Диссертация (1174300), страница 27
Текст из файла (страница 27)
Отмечаласьтенденция к более высокому уровню спонтанной продукции IL1β при наличиигенотипа IL1B rs16944*CС (pcor=0,073). В то же время у носителей гомозиготногогенотипа IL1B rs16944*TT уровень митоген-индуцированной продукции IL1βоказался незначительно выше, чем у носителей аллеля IL1B rs16944*C (pcor=0,099).У пациентов с гомозиготным генотипом IL1B rs16944*CС было выявленозначительно более высокое содержание IL6 в сыворотке, чем у пациентов с аллелемIL1B rs16944*T (p=0,011, pcor=0,011). Кроме того, отмечалась тенденция кповышению уровня спонтанной продукции IL6 при наличии генотипа IL1Brs16944*CС (pcor=0,074). В то же время у гетерозигот (генотип IL1B rs16944*CT)уровень IL6 в сыворотке крови и при спонтанной продукции оказался существеннониже, чем у гомозигот в целом (p=0,0005 (pcor=0,0005) и p=0,007 (pcor=0,007)соответственно).
Положительные показатели спонтанной продукции IL10 былизарегистрированы только у пациентов с генотипом IL1B rs16944*CС, в то время какпри наличии аллеля IL1B rs16944*T наблюдались лишь нулевые значения (p=0,005,pcor=0,010). Следует также отметить, что у носителей гомозиготного генотипа IL1Brs16944*СС уровень спонтанной продукции TNFα оказался незначительно выше,чем у носителей аллеля IL1B rs16944*T (pcor=0,063).При изучении полиморфного локуса IL2-IL21 rs6822844 было показано, чтоу гомозигот с генотипом IL2-IL21 rs6822844*GG содержание IL6 в сыворотке иуровень его спонтанной продукции были значительно выше, чем у гетерозигот(генотип IL2-IL21 rs6822844*GT) (p=0,023 (pcor=0,022) и p=0,016 (pcor=0,015)соответственно) (генотип IL2-IL21 rs6822844*TT отсутствовал у обследованныхпациентов).Исследование полиморфного локуса IL6 rs1800795 позволило установить,что уровень спонтанной продукции IL6 у носителей гомозиготного генотипа IL6rs1800795*CC был существенно ниже, чем у носителей аллеля IL6 rs1800795*G(p=0,039, pcor=0,037).
При этом у пациентов с гомозиготным генотипом IL6139rs1800795*GG соответствующий показатель оказался несколько выше, чем упациентов с аллелем IL6 rs1800795*C, однако различия достигли лишь уровнятенденции (pcor=0,082). У гетерозигот (генотип IL6 rs1800795*GC) была отмеченатенденция к снижению уровня митоген-индуцированной продукции IL10, всравнении с гомозиготами в целом (pcor=0,078).При анализе полиморфного локуса IL10 rs1800872 у пациентов с генотипомIL10 rs1800872*AA был зарегистрирован существенно более высокий уровень IL1βв сыворотке крови, а также при митоген-индуцированной продукции, в сравнениис пациентами с аллелем IL10 rs1800872*С (p=0,005 (pcor=0,009) и p=0,046(pcor=0,046) соответственно).
В то же время оказалось, что уровень спонтаннойпродукции IL6 при наличии генотипа IL10 rs1800872*CС был значительно выше, апри наличии генотипа IL10 rs1800872*CA – значительно ниже, чем при отсутствиисоответствующих генотипов (*CС против *AA+*CA, p=0,011 (pcor=0,012); *CAпротив *CC+*AA p=0,028 (pcor=0,027)).Исследование полиморфного локуса MIF rs755622 позволило установить, чтосодержание IL6 в сыворотке крови при наличии генотипа MIF rs755622*СC былозначительно выше, а при наличии генотипа MIF rs755622*GG – значительно ниже,чем при отсутствии соответствующих генотипов (*СС против *GG+*GC, p=0,036(pcor=0,036); *GG против *CC+*GC, p=0,018 (pcor=0,018)).
Медиана данногопоказателя у гетерозигот (генотип MIF rs755622*GC) находилась в промежуткемежду значениями медиан гомозигот. Кроме того, была отмечена тенденция кболее низкому уровню митоген-индуцированной продукции IL1β у носителейгенотипа MIF rs755622*GG, чем у носителей аллеля MIF rs755622*С (pcor=0,089).ИсследованиеполиморфноголокусаNFKB1rs28362491позволилоустановить наличие взаимосвязи генотипа NFKB1 rs28362491*ID c более высокимуровнем спонтанной продукции IL6, в сравнении с остальными генотипами(p=0,046, pcor=0,045). Кроме того, положительные показатели спонтаннойпродукции IL10 были зарегистрированы только у гетерозигот (генотип NFKB1rs28362491*ID) и не наблюдались у гомозигот (p=0,026, pcor=0,035).
В то же времяу носителей генотипа NFKB1 rs28362491*II уровни спонтанной продукции IL1β и140IL6 были несколько ниже, чем у носителей аллеля NFKB1 rs28362491*D, однакоразличия достигли лишь уровня тенденции (pcor=0,063 и pcor=0,070).При изучении полиморфного локуса PADI4 rs2240336 было показано, что уносителей генотипа PADI4 rs2240336*AA уровни спонтанной продукции IL1β иIL6 были значительно выше, чем у носителей аллеля PADI4 rs2240336*G (p=0,005(pcor=0,003) и p=0,028 (pcor=0,027) соответственно). В то же время отмечаласьтенденция к снижению уровня спонтанной продукции IL1β у пациентов сгенотипом PADI4 rs2240336*GG (pcor=0,060).Ассоциаций полиморфных вариантов локусов TNFA rs1800629, IL2RArs2104286, CTLA4 rs3087243, PTPN22 rs2476601 с изученными показателямицитокинового профиля у больных с ЮИА установлено не было (p>0,05).
В ходеисследования полиморфного локуса CTLA4 rs3087243 было отмечено, что приналичии гомозиготного генотипа CTLA4 rs3087243*GG уровень спонтаннойпродукции IL6 был незначительно выше, чем при наличии аллеля CTLA4rs3087243*A (pcor=0,087). При этом у носителей гомозиготного генотипа CTLA4rs3087243*AA уровень IL6 в сыворотке был незначительно ниже, чем у носителейаллеля CTLA4 rs3087243*G (pcor=0,077).
В то же время была отмечена тенденция кповышению сывороточного уровня IL1β у гетерозигот (генотип CTLA4rs3087243*GA), в сравнении с гомозиготами в целом (pcor=0,069).Сведения о функциональном значении полиморфного локуса TNFArs1800629 во многом противоречивы [74, 285]. Согласно данным рядаисследований, присутствие редкого аллеля TNFA rs1800629*А было ассоциированос повышением экспрессии гена TNFA и продукции TNFα, однако в других работахуказанные результаты не подтвердились [23, 33, 221, 285, 290].
В нашей работетакже не было установлено взаимосвязи полиморфных вариантов локуса TNFArs1800629 с изученными показателями цитокинового профиля у больных с ЮИА.Тем не менее наблюдалась ассоциация генотипа TNFA rs1800629*AA сосниженным риском развития ЮИА (у девочек), а аллеля TNFA rs1800629*A – сповышенной вероятностью легкого течения ЮИА (у мальчиков). Кроме того, для141аллеля TNFA rs1800629*A в составе гаплотипа TNFA rs1800629*А - LTArs909253*G была установлена взаимосвязь со сниженным риском недостаточногоответа на метотрексат при ЮИА (у девочек) и подтверждена его роль в качествемаркера легкого течения ЮИА (у мальчиков). При этом было установлено, чтоаллель TNFA rs1800629*G в составе гаплотипа TNFA rs1800629*G - LTArs909253*G ассоциирован с повышенным риском развития ЮИА в целом (умальчиков) и его вариантов: РФ-негативного полиартикулярного (у мальчиков),персистирующего олигоартикулярного (у девочек), энтезит-ассоциированного (умальчиков) и псориатического (в целом), и в то же время – со сниженным рискомгипериммуноглобулинемии класса G (у девочек) при ЮИА.При исследовании полиморфного локуса LTA rs909253 Pociot et al.
(1991,1993) было показано, что у здоровых носителей генотипа LTA rs909253*AAуровень продукции TNFα и IL1β стимулированными (липополисахаридом ифитогемагглютинином) моноцитами был существенно выше, чем у таковых сгенотипом LTA rs909253*AG [28, 67]. В то же время авторами не было установленовзаимосвязи генотипов указанного локуса с секрецией TNFα общим пуломпериферических мононуклеаров (без выделения моноцитов), что отчастисогласуется с результатами нашей работы [67]. Согласно данным рядаисследований, наличие аллеля LTA rs909253*G обусловливает повышениетранскрипционной активности гена LTA [118, 289].
Однако в отношенииассоциацииполиморфныхвариантовлокусаLTArs909253суровнеминдуцированной продукции LTα периферическими мононуклеарами приводятсяпротиворечивые сведения: согласно одним авторам, повышение данногопоказателя маркирует аллель LTA rs909253*A, согласно другим – LTA rs909253*G,согласно третьим – взаимосвязь отсутствует [67, 219]. Нами была установленаассоциация генотипа LTA rs909253*AA с повышением спонтанной продукции IL6в культуре клеток цельной крови пациентов с ЮИА. Кроме того, было показано,что генотип LTA rs909253*AA при ЮИА служит рисковым маркером в отношенииформирования гипериммуноглобулинемии класса G (у девочек) и более раннегодебюта заболевания (у мальчиков), а генотип LTA rs909253*AG оказывает142протективный эффект в отношении дефицита IgA (у девочек).
В то же времяналичие генотипа LTA rs909253*AA оказалось взаимосвязано со снижением рискаразвития ЮИА (у мальчиков) и его вариантов: РФ-позитивного полиартикулярного(в целом), РФ-негативного полиартикулярного (у мальчиков) и энтезитассоциированного (у мальчиков), – а наличие генотипа LTA rs909253*AG – сповышением риска РФ-позитивного полиартикулярного (в целом) и энтезитассоциированного (у мальчиков) вариантов ЮИА. Кроме того, было показано, чтогенотип LTA rs909253*GG служит рисковым маркером в отношении развитияперсистирующего олигоартикулярного варианта ЮИА (в целом). С указаннымиданными во многом согласуются результаты, полученные при исследованиигаплотипов полиморфных локусов TNFA rs1800629 - LTA rs909253.При изучении локуса IL1B rs16944 Wen et al.
(2006) установили, что угомозигот по гаплотипу G-C-T полиморфных локусов -1470G>C, -511C>T(rs16944) и -31T>C гена IL1B уровень липополисахарид-индуцированнойпродукции IL1β в культуре клеток цельной крови был существенно выше, чем угомозигот по гаплотипу С-T-C [107]. Кроме того, в экспериментах по временнойтрансфекции гаплотип G-C-T указанных локусов маркировал значительное, всравнении с гаплотипом С-T-C, повышение липополисахарид-индуцированнойтранскрипционной активности репортерного гена [107]. В работе Iacoviello et al.(2005) было показано, что уровень липополисахарид-индуцированной продукцииIL1β в культуре моноцитов здоровых индивидов был существенно выше приналичии генотипа IL1B rs16944*CC, в сравнении с генотипом IL1B rs16944*TT[222].
В то же время Chen et al. (2006) и Hall et al. (2004) было показано, что аллельIL1Brs16944*Tмаркируетповышениелипополисахарид-индуцированнойтранскрипционной активности репортерного гена в культуре моноцитов линииTHP-1 (в экспериментах с применением временной трансфекции), а генотип IL1Brs16944*TT ‒ повышение липополисахарид-индуцированной продукции IL1β вкультуре клеток цельной крови здоровых индивидов и пациентов с РАевропейского и афроамериканского происхождения [92, 257]. Указанный эффекталлеля IL1B rs16944*T был максимально выражен в присутствии аллеля IL1B -14331*С, т.е. для гаплотипа T-C соответствующих локусов [92, 257].
Laddha et al.(2014) была установлена ассоциация генотипа IL1B rs16944*TT c повышениемэкспрессии гена IL1B в объединенной выборке пациентов с витилиго и здоровыхиндивидов из Индии [57]. При изучении полиморфного локуса IL1B rs16944 намибылапоказанавзаимосвязьгенотипаIL1Brs16944*CCсповышениемсывороточного уровня IL6 и уровня спонтанной продукции IL10, а генотипа IL1Brs16944*CT – со снижением уровня IL6 в сыворотке крови, а также спонтаннойпродукции IL1β и IL6 у пациентов с ЮИА, что отчасти согласуется с данными Wenet al. (2006) и Iacoviello et al.
![](https://s.studizba.com/z.php?f=/templates/si/i/noavatar.png&w=100&h=100&t=1"){kind=avatar}
