Диссертация (1174368), страница 10
Текст из файла (страница 10)
Большоевнимание было уделено исследованию системы цитокинов, ответственной загуморальнуюрегуляциюиммунногоответаисостояниеклеточно-опосредованных реакций у больных нуммулярной экземой. Исследованиесодержания различных интерлейкиновпроведено в сыворотке крови 30больных нуммулярной экземой и 40 здоровых доноров.Проведенные исследования показали (Рисунок 5), что у больныхнуммулярной экземой в периферической крови достоверно сниженаконцентрация IL-12 (до 22,4±2,6 пг/мл) по сравнению с референснымизначениями (39,8±3,1 пг/мл), что имеет определенное значение в развитииданногодерматоза.* - различия статистически достоверны относительно показателей у здоровых доноров(р<0,05).57Рисунок 5 Содержание IL-12 в сыворотке крови больных нуммулярнойэкземой и здоровых доноровВ настоящее время известно, что IL-12 принимает активное участие вактивации клеточно-опосредованного иммунного ответа развивающегосявследствие наличия в организмеантигенов микробного и вирусногопроисхождения.
Кроме того, IL-12 осуществляет взаимосвязь междупроцессами врожденного и адаптивного иммунитета. Таким образом,уменьшение продукции IL-12, даже при усиленном синтезе другихпровоспалительных интерлейкинов, приводит к снижению эффективностинеспецифической защитной реакции у больных нуммулярной экземой и даетвозможностьбактериямивирусамдлительноперсистироватьвмакроорганизме.Исследование состояния системы цитокинов позволило выявить убольных нуммулярной экземы значительное повышение количественногосодержания в периферической крови IL-17 по сравнению с рефенснымизначениями(р<0,05,сравнениесреференснымизначениями).Так,концентрация IL-17 в сыворотки крови у пациентов с нуммулярной экземойравнялась 6,1±1,0 пг/мл, а у здоровых доноров - 0,22±0,1 пг/мл (Рисунок 6).IL-17 является провоспалительным цитокином и синтезируется в основномTh17-клетками, которые образуются вследствие дифференцировки наивныхCD4+ -T –лимфоцитов.
Известно, что IL-17 принимает активное участие врегуляции иммунного ответа. IL-17 способен усиливать индукцию иэкспрессию таких воспалительных медиаторов как колониестимулирующиефакторы,антимикробныепептиды,хемокиныи,какследствие,стимулировать миграцию нейтрофилов в очаг воспаления. Таким образом,повышение концентрации уровня IL-17 в сосудистом русле усиливаловоспалительную реакцию у больных нуммулярной экземой.Известно, что IL-10, продуцируемый в основном моноцитами, а также Th-1 иTh-2,макрофагамиобладаетширокимспектромдействиясочетаяпротивовоспалительную активность с выраженным иммуносупрессорным58эффектом.ПротивовоспалительноедействиеIL-10заключаетсявспособности снижать продукцию провоспалительных цитокинов Th-1,усиливать выработку антагониста рецептора IL-1 и снижать адгезиюлейкоцитов к эндотелиальным клеткам, активированным IL-1.* - различия статистически достоверны относительно показателей у здоровых доноров(р<0,05).Рисунок 6.
Содержание IL-17 в сыворотке крови больных нуммулярнойэкземойТаким образом, ИЛ-10 является одним из ключевых регуляторов иммунногоответа, угнетающих активность макрофагов и Thl-клеток и способствующихреализацию биологических эффектов Тh2. Проведенные исследования(Рисунок 7) позволили выявить у больных нуммулярной экземой выраженноеуменьшение уровня IL-10 в периферической крови (до 4,1±0,2 пг/мл приреференсных значениях 18,8±0,5 пг/мл), (р<0,05, сравнение с референснымизначениями).способствовалоСнижениеактивацииуровняIL-10Thl-клеток,впериферическойвыработкикровипровоспалительныхцитокинов и возникновению патоморфологических изменений в дермально –59эпидермальном пространстве определяющих характерную клиническуюкартину нуммулярной экземы.Одним из наиболее значимых интерлейкинов выполняющих помимопровоспалительныхмногочисленныефункцииявляетсяфакторингибирования миграции макрофагов (MIF).
Установлено, что MIF активноучаствует в патогенезе имунноопосредованных заболеваний, в том численекоторых дерматозов. Одним из важнейших свойств MIF является егоспособность значительно замедлять либо блокировать процессы миграциифагоцитов из очагов воспалительной реакции.* - различия статистически достоверны относительно показателей у здоровых доноров(р<0,05).Рисунок 7. Содержание IL-10 в сыворотке крови больных нуммулярнойэкземойНаличие многогранных биологических эффектов MIF побудило нас изучитьего альтерацию у больных нуммулярной экземой.Методом энзимсвязанного иммуносорбентного анализа (ELISA) содержаниеMIF в периферической крови было изучено у 30 больных нуммлярнойэкземой и 40 здоровых доноров.Результаты проведенных лабораторных60исследований представлены на таблице 12.
Как видно из представленныхданных количественное содержание MIF статистически достоверно (р<0,05)превышало референсные значения (39,9±3,3 нг/мл – у больных нуммулярнойэкземой и 5,4±0,8 нг/мл – у здоровых доноров). Наиболее высокий уровеньMIF в сыворотке крови определялся у больных с распространеннымдлительно протекавшим патологическим процессом.Таблица 12Содержание MIF в периферической крови больных нуммулярной экземой издоровых доноровКоличествобольных иМИФ (нг/мл)доноровЗдоровые доноры405,4±0,8Больные нуммулярной экземой3039,9±3,3**Различия достоверны по сравнению с референсными значениями (p < 0,05)Таким образом, в работе показано, что излишняя продукция MIFприводит к усилению явлений воспаления в зоне очагов поражения изатяжному течению патологического процесса у больных нуммулярнойэкземой.Известно, что развитие воспалительного процесса протекает снепременным участием антигенов адгезии (ICAM-1, VCAM-1, ICAM-3,LFA1), которые посредством межклеточных взаимодействий, обеспечиваютпроцесс попадания фагоцитов в очаги поражения.
Антигены адгезии могутсвязываться специальными рецепторами на поверхности клеточных мембранфагоцитов, так и находиться в сыворотке крови в растворимом состоянии,опосредуя возникновение воспаления. Учитывая вышеизложенные факты,мы предприняли изучение системы молекул адгезии у 30 больныхнуммулярной экземой и 40 здоровых доноров. Результаты проведенныхисследований показаны в таблице 13. Как видно из представленных данных,относительное содержание мононуклеарных клеток CD50+ (32,5±3,3%) иCD54+ (30,6±3,2%) в периферической крови больных нуммулярной экземой61статистически достоверно (р<0,05) снижено по сравнению с референснымизначениями (соответственно 58,9±4,9% и 57,3±4,8%).
Вместе с тем отмеченрезкий рост уровня в сыворотки крови растворимых антигенов sCD50 иsCD54 до 310,1±20,2 Ме/мл и 249,3±20,0 Ме/мл соответственно при 52,9 ±4,1Ме/мл и 38,2±3,2 Ме/мл – у здоровых доноров (р<0,05, сравнение среференсными значениями). Причем наиболее значительная концентрациярастворимых антигенов адгезии отмечалась у больных с выраженнымвовлечением кожных покровов в воспалительный процесс. Рассматриваяпричины, приведшие к повышению уровня в сыворотке крови sCD50 иsCD54, можно предположить, что одной из них являлся процесс частичнойпотери антигенов клеточными оболочками CD50+ и CD54+. Таким образом,установлено, что выявленные нарушения в системе антигенов адгезии убольныхнуммулярнойэкземойспособствовалиусиленноймиграциифагоцитов в кожу и возникновению воспаления.Таблица 13Содержание антигенов адгезии в крови больных нуммулярной экземойКол-вообследованных лицАнтигены адгезииsCD50Ме/млsCD54 Ме/млCD50+%CD54+ %Больныенуммулярной 30 310,1±20,2 *249,3±20,0 * 32,5±3,3* 30,6±3,2*экземойЗдоровые40 52,9 ±4,138,2±3,258,9±4,957,3±4,8доноры* Примечание - различия статистически достоверны относительнопоказателей у здоровых доноров (р<0,05).В настоящее время известно, что паттернраспознающие рецепторы (ПРР)принимают активное участие в защите макроорганизма от микробной ивирусной инвазии.
Наиболее изученными среди них являются Toллподобные рецепторы(TLR) и NOD-рецепторы, которые осуществляютзащитные функции от бактериальных, микотических и вирусных инфекциях.Существование этих рецепторов на мембране иммунокомпетентных клетках62создает благоприятные условия для активного участия TLR в патологическихреакциях при многих заболеваниях. Учитывая, что кожа является зонойконтакта первого эшелона иммунной системы с различными бактериями,вирусамиигрибками,изучениеуровняэкспрессииToll-подобныхрецепторов на иммунокомпетентных клетках у больных нуммулярнойэкземой позволяло дать более объективную оценку роли нарушенийврожденного иммунитета в развития нуммулярной экземы.При регистрации TLR2 (Рисунок 8) у 30 больных нуммулярной экземой невыявленозначительныхизмененийинтенсивностифлюоресценциинейтрофилов по сравнению с референсными значениями (56,9±2,8 УЕФ – убольных нуммулярной экземой и 57,8± 2,9 УЕФ - у здоровых доноров).Однако различия в уровне экспрессии TLR4 нейтрофильных лейкоцитов у 30больных нуммулярной экземой по сравнению с рефенсными значениямибылизначительными.Так,снижениеинтенсивностифлюоресценциинейтрофилов при регистрации TLR4 у больных нуммулярной экземой носилостатистически значимый характер (43,5±2,2 УЕФ – у больных нуммулярнойэкземой и 64,8±3,1 УЕФ - у здоровых доноров, (P<0,05).
При изученииэкспрессия TLR2 и TLR4 на моноцитах периферической крови у 20 больныхс нуммулярной экземой выявлены иные закономерности. Так, результатыпроведенных исследований (Рисунок 9) позволили выявить значительноеповышениеинтенсивностифлюоресценциимоноцитовубольныхнуммулярной экземой для рецепторов TLR4 по сравнению с рефенснымизначениями (79,1±3,9 УЕФ – у больных нуммулярной экземой и 54,9± 2,8УЕФ - у здоровых доноров), (P<0,05). В то время как уровень экспрессиярецептора TLR2 практически не отличался от аналогичного у здоровыхдоноров (53,2±2,8 УЕФ – у больных нуммулярной экземой при референсныхзначениях равных 55,4± 2,9 УЕФ).63* - различия статистически достоверны относительно показателей у здоровых доноров(р<0,05).Рисунок 8.