Диссертация (1174299), страница 8
Текст из файла (страница 8)
Распределение больных по возрасту представлено в таблице 2.1.Таблица 2.1 – Распределение пациентов основной группы и группы сравнения по возрасту (М±SE)ПолВозраст, летГруппа сравнения (русские)Мужчины62,3±7,0Женщины62,8±8,1Основная группа (мордва-эрзя)Мужчины58,9 ± 6,9Женщины63,9 ± 7,5Во вторую исследуемую группу вошли 32 мужчины (49,2%) и 33 женщины (50,8%), средний возраст которых составил 61,5±7,6 лет. Распределение больных по возрасту представлено в табл.
2.1.В первую контрольную группу (представители русской нации) вошли31 мужчина (50,8%) и 30 женщин (49,2%), средний возраст которых составил61,7±7,6 лет. Распределение указанных пациентов по возрасту представлено втаблице 2.2.Во вторую контрольную группу (представители этноса мордва-эрзя)вошли 33 мужчины (52,4%) и 30 женщин (47,6%), средний возраст которыхсоставил 50,0±7,3 лет.
Распределение больных по возрасту представлено втабл. 2.2.Учитывая степень тяжести общего состояния (оценка проводилась припомощи шкалы Orgogoso), больные были разделены на 3 подгруппы: с легкой, средней, тяжелой степенью тяжести общего состояния.48Таблица 2.2 – Распределение пациентов контрольных групп по возрасту(М±SE)ПолВозраст, летКонтрольная группа (русские)Мужчины62,3±7,0Женщины62,8±8,1Контрольная группа (мордва-эрзя)Мужчины49,1±8,1Женщины51,8±5,22.4 Клинические и инструментальные методы исследованияОбобщенная оценка клинического состояния больных, перенесших ИИ,проводилась при помощи шкалы NIHSS. Согласно классификации KasnerS.E. с соавторами (1999), балльной оценке по NIHSS, соответствуют три степени неврологического дефицита: < 5 баллов – легкий неврологический дефицит, 6-14 баллов – умеренный, > 15 баллов - тяжелый неврологическийдефицит.Кроме клинического обследования, ишемический характер инсультаподтверждался данными компьютерной томографии головного мозга.
КТпроводилось на аппарате Optima CT 660 64-среза, (производство “GeneralElectric” США) по программе Sequence, толщина выделяемого слоя и шагстола: 10 мм – для поверхностных отделов супратенториально, 5 мм – дляболее базальных отделов, для задней черепной ямки – 3 мм. Параметры томографии 130 кВ, 240 mAs, время сканирования 3 секунды. Матрица изображения 512 х 512.На рисунках 2.3 и 2.4 представлены изображения компьютерных томограмм головного мозга с признаками ИИ пациентов, включенных в исследование.49Рисунок 2.3 – Компьютерная томограмма головного мозга (ИИ в бассейнеправой средней мозговой артерии)50Рисунок 2.4 – Компьютерная томограмма головного мозга (ИИ в бассейнелевой средней мозговой артерии)51Лечение ИИ проводилось в соответствии с общепринятыми стандартами, в средних терапевтических дозах.Общее состояние всех пациентов, вошедших в контрольные группы,оценивалось, как удовлетворительное.Всеми участниками данного исследования (или их родственниками)подписывалось информированное согласие, и заполнялись предложенные иманкеты, в которых указывались место рождения и этническое происхождениедо третьего колена.
В исследование включались только пациенты, у которыхтри поколения родились и постоянно проживали на территории РеспубликиМордовия и относили себя к данном народу. Для исключения искажения получаемых генетических характеристик популяции за счет генетическогосходства из исследования были исключены родственники как минимум дотретьего поколения.Сведения о факторах риска (наличие гипертонической болезни, ишемической болезни сердца, перенесенных инфарктах миокарда и головногомозга, сахарном диабете, применяемых лекарственных препаратах, информацию об образе жизни, статусе курения, употреблении алкоголя) уточняли вовремя опроса самих пациентов и их родственников, а также из заполненныхими анкет.Измерение уровня систолического и диастолического артериальногодавления проводилось трижды на правой руке с помощью произвольногосфингоманометра.
Для оценки использовалось среднее значение всех измерений. Повышение систолического артериального давления до 140 мм. рт. ст.и более или/и диастолического артериального давления до 90 мм. рт. ст. иболее или/и регулярный прием гипотензивных препаратов расценивались какналичие у больного артериальной гипертензии.Критерием наличия ИБС считали указание на ранее перенесенный инфаркт миокарда или/и выраженную стенокардию, а критерием наличия ССЗ –ранее перенесенный инфаркт миокарда или/и выраженную стенокардию52или/и коронарную ангиопластику или/и аорто-коронарное шунтированиеили/и инсульт.Всем больным проводилось измерение роста и массы тела, рассчитывался индекс массы тела (масса тела [кг] / рост [м]).
Критерием ожирениясчитали Индекс массы тела ≥30 кг/м² расценивался как наличие ожирения.В рамках исследования все пациенты были разделены на никогда некуривших и когда-либо куривших.При опросе о питании уточняли данные об употреблении алкоголя.Употребление этанола более 20 г в день считали за критерий злоупотребления алкоголем.Биохимическое исследование крови проводили при помощи автоматического биохимического анализатора производства компании … и стандартного набора диагностикумов и реактивов производства … .Для проведения биохимических анализов образцы крови брали натощак в специально предназначенные для исследования ваккутайнеры.
На момент взятия образцов крови, пациенты не принимали антикоагулянты. У всехпациентов определяли уровень глюкозы крови, показатели гемостаза и липидного спектра (общий холестерин крови (ОХ), триглицериды (ТГ), ЛПВП,ЛПНП – β-липопротеиды), рассчитывали индекс атерогенности.Содержание глюкозы определяли ферментативным гексокиназным методом. Критериями сахарного диабета было содержание сывороточной глюкозы крови натощак ≥7,0 ммоль/л или/и прием противодиабетических препаратов.В исследовании участвовали пациенты, не имеющие в анамнезе данныхо приеме статинов.
Критериями гиперхолестеринемии считали уровень общего холестерина сыворотки крови ≥6,2 ммоль/л. Низким уровнем холестерина ЛПВП считали значение <1,0 ммоль/л.Атеросклероз брахиоцефальных и периферических артерий диагностировали с помощью ультразвукового дуплексного исследования. Всем пациентам на 1-2-е сутки развития инсульта проводили дуплексное ультразвуко-53вое исследование брахиоцефальных артерий и сердца на аппарате экспертного класса «…» производства «…» (Япония). Для установления степени стеноза, проходимости сосудов, локализации сосудистого поражения применялисканирование позвоночных, общих, внутренних и наружных сонных артерий,а также доплерографию интра- и экстракраниальных отделов церебральныхартерий (рисунки 2.3, 2.4, 2.5).У всех пациентов проведено изучение семейного анамнеза по ССЗ. Онрасценивался как положительный при наличии у родственников 1-й степениродства инфарктов, инсультов, смерти от ССЗ в возрасте моложе 55 лет длямужчин и 65 лет для женщин или при наличии более 1 родственника с ИБС,особенно женского пола.2.5 Методы молекулярно-генетического исследования полиморфизмагеновДля исследования выбрано 2 гена-кандидата, которые согласно международным базам данных, ассоциируются с ИБС и инсультами.
Эти геныпринимают участие в различных патогенетических механизмах развитияССЗ: артериальной гипертензии, тромбообразования и др.Молекулярно-генетическое исследование проводилось на базе лаборатории Научно-технического центра «ДНК-диагностики и геномных исследований» ФГБОУ ВО «Национальный исследовательский Мордовский государственный университет им. Н.П.
Огарева».Для проведения данного раздела работы у всех обследуемых пациентовисследуемых групп при их информированном согласии, средним медицинским персоналом неврологического отделения проводился забор 3-5 мл венозной крови из кубитальной вены в стерильный полимерный контейнер, после чего проводили лабораторный фрагмент исследования в соответствие стребованиями к работам с использованием тканей и биологического материала человека.54Лабораторный фрагмент анализа включал ряд этапов:I этап – проведение полимеразной цепной реакции (ПЦР)ПЦР-метод позволяет избирательно синтезировать in vitro небольшиеучастки ДНК (дезоксирибонуклеиновой кислоты) длиной от нескольких десятков до нескольких пар нуклеотидов, используя в качестве матрицы любыеобразцы ДНК [18].
В данной работе в качестве матрицы использоваласьДНК, которая была выделена из венозной крови обследуемых пациентов.Анализ проводили исходя из расчета, согласно которому на каждые 10образцов ДНК отбирали по 3,0 мкл препарата ДНК-полимеразы в виде раствора фермента в буфере и прибавляли в пробирку со смесью реагентов дляпроведения ПЦР.Содержимое пробирки тщательно перемешивали и встряхивали намикроцентрифуге (Эппендорф, Германия).