1Ьев|кес(, дьр|аопд(Ье ехьдпд 5(гапс|. ТЬе йвр!асес( 51гапс( 'ь с(гси(аг|тес( апс( рас(гадес( ав а 6|агпеп1оив рЬаде Ьу Ье|рег рЬаде рго(е|пв апс( весге(ес( Тгогп |Ье сеИ. С!гси|аг с(оиЬ|е-5(гапс(ес( рВ|иевспр( рЬадегп|с(5 аге депегасес( Ьу !п(есдпд ап Е 5(га!и о( Е.
сод сч!1Ь 1Ье рори|адоп о( гесонегес( (3(агпеп1оив Ьас(епорЬадев апс( дгоиг|пд впсад-вса|е си|1игев о(|п(ессес( седв |п гпейа соп1а|п!пд агпр|с|И|п. ТЬе с|овес| с|гси|аг рЬадегп|с$(ЗМА 'ь (Ьеп !во!а(ес( Ьу 51апс(агс( гпе1Ьос(5 (р|еаве вее СЬар1ег 1). (Ас(ар1ес( нн((Ь регги!55|оп, !01999 51га(адепе.| 11.24 Сйаргет ) ): Ргерагаг(оп ОЕ СОХА й(Ьгаг(еь апс) Сепе 1йепгфсаг(оп ТЗ МСВ т7 СОВ СОВ | сопв1гис1 с)г)А (~ьгвгу впб Ьо)в1е ровамв с)опвв ТЗ Т7 — фв ВЬ)А )пввп «~ —— СОВ СОВ вхс~ве РВК-СМН рпадвпвб соп1в)п)пд 1пе с1опеб ОНА )пвеб Ьу со)п(ессюп а)КЬ а гьвпсеп1оив Ье)рвг ровде свгпс(пвсог ВЬ(А ~пввб Е(С()КЕ 11-В )САР Ехргеьь )2АР Ехргегь 'ь сопь1гис1ес1 стого а Вад пепс бегмес1 (гогп 1Ье 1е(с апп о1 ЬассепорЬаде а и ЫсЬ сагпеь х депеь А — /; а (гадгпеп1 с(епнеб (гогп 1Ье г!ВЫ аггп о( Х саггу!пд с1Ь857; (Ье депе епсосйпд 1Ье (егпрегасиге-ьепь!1)че гергеььог; апб рВК-СММ р!аьгпЫ.
ТЬе гпи!Вр!е с!оп)пд ь!(е (МС5) сагпеб ив(1Ып (Ье р!аьгп)б ьес(иепсе ь Яап1сес3 Ьу 1гапьспр1юп (пгда(юп я1еь (ог ЬассепорЬадеь ТЗ апс( Т7. ТЬе чес(ог сагпеь 1Ье опд)пь о( гердсадоп (гого (1, со(Е1, апб 5ч40; сде СМН апс1 (ась ргогпо1егь; алб 1Ье депе (ог пеогпус!п геь!ьсапсе, 1лсдчйиа! Ьас(епорЬаде ). с)опеь ог ап апсрдйеб НЬгагу сап Ье иьеб (о !п(есг Е.
сой седь 1Ьа1 аге со!п(ес(ес( ив((Ь В!агпеп1оиь Ье)рег рЬаде. (пьйе (Ье сеН, сгапь-асдпд ргосе(пь епсобеб Ьу Ье)рег рЬаде гесодпме (п!1!а(ог (1) апс) сеггмпа1ог (Т) с(оспа)пь ъи1Ып (Ье ) УАР Ехргегь нес(ог аггпь. Во(Ь ь(дпа(ь аге гесодп(геб Ьу 1Ье Ье(рег рЬаде депе Н рго1е(п апб а пенн 0ЫА ь(гапб ь ьуп(Ьеь(гес1, бьр1ас!пд (Ье ехьбпд ь1гапб. ТЬе б)ьр(асеб ьсгапб 'ь с(гси(апгеб апб рас(садеб аь а 61агпепсоиь рЬаде Ьу (Ье Ье!рег рЬаде рго1е)пь апб ьесге1еб (гогп (Ье сеН. С)гсЫаг боиЫе-ьсгапбеб рВК рЬадегп!бь аге депегасеб Ьу )п(есс)пд ап Е' ьсга)п о( Е.
сой и ЬЬ (Ье роро(асюп о( гесочегеб (!(апсепсоиь Ьас(епорЬадеь апб дгои!пд ьгпад-ьса(е си!(игеь о((Ье !п(ес(еб сеНь (п гпеб(а соп1а(п(пд Еапагпус(п. ТЬе с(гси(аг рЬадегпсб Е)ЫА ь (Ьеп 'ьо!а(ес( Ьу ьсапс)агб гпе(Ьобь (р(еаье ьее СЬарсег 1). (Абарсеб ил(Ь реггпььюп, ©1999 5(гасадепе.) !О!рог!ОС!гоп 11.27 А Лд)10 )еН А — 4 Л г)до! Есоп! ! очп 34С! СО5 к г ' гечегае гопчаго ' г .к .к .к кроа ра ° р.. р! еша касмапскасстаьтгма à — т ситтакасматтскасстааттматссмастампсттттасттттт ссстаамакмткстсктмассксстст та*акссттсотктакаткттс кросс е! рка СО5 Л )е)Г А — 0 ! Л с!55857 8100 г)ди! ! В ЛдП1 Есой! СО5 СО5 гечегсе )опчагО ' кргт~ рар ге кр! е аг аатаасакськстсстаакассса аатаасаксакстсстаакасссатскатктсаасаамттсскастакасассаатсаст сскпкссяапаатстаататсна аамаатсм сскькссрскатг гра1р ар ге ! Е1С$/йЕ 11-10 ЛВ110 апг) Л5111 (Аг)аргег) млГЬ регтьагоп, ©1999 91гагацепе.) НОМОЕОСО!!$ РКОВЕЯ ТЬеае ргоЪе5 соп1аш аг 1еааг рагс оЕ1Ье ехасг пис1ек асЫ еег)пепсе оЕ йе с)еыгег) сРХА с1опе.
ТЬеу аге иаег) 1и а чапе!у оЕсггсшпагаисеа, Еог ехагпр1е, тчЬеп а рагг)а! с!опе оЕап ех!51!ОВ сРХА !5 пьет) го !5О1а)е а Еп!1-1епВГЬ с1опе Его!и а сРХА 1гЪгагу. агапа!1у, а ЕгаВшепг с!ег!чес! !гоги опе епс1 ог йе ойег оЕ йе ех!51)иВ с1опе ге гео1агей гайо!аЬе!ес! !и ч!гго, апг) пает! го ргоЪе а 1гЬгагу. НуЪпйгадоп тчЬЬ Ьопто1одопе ргоЬе5 !5 а1тчау5 сагпес1 опг цпс1ег 51ппВепг сопйВоп5. АЕис(ек АсгсЕ НуЬпгЕЕеабоп ТЬь !5 гЬе гпоег соиппоп1у пьес! апт1 ге11аЫе шегЬог1 оЕ 5сгееи)пВ сРХА 1гЬгапеа Еог с1опе5 оЕ шгегеег. Хопе оЕ йе ойег шегЬог)5 йьр1ау 5псЬ ап аЪипс)апсе оЕ а!!гас!!че Ееашгее.
Ясгееп)ОВ Ьу ппс)ек асЫ ЬуЬпйгаг!Оп аПогча ехггете1у 1агВе пшпЪега оЕ с!опеа го Ье апа1угег) ыпш1гапеои51у апс1 гарЫ1у, г!Оеь пог гег)п!ге гЬаг 1Ье сРХА с1опеа Ье Еи!1-1епВ)Ь (поге, Ьотчечег, гЬаг 1011-1епВ)Ь с!опе5 аге ге!!шгег1 !Е йе ргоЬе ЬуЬпйгеа го а геВ!Оп пеаг 1Ье 5' епс! оЕ1Ье СОХА), апс! г)ое5 по! ге!)шге гЬаг ап аппдепка!!у ог Ъ!01ОВ!Са!1у асг)че ргогЬлсг Ье аупгЬе5!ген !и гЬе Ьоаг се11. Гпг)Ьеггиоге, а5 а гееп11 оЕ гпоге йап 30 уеага оЕ ччог)с, 1Ье 1Ьеогег!Са! Ьаые оЕ пис1ек асЫ ЬуЬпйгаг)оп ге тче!1 ипс)егьгоос!. ТЬг5 Ьаь!Сг) го гЬе г)ече!Оршепг оЕ а!агре пшпЬег оЕ ЙЕЕегепг ГесЬп)с)пе5 йаГ сап ассопппог)аге ппс1ек асЫ ргоЪее оЕ чегу ЖЕЕегепГ 1епВГЬ5 апг) ерес!Егс)Г!е5.
11.28 СЬартет 1!т Ртератаппп о) сЕ)1я(А й|Ьтаг(ея апг( бепе депп!)сит|оп гас) ргоюо|ет Е!СОКЕ 11-1! р5РОЙТ) ТЬе р|авгпЫ р5РОКТ) 'ь а гпо!Г!(опс()опа! ехргевя(оп нес(ог ГЬа( |в пвег) !ог СОХА с)оп)пц, !и ч((го Ггапяспрцоп, апг) сопвгтосцоп о( впЬ(гас(!че ПЬгагу ргосег|огев. 1г сорта)пв йе ог!ц!и о( герцсагюп Його (Ье р()С вепея о! несгогя (оп), (Ье П-|асгагпаяе цепе соп(егг)пц апгр)сццп гев|вгапсе (Агпр"), апс| йе ЬасгегюрЬаце () )п(егцеп!с гец(оп (ог вуп(Ьеяя о( я!пц)е-в(гапг)ес( ОгяА |и Е. соl|. ТЬе рю|МР|е с!оп)пц в((е (МС5) иг((Ь|п (Ье йе и-рерПс|е гец!оп о( (Ье УасЛ цепе 'ь (!ап(сед Ьу ЬасгепорЬаце 5Р6 апг) Т7 ргоюогегв со аПои |и и(то (гапяспргюп о! еПЬег вггапс| о( (Ье )пвеггег) (оге!цп О!'(А.
(Ас|аргег| чи(Ь регпг)яяюп, (того ).1(е ТесЬпо!оц)ея, 1пс.) РЙОВЕ5 ЕОЙ 5!М!ЕАЙ ВОТ НОТ !ОЕ)н)Т!САЕ 5ЕЯ!)Е)ЧСЕ5 РгоЬея оу йь гуре аге пяег) го г1есесг сВЫА с1опея (Ьаг аге ге!асег1, Ьпг пот Ыепцса1, го йе ргоЬе яег)пепсея, Гог ехагпр1е, (Ье яагпе репе с1опег! Гготп апо(Ьег ярес!ея ог а ге1агег! цепе с!опес1 Ггогп (Ье яагпе ярес|ея. 1п япсЬ савев, Ь гя игог(ЬячЬ|!е го саггу опг а яепея оГ (Па1 ехрепгпепгв го г1егегпппе и Ьейег йеге гя впу(1с!епг сопвегчаг!оп оГ ппс1е!с асЫ вег)пепсе го а!1онч (Ье ясгееп!пц отап арргорпасе сТ))н)А!|Ъгагу Ьу ЬуЪгЫ!хаг!оп, ТЬь тая!с !я гпояг еая!1у ассогпр1(яЬег) Ъу регуогтп!пц а яеПея ог 5опгЬегп апг) пот(Ьегп ЬуЬг|йхагюпя аг г!|йегепг вгг!пцепс!ея. ТЬе апп В го еягаы!яЬ сопг!!г!опя (Ьаг яч!11 а1!онт йе ргеч!опя!у с!опег! репе го Ье пяег( ая а ргоЬе Еог йе сЕ)ЫА оу |пгегевг, ип(Ьопг ппг(пе шгегуегепсе Егогп Ьас)сцгоппг) ЬуЬг|йхаг!оп.
![](https://s.studizba.com/z.php?f=/templates/si/i/noavatar.png&w=100&h=100&t=1"){kind=avatar}
