Диссертация (1174248), страница 9
Текст из файла (страница 9)
У 5 беременных головная боль наблюдалась при умеренной44и у 9 при тяжелой преэклампсии. При этом эти жалобы беременные предъявлялив 58% при высоком и в 41% при низком артериальном давлении.Умерееная ПЭТяжелая ПЭЗРП IЗРП IIЗРП IIIРисунок 5 – Выраженность ЗРП при ПЭЗадержка роста плода была диагностирована у 56 новорожденных примассе тела менее 10 центилей для данного срока гестации.
При этом убеременных с преэклампсией ЗРП зарегистрирована в 16 наблюдениях. Из нихпри умеренной ПЭ ЗРП 1 степени выявлена у 4, 2 степени у 3, 3 степени у 1пациентки. При тяжелой ПЭ ЗРП 1 степени наблюдалась уже у 2, 2 степени у 5, 3степени у 1 беременной. При беременности, не связанной с ПЭ, ЗРП 1 степенизарегистрирована у 16, 2 степени у 13 и 3 степени у 11 новорожденных.В Таблице 5 представлены показания к операции кесарева сечения в группепациенток с диагнозом преэклампсия.45Таблица 5 – Показания к операции кесарева сечения в группе пациенток сдиагнозом преэклампсияПоказанияЧислоТазовое предлежание1Несостоятельный рубец на матке5Аномалии прикрепления плаценты2Экстрагенитальные заболевания2Нарастание тяжести преэклампсии15Критическое состояние плода2Острая гипоксия плода2Аномалии родовой деятельности2Всего31Общее количество преждевременных родов составило 33.
Перенашиваниебеременности имела место у 3 беременных. Методы индукции родовиспользовали у 83 пациенток.ЗРП была диагностирована у всех беременных с субкомпенсированной идекомпенсированной ПН. Субкомпенсированная форма ПН сопровождаласьпервой и второй степенью синдрома задержки роста плода. ДекомпенсированнаяПН сопровождалась ЗРП 2-й и 3-й степеней. Впервые ЗРП выявлена у 12пациенток в 25–30 недель, у 26 беременных в 31–35 недель, у остальных – после35недельбеременности.Хроническаявнутриутробнаягипоксиябылаустановлена у 24 (58%) пациенток с субкомпенсированной ПН, что в 2 раза чаще,чем при компенсированной ПН.
При данной степени тяжести ПН характерно нетолько увеличение частоты выявления хронической внутриутробной гипоксииплода, но и возрастание степени ее тяжести. Так, при первом обнаружении ЗРПначальные признаки гипоксии по данным кардиотокографии были нами выявленыу 16 беременных, умеренно выраженная гипоксия – у 24 пациенток.Диагностику плацентарной недостаточности проводили на основанииизучения роста и развития плода, функционального состояния плода, оценкисостояния плаценты и плацентарного кровообращения и показателей гемостаза и46метаболизма. При I степени регистрировали нарушение маточно-плацентарногоили плодово-плацентарного кровотока. При II степени выявляли нарушениематочно-плацентарного и плодово-плацентарного кровотока и при III степени –централизациюкровотока.плодово-плацентарногоКритическиенарушениякровотока,нарушениематочногоплодово-плацентарногокровотокапроявлялись нулевым или реверсивным диастолическим кровотоком в артериипуповины или аорте, нарушением маточного кровотока.Лечение ПН проводили под контролем функционального состояния плода иматочно-плацентарного кровотока, темпов роста плода.
При этом назначалипериферические вазодилятаторы, антикоагулянты и вспомогательные средства,усиливающиедействияосновных.Приназначениипериферическихвазодилятаторов, во избежание синдрома обкрадывания, лечение проводили сучетом индивидуальной чувствительности и переносимости, с использованиемхолтеров ЭКГ и давления. Длительность лечения ПН составила от 2 до 10 недель.КритериямиэффективноститерапииПНслужили:функциональноесостояние и рост плода, а также уровни маточно-плацентарного кровообращения.При положительном эффекте под действием терапии увеличивалось плацентарноекровообращение, улучшалось функциональное состояние плода – характерно длякомпенсированнойплацентарноеПН.Прикровообращение,сомнительномаэффектефункциональное–увеличивалосьсостояниеплоданеизменялось. При отрицательном эффекте – под влиянием терапии не происходилоулучшения исследуемых показателей, они прогрессивно снижались – характернодля декомпенсированной ПН.Для профилактики РДС применяли дексаметазон по схеме, указанной вклинических рекомендациях.В группе беременных с ПН показанием к кесареву сечению в 5наблюдениях служили критическое состояние плодов и в 10 ЗРП 2-3-й степени.Обезболивание родов было проведено у всех беременных с помощьюэпидуральной анестезии.
Кесарево сечение – у 18 с помочью спинальной и у 29 –эпидуральной аналгезии.47В 167 наблюдениях родились живые дети. Оценка по шкале Апгар на 1минуте колебалась от 3 до 5 баллов в 4 наблюдениях, от 4 до 7 баллов у 11новорожденных. Масса тела новорожденных составила от 880 до 4528 граммов),длина тела от 33 до 59 см). Крупные плоды родились у 5 родильниц. Из общегоколичества детей 35 поступили в отделение реанимации и интенсивной терапииноворожденных (ОРИТН) из-за незрелости легочной ткани и респираторныхпроблем.Подробная клиническая характеристика наблюдений будет представлена всоответствующих главах.2.3. Методики исследованияДиагностика развития плода.
Развитие плода во время беременностиопределяли с помощью ультразвуковой антропометрии. При этом измерялибипариетальный размер головки, диаметры груди и живота и длину бедреннойкости плода. При отставании этих размеров от средне популяционных,имеющихся во всех справочниках и ультразвуковых аппаратах, на 2 неделиставили диагноз ЗРП 1-й степени, от 2 до 4 недель – ЗРП 2-й степени и более 4недель – ЗРП 3-й степени.
Окончательный диагноз ЗРП устанавливался послеродов на основании данных массы плода. Нормативные параметры находилисьмежду 75-й и 25-й перцентильными кривыми, 1-я степень ЗРП 25-10 кривая, 2-ястепень 10-3 кривая, 3-я степень – ниже 3 кривой. Использовали также массоростовой коэффициент: норма – выше 60, ЗРП 1-й степени – 55–60, 2-й степени –50–55, 3-й степени – ниже 50. Функциональное состояние плода во времябеременности и родов оценивалось с помощью методов функциональнойдиагностики: КТГ и допплерометрии сосудов матки, пуповины и плода. УЗисследования проводили на аппарате Voluson 530 MT фирмы Kretztechnik,Voluson Е8, фирмы General Electric, с использованием датчиков: RIC 5-9 D (4–9МГц), С1-5D (2–5 МГц), RAB 4-8 D (2–8 МГц), КТГ – фетального монитора GE(Genеral Еlectric) Corometrics (250CX), США.482.4.
Определение молекулярно-биологических факторовСбор образцов. Пробы свежевзятой (с антикоагулянтом) периферическойкрови пациентов центрифугировали при 400 g 10 мин, плазму отбирали в чистыесухие пробирки, далее плазму и красные осадки замораживали и хранили при 80 оС.Внеклеточную и клеточную ДНК выделяли методом экстракцииорганическими растворителями, соответственно, из плазм и красных осадков.Концентрацию клеточной ДНК определяли спектрофотометрически придлине волны 260 нм с учетом светорассеяния (320 нм) в кварцевой кювете придлине хода луча 1 см.Концентрацию внеклеточной ДНК определяли флуориметрически сиспользованием интерколирующего красителя Pico Green (Invitrogen).Содержание исследуемых повторов в составе ДНК определяли методомнерадиоактивной количественной дот-гибридизации.
Для этого пробы ДНКизвестной концентрации и набор калибровочных образцов с известнымсодержаниемповторовнитроцеллюлозныегеномафильтрыи,наносилипослевнесколькихтемпературнойповторахнаиммобилизации,инкубировали с набором биотинилированных олигонуклеотидных зондов, сигналвизуализировали при помощи коньюгата стрептавидин-щелочная фосфатаза(Merck) и колориметрического субстрата.Содержание копий рассчитывали по калибровочной зависимости припомощикомпьютерногоанализаизображений,вычисляяинтегральнуюинтенсивность каждого окрашенного пятна.Нуклеазную активность плазм (ДНКаза 1) исследовали при помощиметода радиальной диффузии в агарозном геле.Методы статистического анализа.
Для статистической обработки данныхприменяли прикладной пакет программ SPSS 15.0. Использовали описательнуюстатистику и корреляционный анализ по методу Спирмена. Для поискадостоверных различий между выборками использовали критерии Вилкоксона и49Манна – Уитни. Кроме того, данные подвергали частотному анализу путемпостроения кросс-таблиц. Различия считали статистически значимыми призначении p < 0,05.50Глава 3. РЕЗУЛЬТАТЫ СОБСТВЕННЫХ ИССЛЕДОВАНИЙ И ИХОБСУЖДЕНИЕ3.1. Изменение концентрации циркулирующей внеклеточной ДНК и еехарактеристик в крови при нормальной беременностиКак известно, внеклеточная циркулирующая ДНК (вкДНК) поступает вкровоток преимущественно из погибших клеток, и ее концентрация можетотражать интенсивность гибели клеток в организме.
Нами были обследованы 80здоровых пациенток для выявления нормативных параметров вкДНК. 1-ю группусоставили 40 небеременных в возрасте 22–40 лет из студенток и ординаторовмедицинского учреждения (волонтеров). Во 2-ю группу объединены пациентки снормально протекающей беременностью сроком более 37 недель (N = 40),которые родили здоровых детей без признаков гипоксии и ЗРП.Проведенные исследования показали, что в 1-й группе (небеременных)концентрация вкДНК варьирует от 11 до 113 нг/мл (среднее: 74±30; медиана 79нг/мл). Во 2-й группе (пациенток при физиологической беременности) передродами концентрации вкДНК варьируют от 2 до 241 нг/мл (среднее: 84±72;медиана 71 нг/мл).
На Рисунке 6A приводятся значения концентраций вкДНК вплазме крови небеременных (группа 1) и беременных пациенток (группа 2). Вгруппе 2 отмечается больший разброс значений концентраций вкДНК посравнению с группой 1: коэффициент вариации этого параметра беременныхзначительно выше (0,9), чем небеременных (0,4). При этом в этой группе былозарегистрировано 3 подгруппы пациенток:1-я – у которых вкДНК была ниже уровня,2-я – на уровне средних значений,3-я – выше значений небеременных.Известно, что нормальная беременность сопровождается увеличениемуровня апоптоза клеток организма матери и плода (в основном, клеток плаценты)[Al Nakib M., Desbrière R., Bonello N.