Диссертация (1174291), страница 9
Текст из файла (страница 9)
Согласно шкале FDA49тестируемые препараты отвечают требованиям безопасности, если во всехопытных лунках степень ЦТД не более 1 балла.Оценка антиадгезивной и антитоксической активности вытяжек изкостного цемента с использованием предлагаемой антимикробной композициипри совместном культивировании с тест-микроорганизмами на моделикультуры фибробластовВ опытах по оценке антиадгезивной и антитоксической активности вытяжекиспользовали их субтоксические дозы. Пробирки Лейтона или планшеты снакладками Tissue Culture Coverslips с монослоем фибробластов, тестируемымпрепаратом и тест-микробом инкубировали от 3 минут до 4 часов при 37ºС втермостате.Затемклеткимонослояотмывалиотнеприкрепившихсямикроорганизмов многократной сменой среды Игла, фиксировали 96º этиловымспиртом, окрашивали по Романовскому-Гимзе и исследовали под микроскопом,определяя степень инфицированности монослоя и процент адгезии микроба посравнению с соответствующим контролем без тестируемого препарата попоказателю микробной нагрузки.Интенсивность процесса адгезии оценивали по следующим показателям:1)индекс адгезии (ИА) выражали средним числом бактериальных клеток на однойэукариотической клетке; 2) процент пораженных клеток монослоя (ПК%) – числоинфицированных клеток монослоя по оценке 100 клеток; 3) обсемененность 100клеток монослоя – микробную нагрузку (МН) – определяли по формуле МН= ИАх ПК%.
Процент подавления адгезии в присутствии тестируемого препаратавысчитывали как разницу между показателем микробной нагрузки в контроле(100%) и аналогичным показателем в опыте.Антитоксическое действие вытяжек определяли как способность препаратапредотвращать цитопатическое воздействие тест-микроорганизмов на культуруклеток. Данный показатель оценивалифибробластов по шкале FDA.поморфологическому состоянию502.2.5 Лучевые методы диагностикиРенгенологическоеисследованиеявляетсяобязательнымметодомдиагностики поздней перипротезной инфекции ТБС. Для определения состояниякомпонентов эндопротеза, их стабильности, оценки анатомического результаталечения выполнялась рентгенография таза с захватом обоих тазобедренныхсуставов, а больного сустава – в прямой и аксиальной проекциях.
Принеобходимостиприменяликомпьютернуютомографию(КТ),спиральнуюкомпьютерную томографию (СКТ) и магнитно-резонансную томографию (МРТ).КТ-исследование осуществлялось на аппаратах КТ МАХ, СКТ – на томографахLightSpeed VCT Select - 3,7 GE.Присвищевыхформахперипротезнойинфекциипроводилосьфистулография, позволяющая уточнить распространенность свищевых ходов и ихсвязь с эндопротезом и очагами деструкции в костях. На основании контрастнойфистулографии возможна дифференциальная диагностика поверхностной иглубокой форм перипротезной инфекции.
Перед выполнением фистулографии припомощи шприца эвакуируют содержимое свищевого хода, в свищ на всю глубинусвищевого хода вводят катетер, затем вводят контрастное вещество до тугогозаполнения свищевого хода и осуществляют рентгенографию.При получении отрицательных результатов исследования о наличиипатогенной микрофлоры пунктата бедра и отсутствии свищевых ходов и наличииклиническойкартинывоспалениявыполнялиУЗИдляопределенияместорасположения инфицированной гематомы или абсцесса. Ультразвуковойметод исследования применялся у пациентов в послеоперационном периоде принезаживающих ранах, длительном промокании повязки на операционной ране иухудшении лабораторных показателей в динамике.
УЗИ осуществляли нааппаратах Sonoline SL-1 (Siemens) и Xario (Toshiba, Япония) линейнымидатчиками с частотой от 5 до 12 МГц по методике M.T. van Holsbeeck сиспользованием режимов цветного доплеровского картирования (ЦДК) иэнергетического доплера (ЭД).512.2.6. Методики инструментальных исследованийИз инструментальных методов исследования всем больным перед операциейпроводились УЗИ органов брюшной полости и сосудов нижних конечностей,ФГДС, ЭКГ. ЭКГ как основной метод определения функционального состояниясистемы кровообращения регистрировали в 12 общепринятых отведениях всостоянии покоя.ФГДС выполняли на аппаратах «Olympus» (Япония).
При эндоскопическомисследовании оценивали выраженность и характер изменений в пищеводе,желудке и двенадцатиперстной кишке.2.2.6.1. Методика оценки функциональных результатов.Клиническая оценка результатов реэндопротезирования проводилась пооценочной шкале W.H.
Harris для тазобедренного сустава, позволяющий оценитьфункциональные исходы. Шкала Harris предполагает оценку 4 параметров: боль,функция, деформация, амплитуда движений. По каждому параметру суммируетсяопределенное количество баллов.Максимальное число баллов равно 100.
Сумма баллов от 100 до 90оценивается как отличная функция сустава, от 89 до 80 – как хорошая, от 79 до 70– как удовлетворительная и менее 70 – как неудовлетворительная.2.2.6.2. Методика оценки качества жизниКачество жизни пациентов после проведенного курса лечения перипротезнойинфекции оценивались по «Международной классификации функционирования,ограничения жизнедеятельности и здоровья» ВОЗ (2001).Методика заключалась в оценке ограничения жизнедеятельности по балльнойсистеме с использованием кодировки (табл. 2.7).Средивозможныхограниченийжизненныхфункцийупациентовперенесших эндопротезирование ТБС, были отобраны 20 параметров (табл.
2.8).52Баллы0123489Таблица 2.7Параметры кодировки показателей ограничения функцийв зависимости от их видаБарьерыХарактеристика ограниченийПоказателиограничений, %НетНикаких, ничтожные0-4Незначительные Незначительные, слабые5-24УмеренныеСредние, значимые25-49ВыраженныеВысокие, интенсивные50-95АбсолютныеПолные96-100Не уточненныеНе определеноНе применимоНе применимоТаблица 2.8Виды ограничения жизненных функций у пациентов,перенесших операции по поводу ранней перипротезнойинфекцииЖизненные функцииПоказатели ограниченияжизнедеятельности и здоровьяОщущение болиb280.0.1Функции движения суставовb710.0.1Функции стабильности суставовb715.0.1Функции подвижности костного аппаратаb720.0.1Структура тазовой областиs 740.0.1Структура нижней конечностиs 750.0.1Выполнение отдельных задачd 210.0.1Выполнение многоплановых задачd 220.0.1.2.3Выполнение повседневного распорядкаd 230.0.1Изменение позы телаd 410.0.1Поддержание положения телаd 415.0.1Перемещение телаd 420.0.1Поднятие и перенос объектовd 430.0.1Перемещение объектов ногамиd 435.0.1Ходьбаd 450.0.1.2Передвижение с помощью техническихd 465.0.1.2средствУход за частями телаd 520.0.1Физиологические отправленияd 530.0.1.2Одеваниеd 540.0.1.2Выполнение работы по домуd 640.0.1.253В случае соответствия выбранному диапазону показателей ограниченияжизнедеятельности и здоровья каждой функции присваивалось значение в одинбалл.
Общий результат оценивали по сумме баллов, определенных для всех 20функций.Качество жизни считалось неудовлетворительным при сумме баллов от 0 до5. При сумме баллов от 6 до 10 результат считался удовлетворительным; от 11 до15 – хорошим. Отличные результаты констатировались при 16-20 баллах.2.2.7. Методы статистического анализаВ первую очередь, был осуществлен сбор материалов, разработан единыйучетно-статистическийдокумент–формализованнаякартаобследованияпациента поздней перипротезной инфекцией тазобедренного сустава. Далееосуществляли статистический анализ, используя программу Statistica 6.1, вкоторой применяли модуль дисперсионного, дискриминантного анализа итаблицы сопряженности.Для сравнения количественных данных применяли критерий КраскелаУоллисаикоэффициентКендалладлямножественныхнезависимыхсовокупностей.Распространенность изучаемых признаков рассчитывалась как доля объектовисследования в группе, имеющих данное значение признака по отношению кобщему числу наблюдений и выражалось в процентах.
Степень достоверностиразличий сравниваемых параметров определяли по доверительной вероятности(p), был выбран уровень достоверности р<0,05.54ГЛАВА 3. МИКРОБИОЛОГИЧЕСКИЕ АСПЕКТЫ СОЗДАНИЯАНТИМИКРОБНОЙ КОМПОЗИЦИИ НА ОСНОВЕ КОСТНОГОЦЕМЕНТА С ГЕНТАМИЦИНОМ ДЛЯ ФОРМИРОВАНИЯ СПЕЙСЕРАС ПРОЛОНГИРОВАННЫМ ЭФФЕКТОМ3.1. Разработка и создание антимикробной композицииВ настоящее время ведется интенсивный поиск комбинаций из известныхлекарственных средств, эффективных в отношении возбудителей гнойносептических осложнений в травматологии и ортопедии. Ряд авторов исследоваликлинический эффект костного цемента с гентамицином при дополнительномвведении в него 3–4 г ванкомицина (Кильметов Т.А.
с соавт., 2014). При этом ни водном исследовании не показан истинный антимикробный эффект такойкомбинации в отношении референс- или клинических штаммов микроорганизмовс выявленным уровнем антибиотикочувствительности к изучаемым препаратам.Взадачунашегоисследованиявходиларазработкаантимикробнойкомпозиции с пролонгированным эффектом на основе костного цемента сгентамицином, которая сохраняет выраженное антибактериальное действие вотношениичувствительныхирезистентныхкантибиотикамштаммовмикроорганизмов в течение длительного времени по сравнению со стандартнымкостным цементом с гентамицином.В связи с быстрым развитием устойчивости патогенных микроорганизмов кантибиотикам нами использованы антисептики для создания антимикробнойкомпозиции.Вследствие резкого снижения потенциала ионизации серебра в повиарголе унанокластеров с размерами 1–2 нм с развитой поверхностью частиц легчегенерируются ионы серебра, обеспечивающие антимикробный эффект, который втысячи раз превышает таковой у коллоидных частиц.
Нанокластеры серебраявляютсядепонированнойформойионногосеребра,котороепостоянногенерируется по мере связывания повиаргола с биологическими субстратами, чеми обеспечено пролонгированное действие препарата в организме.55Одним из затруднений, связанных с используемыми в настоящее времялекарственными веществами, являются их плохая растворимость и низкаябиодоступность.Способностьвысокомолекулярногополивинилпирролидона(ПВП) к комплексообразованию определяет возможность его использования какиммобилизующего материала для многих биологически активных веществ (БАВ),таких как ферменты, антибиотики, антисептики. Присоединение БАВ к ПВПсущественно может изменить свойства БАВ, характер его транспорта в организме,а в ряде случаев – и повлиять на механизм фармакологического действия.
Важноезначение при этом имеет молекулярная масса ПВП. Таким образом, модификацияБАВ полимерами осуществляется для направленного изменения их свойств:снижениятоксичности,улучшениярастворимости,фармакокинетикиибиодоступности за счет комплексообразования (Афиногенов Г.Е., Панарин Е.Ф.,1993). Основной функцией растворимых ПВП является пролонгация действиялекарственных препаратов с улучшенной биодоступностью. Кроме того, ПВПиспользуют как заменитель синовиальной жидкости в форме лекарственногосредства.Антимикробные композиции на основе костного цемента с гентамицином,повиарголом, поливинилпирролидоном (ПВП) для формирования спейсераполучали в стерильных условиях. Применяли следующие смеси: в качествеконтроля – (1) порошок костного цемента Synicem 1G (Synimed, Франция) 40 г ссодержанием гентамицина 0,5 г (1,25%); разработанные композиции – (2)порошок костного цемента Synicem 1G 40 г с содержанием гентамицина 0,5 г,порошок ванкомицина (Эдицин) 4 г; (3) порошок костного цемента Synicem 1G 40г с содержанием гентамицина 0,5 г, порошок повиаргола 0,61 г (1%); (4) порошоккостного цемента Synicem 1G 40 г с содержанием гентамицина 0,5 г, порошокдиоксидина 0,61 г (1%); (5) порошок костного цемента Synicem 1G 40 г ссодержанием гентамицина 0,5 г, порошок повиаргола 0,62 г (1%), порошокдиоксидина 0,62 г (1%); (6) порошок костного цемента Synicem 1G 40 г ссодержанием гентамицина 0,5 г, порошок повиаргола 0,62 г (1%), порошокдиоксидина 0,62 г (1%), порошок ПВП 0,62 г (1%).56При добавлении 20 мл жидкого пластификатора к соответствующей смеси всоответствии с инструкцией фирмы-производителя получали пластичную массу, впроцессе полимеризации которой формировали полусферы весом 1 г на 96луночных полистироловых планшетах.
![](https://s.studizba.com/z.php?f=/templates/si/i/noavatar.png&w=100&h=100&t=1"){kind=avatar}
