Диссертация (1174314), страница 14
Текст из файла (страница 14)
Программа амплификации: 1 цикл: 10:00 мин – 950С, 2-40 циклы:00:15 мин - 950С; 01:00 мин - 600С.70Реакцию плавления проводили по следующим циклам: 1 цикл: 01:00 мин –950C; 2 цикл: 01:00 мин – 550С;3-84 цикл: 00:10 мин – 550С.На рисунке 2a представлены примеры кривых амплификации полученныхкДНКнаприбореiCycleriQ5real-timePCR(BioRad,Германия)синтеркалирующим красителем SYBR Green I, на рисунке 2b показаны типичныекривыеплавления,применяемыедляопределениякачествапродуктовамплификации.аbРисунок 2 – Кривые амплификации (a) и кривые плавления (b) кДНК напримере генов Gapdh, mER, PR-AДля оценки числа копий мРНК применялся delta Сt-метод относительногоопределенияколичествапоформуле71(1/2)^deltaCt,гдеdeltaCt=Ct(mER)−Ct(GAPDH) и 2^ (-delta delta Ct), где delta delta Ct = delta Ct (припатологии) - delta Ct (контрольная ткань).Статистический анализ данных проводился по общепринятым методамвариационной статистики с использованием пакета лицензионных компьютерныхпрограмм «Microsoft Excell 2010», «Statistica v 10.0» StatSoft., Inc.
(США). Дляколичественных параметров определен характер распределения каждого из них,который приближенно соответствовал нормальному распределению при величинеэксцесса от -2 до 2. Для каждого количественного параметра рассчитаныхарактеристики нормального распределения: среднее значение, стандартноесреднее отклонение, границы распределения совокупности. Гауссов характерраспределений позволил использовать параметрические методы сравнения.
Сиспользованием лицензионной программы Statistica v 10.0 на основанииполученных характеристик распределений выполнен расчет статистическойзначимости отличия рассматриваемых параметров по двустороннему критериюСтьюдента, достоверными считались результаты при определении уровнязначимости p≤0,05.Для оценки найденного маркера применялся ROC-анализ в составестатистической программы GraphPad Prism 5.0. Для ROC-анализа использовалисьчувствительность,специфичностьииндексЙодена,рассчитываемыепоформулам: SENS (Se) = TP/(TP+FN); SPEC (Sp)=TN/(FP+TN); YDN (J) = мах(SENS + SPEC – 1), где: SENS – чувствительность, SPEC – специфичность, YDN –индекс Йодена, TP – число истинноположительных (число положительныхпримеров,спрогнозированныхистинноотрицательных,какFP – числоложноотрицательных предсказаний.72положительные),TN – числоложноположительных,FN – числоГЛАВА III.
ДИАГНОСТИКА ЭНДОМЕТРИОИДНЫХ ОБРАЗОВАНИЙЯИЧНИКОВ3.1 Ультразвуковая диагностика эндометриоидных образований яичников сучетом варианта строенияСогласно поставленной цели и задачам нами оценены эхографическиеособенности двух вариантов строения эндометриоидных образований яичников.Анализируя эхографическую картину до оперативного вмешательства, мыоценилирасположение,размер,структуруэндометриоидныхобразованийяичников, толщину и строение стенки, характер содержимого, а также наличие исостояние неизмененной ткани яичника у обследованных больных с учетом двухвариантов эндометриоидного строения – кистозного и железисто-кистозного.Размеры эндометриоидных образований у пациенток исследуемых групппредставлены в таблице 13.Согласно данным, представленным в таблице 13, размер эндометриоидныхобразований яичников у наблюдаемых I группы с кистозных вариантомэндометриоидных образований колебался в интервале от 30 до 120 мм и составилв среднем 80,4 7,1 мм; более, чем у половины больных (55,0%) размеробразований был от 71 до 100 мм, у 16 (14,7%) – более 100 мм и только у 3 (2,8%)– менее 40 мм.В подавляющем большинстве наблюдений 83 (76,6%) эндометриоидныеяичниковые образования у больных с кистозным вариантом располагались сзадиили сбоку от тела матки.У больных с железисто-кистозным эндометриозом яичников (II группа)размер эндометриоидных образований не превышал 40 мм во всех наблюдениях,за исключением 1 пациентки IIB подгруппы, у которой размер эндометриодногообразования был 43-45 мм.
У 61 (95,3%) пациенток II группы данный показательколебался в интервале от 11 до 40 мм, у наибольшего количества больных (43,8%)был 21-30 мм.73Таблица 13 – Величина эндометриоидных образований яичников уобследованных больныхI группаn=109Размеробразования,ммАподгруппаn=78II группаn=64Вподгруппаn=31Aподгруппаn=39Всегоn=173Bподгруппаn=25Абс.%Абс.%Абс.%Абс.%Абс.%менее 10,0----25,1--21,210,1-20,0----923,1416,0137,520,1-30,0----1743,61144,02816,230,1-40,033,8--1128,2936,02011,640,1-50,056,413,2--14,074,150,1-60,067,739,7----95,260,1-70,0911,6619,4----158,770,1-80,01417,9825,8----2212,780,1-90,01823,1722,6----2514,590,1-100,01012,839,7----137,5100,1-110,079,013,2----84,6110,1-120,067,726,5----84,6Средний диаметр эндометриоидных образований яичника у больныхисследуемых групп представлен на рисунке 3.Поданным,представленнымнарисунке3,среднийдиаметрэндометриодных образований у пациенток с железисто-кистозным вариантом(II группа) был достоверно (p<0,05) меньше, чем у больных с кистознымвариантом (I группа).
Достоверных различий между показателями в исследумыхгруппах с учетом локализации образований (односторонняя, двусторонняя)выявлено не было.74* - p<0,05 по сравнению с показателями в I группеРисунок 3 – Средний диаметр эндометриоидных образований у больныхисследуемых группЭхографическаякартина эндометриоидныхобразованийяичников у102 (93,6%) обследованных I группы характеризовалась наличием однокамерногоэхопозитивного внутреннего содержимого с мелкодисперснойвзвесью, несмещаемой при тракции ультразвуковым датчиком (рисунки 4 и 5).Только у 7 (6,4%) наблюдаемых отмечена смещаемость взвеси приперкуссии ультразвуковым датчиком эндометриоидного образования яичника.Индивидуально выявлено, что подобная эхографическая структура определялась упациенток с длительностью заболевания не более 6-7 месяцев.Мы не выявили каких-либо изменений внутренней структуры и величиныэндометриоидныхобразованийприкистозномвариантестроения,динамическом обследовании в различные фазы менструального цикла.75приРисунок 4 – 2D-УЗИ: ТВ–сканирование.
Двусторонние эндометриоидныеобразования яичниковРисунок 5 – 2D-УЗИ. ТВ–сканирование. Одностроннее эндометриоидноеобразование с характерным мелкодисперстным содержимым76Неоднородностьвнутреннегостроенияэндометроидныхобразованийимела различные акустические структуры в виде плотных пристеночныхгиперэхогенных включений овальной или неправильной формы у 9 (8,2%)пациенток величиной от 3 до 7 мм в диаметре. Нередко визуализировалсяакустическийэффектусиления.Подобныеэхографическиеструктурыопределялись у больных с кистозным вариантом строения и с длительнымпериодом заболевания от 3 до 5 лет. У 15 (13,4%) пациенток в структуреобразования визуализировались различной формы и величины единичные и/илимножественные включения с высокой эхогенностью, в сравнении с внутреннимсодержимым.Наиболее характерным эхографическим признаком эндометриоидногообразования яичника являлось наличие двойного контура стенки.
Важноподчеркнуть, что двойной контур чаще встречался у наблюдаемых с кистознымвариантом эндометриоза яичников, и при персистенции эндометриоидногообразования более 4-5 лет от начала заболевания. Нередко на внутреннейповерхности образования визуализировались локусы повышенной эхогенноститолщиной 3-5 мм. У 26 (27,7%) больных с кистозным вариантом строенияэндометриоидногообразованияфолликулярныйаппаратотчетливоневизуализировался. Это были пациентки, у которых величина образованияварьировала от 5,0 до 7,0 и более сантиметров в диаметре. Одной из особенностейэндометриоидных образований яичников у пациенток с кистозным вариантомстроения отмечена значительная толщина стенки, которая колебалась от 2,5 до6,0 мм, составляя, в среднем, 4,2±1,3 мм и визуализировалась у большинстванаблюдаемых86 (78,8%).
На нижнем полюсе эндометриоидного образованиявизуализировался уплощенный яичник в виде тонкой ленты с небольшими 2-3 ммв диаметре с единичными в одном срезе(фолликулярныйаппарат).Вбольшинствегипоэхогенными включенияминаблюдений62(67,6%)эндометриоидные образования локализовались эксцентрично, у одного изполюсов яичника.77У 47 (73,0%) эндометриоидные образования лоцировались непосредственноу ворот яичника.
Объем неизмененной ткани яичника в I группе у большинствапациенток у 73 (66,9%) колебался от 4,9 до 8,4 см3, составляя, в среднем, 5,7±2,3см3. Визуализировались фолликулы размером 5-6 мм в диаметре, в одном срезеопределялось не более 6 фолликулов. У 28 (25,6%) в структуренепосредственно прилежащей к образованию,яичника,определялись анэхогенныевключения, деформированные, оттесненные несколько к периферии серповиднойили булавовидной формы.
Количество антральных фолликулов варьировало от 3до 5 в одном ультразвуковом срезе. У 4 (3,7%) наблюдаемых, несмотря на то, чтообъем неизмененной ткани яичника варьировал от 5,6 до 9,7 см3, количествовизуализируемыхжидкостныхвключенийнеправильнойформы,деформированных, оттесненных к периферии, не превышало 3-4.Нами выявлено не только изменение формы визуализируемых фолликулов,но и их неравномерная плотность расположения. Количество антральныхфолликулов, предлежащих к центральной части, было в 1,3 раза меньше посравнению с периферической локализацией таковых.У 4 (3,7%) наблюдаемых с кистозным вариантом эндометриоидногообразования неизменная ткань яичника отсутствовала.При ЦДК в стенке эндометриоидного образования определялся кровоток.ИР варьировал от 0,47 до 0,51, составляя в среднем 0,49 ± 0,03. При визуальнойоценке характера кровоснабжения эндометриодных образований у больных, зонываскуляризациинаблюдалисьу47(52%)из91пациентки;кровотокхарактеризовался как умеренный в 16 (34,0%) наблюдениях, и как слабый в 31(66%).
У 38 (41,8%) обследованных больных I группы визуализируемыеобразования были аваскулярными.При оценке морфофункционального состояния яичников вменструальногоцикла,визуализацияиростдоминантногоI фазуфолликулаустановлены у 27 (24,7%) наблюдаемых больных с односторонним кистознымэндометриозом (IA подгруппа) и у 4 (3,7%) с двусторонними эндометриоиднымиобразованиями яичников (IB подгруппа).78Впоследствии признаки овуляциинаблюдались только у каждой второй. У каждой третей выявлена персистенцияфолликула со сниженной перифолликулярной перфузией.
У 48 (44%) пациенток скистозным эндометриозом, доминантный фолликул визуализировался только на14-16 день менструального цикла, в тоже время лишь у каждой третьейопределялись признаки овуляции. Визуализировалось желтое тело на 23-25 деньменструальногоцикласобедненнымкровотоком.Приэнергетическойдопплерографии визуализировались единичные локусы кровотока, не подлежащиеколичественнойоценке.Персистенцияфолликуласосниженнойперифолликулярной перфузией выявлена у 25 (43%).
![](https://s.studizba.com/z.php?f=/templates/si/i/noavatar.png&w=100&h=100&t=1"){kind=avatar}
