Диссертация (1174316), страница 21
Текст из файла (страница 21)
Рпилинг снижает экспрессию Ki67 в дерме через 7 дней на 40% и через 14 дней на97% (p>0,05). При проведении сравненительного анализа действия пилинговобнаружено значимое снижение (р<0,01) клеточной пролиферации после пилингас Р на 7 день и еще большее снижение (p>0,05) на 14 день (таблица 5.2.1, рисунки5.2.1, 5.2.2 и 5.2.3).Таблица 5.2.1 – Динамика показателя Ki67 в коже после пилингов с ретиноидами(единицы измерения – количество меченых ядер, Mean±SEM)ГруппыКонтрольРКРЭпидермис7днейДерма14 дней6,9±0,7 (n=27)7дней14 дней8,7±1,2 (n=25)25,0±2,1**n=279,8±0,9^^22,1±1,6**n=95,3±0,4^^14,7±2,5n=255,2±0,8^^7,2±1,0n=90,3±0,2n=18n=10n=17n=10Примечание: * p≤0,05, ** p≤0,01 – различие достоверно по сравнению с группой контроля; ^p≤0,05, ^^ p≤0,01 – различие достоверно по сравнению с показателем после пилинга сретиноевой кислотой.135авбгдРисунок 5.2.1 – Экспрессия маркера Ki67 в эпидермисе: (а) через 7 дней послепилинга с ретиноевой кислотой; (б) через 7 дней после пилинга с ретинолом; (в)через 14 дней после пилинга с ретиноевой кислотой; (г) через 14 дней послепилинга с ретинолом; (д) интактная кожа (контроль).
Увеличение х125136абвгдРисунок 5.2.2 – Экспрессия маркера Ki67 в дерме: (а) через 7 дней после пилингас ретиноевой кислотой; (б) через 7 дней после пилинга с ретинолом; (в) через 14дней после пилинга с ретиноевой кислотой; (г) через 14 дней после пилинга сретинолом; (д) интактная кожа (контроль). Увеличение х125137Рисунок 5.2.3 – Графическое изображение динамики показателя Ki67 вэпидермисе и дерме через 7 и 14 дней после пилингов с ретиноидами (значениепоказателя в контроле принято за 100%). Примечание: ** p≤0,01 – различиедостоверно по сравнению с группой контроля; ^^ p≤0,01 – различие достоверно посравнению с показателем после пилинга с ретиноевой кислотой5.3.
Изучение показателя Bcl2 после пилингов с ретиноидамиВ эпидермисе после пилинга с РК показатель антиапоптоза Bcl2 через 7дней на 5% ниже значения в контроле (p>0,05), но повышается на 11% (p>0,05)через 14 дней. После пилинга с Р экспрессия Bcl2 через 7 дней практически неизменяется, но снижается на 16% (p>0,05) к 14 дню. При сравнении действияпилингов между собой выявлено значимое повышение величины Bcl2 послепилинга с РК на 14 день.В дерме после пилинга с РК через 7 и через 14 дней показатель Bcl2 неизменялся, после пилинга с Р через 7 дней стал на 7% (p>0,05) больше, чем вконтроле, а через 14 дней на 16% (p>0,05) ниже контрольных значений.
Присравнении пилингов между собой значимо высоким (p<0,01) оказался показательBcl2 после пилинга РК на 14 день (таблица 5.3.1, рисунки 5.3.1, 5.3.2, 5.3.3).138Таблица 5.3.1 – Динамика показателя Bcl2 в коже после пилингов с ретиноидами(единицы измерения – OD оптическая плотность, Mean ±SEM)ГруппыКонтрольРКРЭпидермис7дней14 дней0,466±0,014 (n=29)0,442±0,017n=270,479±0,021n=19Примечание: * p≤0,05,0,515±0,016^^n=100,391±0,024n=10Дерма7дней14 дней0,474±0,019 (n=29)0,499±0,024n=270,509±0,018n=180,492±0,038n=100,397±0,033n=10** p≤0,01 – различие достоверно по сравнению с группойконтроля; ^ p≤0,05, ^^ p≤0,01 – различие достоверно по сравнению с показателем после пилингас ретинолом.139авбгдРисунок 5.3.1 – Экспрессия маркера Bcl2 в эпидермисе: (а) через 7 дней послепилинга с ретиноевой кислотой; (б) через 7 дней после пилинга с ретинолом; (в)через 14 дней после пилинга с ретиноевой кислотой; (г) через 14 дней послепилинга с ретинолом; (д) интактная кожа (контроль).
Увеличение х125140абвгдРисунок 5.3.2 – Экспрессия маркера Bcl2 в дерме: (а) через 7 дней после пилинга сретиноевой кислотой; (б) через 7 дней после пилинга с ретинолом; (в) через 14дней после пилинга с ретиноевой кислотой; (г) через 14 дней после пилинга сретинолом; (д) интактная кожа (контроль). Увеличение х125141Рисунок 5.3.3 – Графическое изображение динамики показателя Bcl2 вэпидермисе и дерме через 7 и 14 дней после пилингов с ретиноидами (значениепоказателя в контроле принято за 100%). Примечание: ^^ p≤0,01 – различиедостоверно по сравнению с показателем после пилинга с ретинолом5.4. Изучение показателя EGFR после пилингов с ретиноидамиПосле пилинга РК через 7 дней экспрессия показателя EGFR в эпидермисебыла на 11% ниже, а в дерме на 24% выше, чем в контроле, через 14 дней вэпидермисе значения практически восстанавливались, а в дерме оставались на 9%выше.
После пилинга Р экспрессия EGFR в эпидермисе снижалась на 9% через 7дней и на 13% через 14 дней, в дерме наоборот – повышалась на 8% через 7 днейи на 16% через 14 дней.По маркеру EGFR значимых отличий не выявлено ни в одной из группсравнения ни в эпидермисе, ни в дерме (таблица 5.4.1, рисунки 5.4.1, 5.4.2, 5.4.3).142Таблица 5.4.1 – Динамика показателя EGFR после пилингов с ретиноидами(единицы измерения – оптическая плотность OD, Mean±SEM)ГруппыКонтрольРКРЭпидермис7дней14 дней0,460±0,017 (n=26)0,409±0,016n=260,418±0,018n=200,456±0,035n=100,399±0,017n=10Дерма7дней14 дней0,387±0,024 (n=24)0,480±0,028 0,422±0,022n=21n=100,419±0,032 0,450±0,034n=18n=10Примечание: * p≤0,05, ** p≤0,01 – различие достоверно по сравнению с группой контроля; ^p≤0,05, ^^ p≤0,01 – различие достоверно по сравнению с показателем после пилинга сретинолом.143авбгдРисунок 5.4.1 – Экспрессия маркера EGFR в эпидермисе: (а) через 7 дней послепилинга с ретиноевой кислотой; (б) через 7 дней после пилинга с ретинолом; (в)через 14 дней после пилинга с ретиноевой кислотой; (г) через 14 дней послепилинга с ретинолом; (д) интактная кожа (контроль).
Увеличение х125144абвгдРисунок 5.4.2 – Экспрессия маркера EGFR в дерме: (а) через 7 дней после пилингас ретиноевой кислотой; (б) через 7 дней после пилинга с ретинолом; (в) через 14дней после пилинга с ретиноевой кислотой; (г) через 14 дней после пилинга сретинолом; (д) интактная кожа (контроль). Увеличение х125145Рисунок 5.4.3 – Графическое изображение динамики показателя EGFR вэпидермисе и дерме через 7 и 14 дней после пилингов с ретиноидами (значениепоказателя в контроле принято за 100%)5.5. Изучение содержания коллагена IV типа после пилинга с ретиноидамиКоллаген IV типа располагается в базальной мембране.
После пилинга РКна 7 день экспрессия Col IV в базальной мембране оказалась на 11% (p<0,05)ниже, чем в контроле, на 14 день показатель снижался на 19% (p<0,05). Послепилинга Р показатель Col IV на 7 и на 14 дни соответствовал значению вконтроле. При сравнении пилингов между собой на 14 день выявлен более низкий(p<0,05) уровень Col IV после пилинга РК (таблица 5.5.1, рисунки 5.5.1, 5.5.2).146Таблица 5.5.1. – Динамика показателя Col IV в коже после пилингов сретиноидами (единицы измерения – оптическая плотность OD, Mean±SEM)ГруппыКонтрольЭпидермис7дней14 дней0,594±0,017 (n=26)РК0,526±0,021* (n=25)0,484±0,010* (n=10)Р0,595±0,016 (n=20)0,601±0,017^ (n=10)Примечание: * p≤0,05, ** p≤0,01 – различие достоверно по сравнению с группой контроля; ^p≤0,05, ^^ p≤0,01 – различие достоверно по сравнению с показателем после пилинга сретиноевой кислотой.147абвгдРисунок 5.5.1 – Экспрессия маркера ColIV в эпидермисе: (а) через 7 дней послепилинга с ретиноевой кислотой; (б) через 7 дней после пилинга с ретинолом; (в)через 14 дней после пилинга с ретиноевой кислотой; (г) через 14 дней послепилинга с ретинолом; (д) интактная кожа (контроль).
Увеличение х125148Рисунок 5.5.2 – Графическое изображение динамики показателя Col IV вэпидермисе через 7 и 14 дней после пилингов (значение показателя в контролепринято за 100%). Примечание: * p≤0,05 – различие достоверно по сравнению сгруппой контроля; ^p≤0,05 – различие достоверно по сравнению с показателемпосле пилинга с ретинолом5.6 Сравнение иммуногистохимических показателей после пилинга сретиноевой кислотой и пилинга с ретиноломПослепилингасретиноевойкислотойчерез7днейчислопролиферирующих клеток резко возрастает и остается высоким через 14 дней, вдерме через 7 дней их число повышается и восстанавливается через 14 дней.После пилинга с ретинолом в эпидермисе через 7 дней происходит повышениечисла пролиферирующих клеток (Ki67), которое восстанавливается через 14 дней,в дерме число этих клеток снижается через 7 и через 14 дней.
Полученные данныеуказывают на то, что ретиноевая кислота вызывает активную пролиферациюклеток эпидермиса, продолжающуюся более 14 дней (рисунок 5.6.1).149302520ХП с ретиноевойкислотой, р<0,0515ХП с ретинолом1050До леченияЧерез 7 днейЧерез 14 днейРисунок 5.6.1 – Экспрессия маркера Ki67 в эпидермисеПосле пилинга с ретиноевой кислотой показатель антиапоптоза Bcl2 имелтенденцию к повышению в эпидермисе через 14 дней и не изменялся в дерме.После пилинга с ретинолом в эпидермисе клеточная дифференцировканезначительно снижается к 14 дню в эпидермисе и дерме.
Оценивая полученныерезультаты, можно предполагать, что в течение 14 дней процессы пролиферацииклеток преобладают над их дифференцировкой.Анализируя динамику экспрессии показателя EGFR, можно обратитьвнимание на отсутствие его значимых изменений после применения обоихпилингов.После пилинга с ретинолом, судя по уровню экпрессии Col IV, состояниебазальной мембраны не изменялось, после пилинга с ретиноевой кислотой егозначения снижались через 7 и еще больше через 14 дней, возможно, отражаяинтенсивность метаболических процессов.Таким образом, действие пилинга с ретинолом на кожу заключается вусилении клеточной пролиферации в эпидермисе в пределах 14 дней.Действие пилинга с ретиноевой кислотой на кожу вызывает резкоеповышение клеточной пролиферации в эпидермисе более 14 дней и отчасти вдерме с соответствующим снижением процессов дифференцировки, и активацией150процессов перестройки базальной мембраны.