Sambrook, Russell - Molecular cloning. Laboratory manual - v.1 (522940), страница 173
Текст из файла (страница 173)
ЕыуЕпе5 апд В$70ее5 Вассег(орИаее Т4 ро!упис!еоС!г)е Ыпахе ЕГ!епоиг Егаетепс оЕ Е. со!1 Р)|ЕА ро!утегахе Г70 ил|15)р!) !Час!еахе 57 Пог ихе иа пис!еаае 57 с()аеас!ол ЬиПег р!еахе хее Ье!очч) 1с Ь пасса|агу со 6сгасе йе пис!гасе 51 еасЬ 6п|е а пе|ч ргоЬе ог В)4А ргерагапоп ь и|ей А)ис!еахе 57 сЕ!аеас!ол ЬиПег 0.28 М НаС1 0.05 М юбшш асс|а|с (РН 4.5) 4.5 шм Еп504'7Н О йоге а!$|(посс оЕ лис!еаае 51 ЪиКег ас — 20'С ап6 а|Ы пис1еаае 51 со а сопсепсгасюп оЕ 500 ип!са(ш1 )иас Ье(оге иае. кехгг(сс(оп епг(апис!еахех СЕ!5 ТАВЕЕ 7ч6 Регсепсаее оЕ Се1 Еог Риг!Еу!пе Чаг!оиа РЬ(А Ргаегпеп18 /а РОЕУАскчсАМ|Ое)$)аеА Се|.
5|хе Ое ВА|чо (п1) >250 60-250 40-120 20 — 60 10-50 6 8 10 12 Репа!ос(пе ро!уасгу)ат(г)е ее! солса(л(пВ 8 м игеа <1> Рог шоас 5'- ап6 3'-еп6 шарр|п8 ехрегипепь, а депасиг(п8 Ве( сопсроае6 оЕ 5ч ог 6|ус ро)уасгу!ашЫе ап6 сопсаш|п8 8 м игеа шее!у ге|о!чеа ргосессе|$ РХА Ега8шепск А сурка) Ве) ь 1.5 пип йк1|. Носчечег, "й|п" ог "сес)кепс!п8" Ве1а (0.4-пип сЬсс1|пея) сап аЬо Ъе |ьед (р1еаае аее СЬарсег $2). 1Е й|п 8е1| аге иае|$ со геао1че ргосессе|$ РХА Ега8шепса, Ь Ь иаиа1(у пос песеяагу со Вх йе Ве! |и слсЫогоасе6с аск$ (ТСА), а| 6еасг!Ъед |п 5сера 30 — 32, Ье(оге 6гу(п8 йе Ве(.
РЬ6п8 аЬагрепа ап6 (псгеааес сЬе гека)исюп оЕ й|с1|ег 8е)а. 1п шапу сааек а ппшргосеш Ве) аррагасис (е.8., В!о-Кад М(п(-Ргосеап ог Ап|Ь|оп Чег6са! бе1 Аррагас|ь) (13 сп| х !3 сп| х 1 |пи|) сап Ье ияе|$ ЬосЬ со ргераге йе гасВо1аЬе1е|$ яп81е-асгапдед РХА ог КЬ|А ргоЬе апа ю апа1ухе йе ргоаисса оЕ пис1еаае 5! с68еиюп.
Та!Ее 7-6 аЬосча йе регсепса8е оЕ ро1уасгу1ап|Ые псе|1 со рипЕу РНА Ега8п|епь оузы!оиа яхеа; ТаЫе 7-7 аЬосча йе ехрессе|1 пюЪ|1|- 6еа оЕ сгасЫп8 6уеа |и йеае Ве1|. ТЬе шесЬо6 иае|$ со ргераге сЬе ро)уасгу1ап|Ые 8е) Ь 6еасг!Ьеб ш 5сер 1 оЕ йь ргососо1; Еог ЕигсЬег |1еса|1|, р1еаае аее СЬарсег 12, Ргососо) 8.
Ргогосо( 10: Марр!ад ЙХА и |й Хис1еаяе 51 7.57 ТАВЕЕ 7-7 Ехрессед МоЬс((оеь о( ТгасЬ!пк $Эуеь 5|а РосчАскчсамсое)()кеА Сес Хчсе|че СЕАЯОЕ (п1) Вкоморнехос Всие (п1) 155 110 75 55 4 6 8 10 30 25 20 10 Тгасмиь |Гуся саи яегче яя ияеуш иж яаидягй ои аеияшпиь ро!уасгу!атоме ье!я.
ТЬе |айе шгасасея йе арргохииа|е яжя оГ стась!иь г|уея Ки иис!еопаея) ои ьеи оГ д|Г(егеис ро!уасгу!атоме соисеи|гапоия, Нос!е1с Ас1415 апе1 О1фопос!ео641е5 Саглег КЙА (уеаьг ГКА)А) г((с)ТР ьо1ибол (20 тм) сол(а!л!лд а)1 Еоиг г(А(ТРь Оаю!че йе с(ХТРя !и 25 шм Тпя-С1 (РН 8.0) апс) |соте ая яиа11 а1щиося ас — 20*С. КА)А, Еог иье аь а ь(алг(агг) 5упйеяте ш Ыио Ьу сгапяспраоп оЕ йе арргорпа|е я!галс( оЕ а гесогиЬ!паис р!аяиЫ солса(и!и8 йе (|ХА яес)иепсея о( Гпсегеяс апс) а ЬассегюрЬа8е ргогпосег.
МесЬос(я со яупйеяте ап|Е рип(у йе КХА аге ош1(пе|1 (и СЬарсег 9, Ргососо! 6. 5улГЛейс о(!Колос)еос!с(е (70 рто!еь(01) |л с((ь(!1(ес( Н О ТЬе о118опис(еосЫе ияес( |о рпше яупйеяя оЕ сЬе ргоЬе Егош а я!п8!е-я!галс(ес) ЕСХА сешр1асе |ЬоиЫ Ъе 20 — 25 иис!еосЫея ш! еп8|Ь апс( сошр1егиеисагу со сЬе КХА я!галс( |о Ъе апа1уте|1.
1| яЬои1о ЬуЬпсохе со йе сешр!асс ОХА я|галс( 250 — 500 пис!еос!Йея 3' оЕ |Ье рояооп |Ьас ииП Ъе с!еачес( Ьу сЬе сЬояеп геяспссюп еитутпе. 5соге о!18опис!еос(дея ш а!|аиоп ас -20'С. Теглр!а1е ОГ|!А (7 СГК(р)), ылд1е-я!галс(ес( ()яе ясапс)агс) ргосес)игея (СЬарсег 3, Ргососо1 5) со ртераге я(п8(е-я!галс(ес( (|ХА Его|и а гесошЬ(паис ЬассегюрЬа8е М13 саггуш8 сЬе !псе|с Е)ХА я!галс( !и йе яап|е яепяе ая сЬе сея| КХА. Теь( К)с(А Ро!у(А) ч ог соса! КХА ргерагес( Ьу опе оЕ йе |пе|Ьо|Ь ~(еяспЬес( |п Ргососо!я 1 сЬгоиВЬ 4 о( сЬЬ сЬар|ег. РГОЬЕ5 О)ЧА ргоЬе, ил!Еогт(у 1аЬе(ег( алс( ылд!е-ьсгалг(ег) ТЬе РХА ргоЬе В ргераге|! ш 5|еря 1 — 15 оЕ сЬ|я ргососо!. С)яе я!п81е-я!галс(ес( ргоЬея иш1опи!у 1аЪе1е|1 со Ь!8Ь ярес|ас ассгасу |ч)сЬ!п а Ее|ч |(ауя со ачоЫ ргоЫе|ия саияес( Ьу гагпосЬеписа1 с(е8гас(ас!оп.
1сае11оасЕ1че Согпроопе15 (у-ятР)АТР (10 тС!)т1, 3000 С|)тто1е) (!> ТАВЕЕ 7-8 Чо1и|пеь оЕ Ро(уасгу(ап|Ые Кеци!гесЕ со Саьс М(п18е1ь о( Чаг(оиь Регсепсакеь о, СЕ| Чо|име ое 40;6 Аскчсам|ое (ш1) 1.5 1.875 2.25 3.0 йрес1а1 Е(101ргпеп1 Ч)гасег Ьа|Ль ргеьес Го 65 С, 85 С, алс( 95 С, Го ГЛе арргорла(е ГЕГВеь(!ол гетрега(иге (р!еаье ьее 5(ер 22), алс( го ГЛе с(еыгег( ЛуЬГ(г(!айаг!ол гетрегагиге (р(еаье ьее 51ер 27) И|Ластал ЗММ И(ег рарег (ог ес(и!ча(ел() 758 Осаргет 7: ЕхстасНоп, Рит!Ессат!пп, апс(Апа!ух!х ос тКИАЕтот Еи[сатуог(с Се!Ь МЕТНО0 Ргерага6оп оЕ Каоссогсс!у ЕаЬе!ег! Ь[щ!е-Мгаос!ед Ех[ЧА РгоЬе 1.
Ргераге а ро1уасгу!агпЫе пнп!Ве1 сои!а!п!п8 8 м игеа (13 сш х ! 5 сгп х 0.75 пип) (е.8., ВюКас[ М!п[-ргосеап). а. М!х йе Ео!1оъчп8 геа8епся 7.2 8 оЕ итеа 15 ш1 оЕ 10х ТВВ АсЫ сЬе арргорпасе агпоипса оЕ 4096 асгу!ашЫе (асгу1аш!йе:Ъ|хасгу!ашЫе 19:1; р!еаае аее Таые 7-8) со Вепегасе а Ве! сои!а!п[пц йе с[еягес[ сопсепсга6оп оЕ ро1уасгу1атпЫе (р1еаае аее ТаЫе 7-6). Ь.
АсЫ Н,О со а 6па! чо!шпе оЕ15 тп1. с. 5с[г йе пихсиге ас гоош сетпрегасиге оп а шаВпе6с 46ггег ипс0 йе игеа 6!яо[чея ТЬеп асЫ: ! 20 Р) оЕ сООА апипопштп ретш1(асс 16 и! оЕ ТВМВЕС М!х йе хо!и
![](https://s.studizba.com/z.php?f=/templates/si/i/noavatar.png&w=100&h=100&t=1"){kind=avatar}
