Диссертация (1174314), страница 19
Текст из файла (страница 19)
Экспрессия генов рецепторов стероидных гормонов и генов белков,ответственных за ремоделирование ткани и апоптоз, в эндометриоиднойткани яичников в зависимости от наличия или отсутствия рецидивазаболеванияПри наблюдении 82 пациенток с эндометриозом яичников в течениепоследующих 3 лет после оперативного и гормонального лечения рецидивызаболевания были выявлены у 12 (14,6%) больных (рисунок 19).Рисунок 19 – Распределение пациенток с эндометриозом яичников в зависимостиот наличия рецидива заболевания после лечения110С целью поиска маркера прогноза рецидивирования был проведенсравнительный анализ экспрессии рецепторов эстрадиола (ERα, ERβ, mER),прогестерона (PR-A, PR-B, mPR, PGRmC1), а также экспрессии геновмолекулярно-биологических маркеров, ответственных за ремоделирование ткании апоптоз (MMP-9, TIMP1, TIMP2, Bcl-2 и p-53) в эндометриоидной тканияичников пациенток, в зависимости от наличия или отсутствия рецидива послепроведенного лечения.
Описательная статистика результатов данного анализаприведена в таблицах 22 и 23.Таблица 22 – Описательная статистика определения уровней экспрессиигенов рецепторов половых стероидных гормонов у пациенток сэндометриозом яичников без рецидива и при наличии рецидива заболеванияПоказательmERERαПараметрБез рецидиваn=70M ± SE15,82 ± 1,57С наличиемрецидиваn=1213,65 ± 1,53Std.Dev10,96,7Min2,323,6525% per6,548,32Me13,2712,8975% per23,1217,36Max48,6429,35M ± Std.Err9,96 ± 1,418,58 ± 1,96Std.Dev6,485,32Min2,510,1825% per6,033,68Med8,736,1375% per12,8211,35Max33,8730,14111Продолжение таблицы 22ПоказательERβmPRPR-APR-BПараметрБез рецидиваn=70M ± Std.Err1,81 ± 0,39С наличиемрецидиваn=121,27 ± 0,28Std.Dev1,651,71Min0,130,1925% per0,340,43Med1,020,5975% per3,441,83Max8,626,38M ± Std.Err0,48±0,120,46 ± 0,25Std.Dev0,861,32Min0,0030,00225% per0,030,02Me0,150,0575% per0,560,31Max6,025,16M ± Std.Err1,76 ± 0,830,67 ± 0,21Std.Dev3,261,35Min0,0040,0525% per0,070,05Med0,680,1275% per3,680,95Max15,215,34M ± Std.Err0,54 ± 0,280,45 ± 0,14Std.Dev0,821,13Min0,00070,0625% per0,060,13Med0,210,1875% per0,530,29Max4,063,78112Окончание таблицы 22ПоказательPGRmC1ПараметрБез рецидиваn=70M ± Std.Err1,12 ± 0,18С наличиемрецидиваn=120,15 ± 0,12Std.Dev1,640,97Min0,020,0125% per0,040,03Med0,190,0575% per1,570,13Max11,121,43Таблица 23 – Описательная статистика определения уровней экспрессиигенов белков, ответственных за ремоделирование ткани и апоптоз упациенток с эндометриозом яичников без рецидива и при наличии рецидивазаболеванияРецепторыMMP-9TIMP1ПараметрБез рецидиваn=70M ± SE3,62 ± 1,49С наличиемрецидиваn=120,59 ± 0,27Std.Dev7,051,12Min0,0060,0425% per0,080,03Me0,380,1375% per1,790,45Max47,254,58M ± Std.Err53,90± 7,8962,01 ± 11,28Std.Dev34,3927,43Min15,2821,8625% per25,1424,17Med48,1456,6875% per61,1393,30Max174,31112,38113Окончание таблицы 23РецепторыTIMP2Bcl-2p-53ПараметрБез рецидиваn=70M ± Std.Err28,24 ± 4,98С наличиемрецидиваn=1233,29 ± 11,31Std.Dev24,1227,42Min5,696,3325% per11,2813,46Med18,2523,9375% per46,1554,48Max136,2485,19M ± SE13,34 ± 1,6510,12 ± 1,31Std.Dev8,135,38Min0,181,2125% per6,025,43Me10,918,1275% per16,6410,93Max45,4131,82M ± Std.Err5,98± 1,213,38 ± 1,52Std.Dev5,237,89Min0,020,0125% per0,340,19Med2,740,5675% per8,313,43Max41,2822,87Результаты сравнения экспрессии генов рецепторов стероидных гормонов ибелков, ответственных за ремоделирование и апоптоз, в эндометриоидной тканияичников, в зависимости от наличия рецидива заболевания представлены нарисунках 20 и 21.114Рисунок 20 – Относительная экспрессия генов рецепторов стероидных гормонов вткани у пациенток без рецидива и с рецидивом после лечения115Рисунок 21 – Относительная экспрессия генов белков, ответственных заремоделирование ткани, апоптоз и пролиферацию в ткани у пациенток безрецидива и с рецидивом после леченияКак видно из данных рисунков 20 и 21, уровни экспрессии генов рецепторовстероидных гормонов ERα, ERβ, mER, PR-A, PR-B, mPR, а также белков MMP-9,TIMP1, TIMP2, Bcl-2 и p-53 в образцах эндометриоидной ткани больных срецидивом после оперативного и гормонального лечения и у пациенток безрецидива заболевания не имеют достоверных различий (p>0,05).
В то же время,выявлено достоверное (p=0,0071) снижение экспрессии гена рецептора PGRmC1 вобразцах эндометриоидной ткани пациенток с рецидивом (0,15 ± 0,12 o.e.), по116сравнению с пациентками, у которых в течение периода наблюдения рецидиваотмечено не было (1,12 ± 0,18 у.e.), что позволяет предположить возможностьиспользования данного показателя в качестве молекулярно-биологическогомаркера рецидивирования эндометриоза яичников.Для оценки чувствительности и специфичности найденного нами маркерамы использовали ROC-анализ, представленный на рисунке 22.Примечание:Йодена.AUC=Se–чувствительность,Sp–специфичность,0,82(AUCпод–площадькривойилиJmax–индексинтегральныйпоказательпрогностической эффективности маркера)Рисунок 22 – ROC-кривая для маркера PGRmC1Оптимальной точкой на ROC-кривой можно считать ту, которая имеетнаибольшее значение чувствительности при наименьшем значении долиложноположительных результатов.
Эта точка может быть найдена с помощьюиндекса Йодена (J – Youden index), как максимальное отличие ординатROC-кривой и диагонали: J = max(Se + Sp – 1). Максимальным индексом Йоденастало значение 0,54, которое соответствует чувствительности - 83% испецифичности - 71%.
Значение экспрессии гена PGRmC1 для найденныхзначений чувствительности и специфичности стало значение - 0,1 у.е.117(относительно гена GAPDH). Прогностическая ценность (эффективность) - 0,82(AUC – площадь под кривой), что характеризует выявленный маркер какотличный классификатор. Таким образом, показатель экспрессии PGRmC1 можетбытьиспользованвкачествемолекулярно-биологическогомаркерадлядифференцированного подхода к выбору тактики ведения больных эндометриозомяичников.4.3. Экспрессия генов рецепторов эстрадиола (mER, ERα, ERβ) ипрогестерона (PGRmC1, mPR, РR-А, PR-B) в ткани первичногоэндометриоидного образования яичников и при рецидиве заболеванияНа следующем этапе нашего исследования был выполнен сравнительныйанализ экспрессии генов рецепторов эстрадиола (mER, ERα, ERβ) и прогестерона(PGRmC1, mPR, РR-А, PR-B) в ткани первичного эндометриоидного яичниковогообразования и при рецидиве заболевания.
Полученные данные представлены втаблице 24 и на рисунке 23.Таблица 24 – Описательная статистика определения уровней экспрессиигенов рецепторов половых стероидных гормонов у пациенток с первичнымэндометриозом яичников и рецидивом заболеванияПоказательmERПараметрПервичныйэндометриозn=82Рецидивэндометриозаn=12M ± Std.Err14,98 ± 1,1245,23 ± 8,72Std.Dev11,4326,64Min1,167,3225% per8,4615,83Med13,2739,1475% per23,6869,81Max47,0383,29Продолжение таблицы 24118ПоказательERαERβmPRPR-AПараметрПервичныйэндометриозn=82Рецидивэндометриозаn=12M ± Std.Err10,63 ± 1,131,73 ± 0,84Std.Dev7,362,12Min0,070,1125% per5,470,38Med8,570,8775% per13,353,76Max46,374,21M ± Std.Err1,69 ± 0,3210,12 ± 2,84Std.Dev1,767,53Min0,160,7525% per0,571,62Med0,933,2875% per1,9813,47Max8,7624,75M ± Std.Err0,46 ± 0,151,21 ± 0,75Std.Dev1,471,68Min0,0010,1425% per0,030,16Med0,060,2475% per0,582,48Max6,075,43M ± Std.Err1,42 ± 0,242,17 ± 1,12Std.Dev2,342,18Min0,0010,0225% per0,060,04Med0,310,3875% per1,171,34Max10,269,83119Окончание таблицы 24ПоказательPR-BPGRmC1ПараметрПервичныйэндометриозn=82Рецидивэндометриозаn=12M ± Std.Err0,45± 0,091,12± 0,38Std.Dev0,761,19Min0,00050,0825% per0,040,07Med0,160,3275% per0,571,39Max4,863,07M ± Std.Err0,93 ± 0,210,61 ± 0,32Std.Dev1,840,47Min0,0050,0625% per0,030,08Med0,160,4175% per0,490,78Max9,862,83Анализ данных таблицы 24 и рисунка 23 выявил достоверное увеличениеуровней мРНК mER (p=0,0016) и ERβ (p=0,0024), а также достоверное снижениеэкспрессии мРНК ERα (p=0,0001) в образцах рецидива эндометриоза по сравнениюс первичным заболеванием.
Уровни экспрессии прогестероновых рецепторовmPR, РR-А, PR-B и PGRmC1 в образцах первичного эндометриоза и рецидива неимели достоверных различий (p>0,05).120Примечание:mRNA –экспрессия тестируемого гена по отношению к GAPDH(0,5^deltaCt*100)Рисунок 23 – Экспрессия генов рецепторов половых стероидов вэндометриоидной ткани у пациенток с первичным эндометриозом яичников ирецидивом заболевания121Таким образом, при исследовании экспрессии генов рецепторов половыхстероидов, а также белков, ответственных за ремоделирование ткани и апоптоз вобразцах тканей пациенток исследуемых групп были выявлены следующиемолекулярно-биологическиособенностиэндометриоидныхобразованийяичников:- в образцах тканей кистозного эндометриоза уровни экспрессии мРНКERβ, PR-A, PR-B, bcl-2, p-53 и MMP-9 были достоверно выше (p<0,05), чем внеизмененной ткани яичника;- в образцах железисто-кистозного эндометриоза уровни экспрессии мРНКPR-A, PR-B и MMP-9 были достоверно выше (p<0,05), а мРНК PGRmC1 –достоверно ниже (p<0,05), по сравнению с неизмененной яичниковой тканью;- в ткани кистозного эндометриоза установлено достоверное снижение(p<0,05) экспрессии мРНК TIMP1, а также достоверное повышение (p<0,05)экспрессии мРНК PR-A, PGRmC1 и bcl-2, по сравнению с образцамижелезисто-кистозного эндометриоза;- в образцах эндометриоидной ткани пациенток с рецидивом послеоперативного и гормонального лечения обнаружено достоверное снижение(p<0,05) экспрессии гена рецептора PGRmC1, по сравнению с пациентками безрецидива заболевания.
![](https://s.studizba.com/z.php?f=/templates/si/i/noavatar.png&w=100&h=100&t=1"){kind=avatar}
