Диссертация (1174368), страница 7
Текст из файла (страница 7)
Проведенные исследования (10,50)показали,чтоприменениеL-изолейцил-L-глутамил-L-триптофананатриевой соли способствовало разрешению патологического процесса припиодермиях и красном плоском лишае.Так, терапия больных краснымплоским лишаем L-изолейцил-L-глутамил-L-триптофана натриевой сольюпозволяла полностью купировать клиническую симптоматику в 71,9%случаев и характеризовалась высоким уровнем безопасности.34ГЛАВА 2. ИСПОЛЬЗОВАННЫЕ МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ ИЛЕЧЕНИЯ2.1. Методы исследования больных нуммулярной экземойБольнымнуммулярнойэкземойпроводилисьстандартныеобщелабораторные исследования: клинический анализ крови, биохимическийанализ крови, общий анализ мочи, а также иммунологическое обследованиеИммуноферментный анализ.При обследовании включенных в исследование больных нуммулярнойэкземой с помощью иммуноферментного анализа определяли уровень IL-10,IL-12 и IL-17 в сыворотке крови.
Исследования проводили с помощьюиммуноферментного комплекса, состоящего из вошера «Проплан» (Рicon,Россия), шейкера «SkyLine» (ELMI, Латвия) и спектрофотометра «Униплан»(Рicon, Россия). В качестве диагностических тест-систем использоваликоммерческие наборы реагентов (ЗАО «Вектор-Бест», Россия). На первомэтапе лунки планшета дважды обрабатывались буферным раствором. Затем влунки вводили по 10 мкл буфера В, причем концентрация цитокиновварьировала от 20 пкг до 0,3 МЕ/мл. Вносили по 100 мкл исследуемойсыворотки. Инкубировали 60 минут при температуре +25°С в условияхнепрерывного встряхивания.
Удаляли жидкость и трижды промывалибуферным раствором. После аспирации пипеткой вносили в каждую лункупо 200 мкл раствора вторых антител и инкубировали в течение 60 минут притемпературе равной +37°С. Повторно промывали и удаляли жидкость излунок, промывали дистиллированной водой и просушивали лунки, а затемвводили по 200 мкл субстрата с красителем. Стрипы инкубировали притемпературе равной +22°С в течении 5-15 минут, останавливали реакциювнося 50 мкл раствора серной кислоты. Учет и анализ результатовпроводили, используя спектрофотометр с длиной волны 450 нм, при нулевомпоглощенииполункесостандартом.Имунофенотипированиемононуклеарных клеток периферической крови проводили с помощьюнепрямой иммунофлюоресценции используя моноклональные антитела35серии ИКО. Определение относительной аффинности (OA) антителпроводилось с помощью различных молярных концентраций тиоционатанатрия, разрушающего связи комплекса антиген-антитело в твердофазномиммуноферментном анализе.
Содержание растворимых антигенов CD50 иCD54 (соответственно sСD50 и sСD54) проводилось иммуноферментнымметодом с использованием моноклональных антител ИКО-60 и ИКО-184.Результаты проводимых исследований выражались в условных единицах(U/мл).Определение МИФ. Содержание МИФ в сыворотке крови измерялиметодом энзимсвязанного иммуносорбентного анализа (ELISA). У пациентовбрали венозную кровь в количестве 2-3 мл. Кровь вносилась в пробирку сгепарином (5-10 Ед/мл), перемешивалась и отстаивалась 20-40 минут при+37С.Затемотбирались0,5-1,0млплазмыслейкоцитамиицентрифугировались при 1000 об/мин.Определение экспрессии TLR2 и TLR4Для определения экспрессии TLR2 и TLR4 на клетках периферическойкрови, выделенные на градиенте фиколл-урографинамононуклеарныеклетки, инкубировали с FITC-меченными антителами к СD14+, РЕмеченными антителами к TLR2 и TLR4 с контролем в течение 30 мин притемпературе 40С.
Анализ экспрессии CD 14+, TLR2 и TLR4 проводили напроточном цитофлуориметре. Оценивали процент моноцитов (CD 14+ клеток), несущих на своей поверхности TLR2 и TLR4, и среднююинтенсивность флуоресценции (СИФ), величину которой выражали вусловных единицах (усл. ед.) флуоресценции.Статистическая обработка полученных данных проводилась методомвариационной статистики на персональном компьютере при использованиипрограмм Microsoft Word и Microsoft Excel (Windows). Вычислялись средниеарифметические значения (М), ошибки средних величин (m).
Достоверностьоценивали по критерию Стьюдента (t). Различия значений считалидостоверными при уровне вероятности более 95% (p<0,05).36Оценка BRS. Изучение выраженности зуда и его воздействие наповседневную жизнь при применении различных терапевтических методикпроводилась с помощью международного индекса Behavioral rating scores(BRS) в форме опросника, данные в который вносили пациенты.Опросник BRS включал всего 2 вопроса, что делало его простым и удобнымпри применении.1.
Ваша оценка зуда за последние сутки в дневное время?0 – зуд отсутствует;1 – возникает зуд, но он не вызывает беспокойство;2 – возникает умеренный зуд, который раздражает и вызывает беспокойство,что негативно воздействует на повседневную деятельность;3 –присутствует выраженный зуд, который очень раздражает и сильновоздействует на повседневную деятельность;4–возникаетнестерпимыйзуд,которыйнарушаетповседневнуюдеятельность.2. Ваша оценка зуда за последние сутки в ночное время?0 – зуда отсутствует;1 – возникает легкий зуд, не влияющий на сон;2–возникаетумеренныйзуд,которыйраздражаетипричиняетбеспокойство, влияет на сон;3 – отмечается выраженный зуд, который очень раздражает и сильно влияетна сон;4 – отмечается очень сильный зуд, вызывающий бессонницу.После заполнения каждой анкеты, полученные баллы складывались.8баллов – отражали максимальное значение индекса BRS, минимальное – 0баллов.37Субъективная оценка качества жизни пациентовИзучение качества жизни (КЖ) – недавно разработанная методика, спомощью которой дается оценка субъективным переживаниям больных сразличными дерматозами.
В связи с этим целесообразность динамическогоизучения показателей отражающих качество жизни в ходе проведенияклинических исследований не вызывает сомнений так как позволяет оценитьэффективность применяемых методов терапии.Кроме того, суммарная информация, вытекающая из результатовизменений индивидуальных показателей КЖ, в ряде случаев, позволяетвносить изменения в проводимое лечение.В нашей работе мы использовали международный дерматологическийиндекс качества жизни (ДИКЖ) и индекс САН, отражающий самочувствие,активность, настроение.Анкетированиекаждогоизвзятыхвисследованиепациентовпроводилось до, в процессе терапии и после окончании лечения.
Заполнялсявопросник больным в отдельном помещении, медицинский персонал приэтом отсутствовал. Затем проводили статистическую обработку полученныхданных.Дерматологический индекс качества жизниДерматологический индекс качества жизни - ДИКЖ (Dermatology LifeQuality Index, Finlay, 1994) представлял собой стандартизированную формусамооценки больным своей жизнедеятельности с учетом социальных,бытовых и межличностных аспектов. Анкета состояла из 10 вопросов(Таблица 2).
Каждый вопрос анализировался по трех балльной системе взависимости от степени выраженности: очень сильно (очень часто) - трибалла, сильно (часто) - два балла, несильно - один балл, нет или затрудняюсьответить – ноль баллов. Если при анкетировании без ответа оставалось более2 вопросов, ее результаты не рассматривались. Подсчет значения индексапроводилсяпростымсуммированиемзначенийвсехпараметров.Минимальное значение ДИКЖ - 0 баллов, максимальное значение ДИКЖ 3830 баллов. Чем больше значение, тем больше отрицательное влияниенуммулярной экземы на качество жизни.Таблица 2Вопросы, характеризующие индекс КЖ (ответ подразумевает выраженностьотдельного симптома за последнюю неделю)1.2.3.4.5.6.7.8.9.10.Беспокоили ли Вас зуд, боль, жжение, болезненность кожи?Присутствовало ли чувство неуверенности из-за состояния кожи?Испытывали ли Вы затруднения при совершении покупок, работе похозяйству?Насколько сильно состояние Вашей кожи влияло на выбор носимойВами одежды за последнюю неделю?Испытывали ли Вы затруднения при контакте с окружающими, илиактивном отдыхе?Испытывали ли Вы затруднения при занятиях спортом?Испытывали ли Вы затруднения в работе или учебе?Испытывали ли Вы затруднения в отношениях с друзьями, близкими,родственниками, партнерами?Испытывали ли Вы затруднения в интимных отношения?Изменился ли порядок Вашей жизни из за болезни (например, потерялимного времени, денег, уделяли меньше внимания работе, семье)?Индекс «САН» - Самочувствие.
![](https://s.studizba.com/z.php?f=/templates/si/i/noavatar.png&w=100&h=100&t=1"){kind=avatar}
