Диссертация (1174248), страница 4
Текст из файла (страница 4)
В этом случае определяют не конкретный мутантный ген, аобщую концентрацию вкДНК материнской крови или вкДНК плода. В составевкДНК плазмы крови матери вкДНК плода не превышает 10% от общегоколичества вкДНК. Основным источником вкДНК плода в крови матери считаютгибнущие в результате некроза или апоптоза клеток плаценты [Smid M., 2011].Обнаружена высокая корреляция между концентрацией в плазме материпоследовательностей материнского генома и вкДНК плода [Lo Y. M., 1999].Молекулярно-биологическаяосновапреэклампсии.Какизвестно,преэклампсия является материнской реакцией на патологическую плацентацию.Так как плацента непрерывно реконструируется во время беременности,внеклеточныенуклеиновыекислотыэмбриональногоиплацентарногопроисхождения могут быть обнаружены в материнском кровообращении в ходенормальной беременности.Плацентапредставляетсобойсосудистуюструктуруспервичнымворсистым слоем цитотрофобластных (недифференцированных) и синцитиотрофобластных (дифференцированных) клеток.
Внутренние вторичные ворсинкиобразованы мезенхимными клетками, макрофагами, фибробластами и клеткамикрови плода. Синхронной васкуляризации плаценты принадлежит центральнаяроль в трансплацентарном обмене между матерью и плодом. Это достигаетсяпосредством нескольких этапов, васкулогенеза (образования новых кровеносныхсосудов)иангиогенеза(ростановыхкровеносныхсосудов).Фенотипцитотрофобласта изменяется от эпителиального до эндотелиального типа иназываться псевдо васкулогенезом [Mutter W.
P., Karumanch S. A., 2008].Спиральные артерии матки подвергаются модификациям для облегчения притокакрови к плаценте [Whitley G. S., Cartwright J. E., 2010]. С этой целью клеткицитотрофобласта плаценты последовательно дифференцируются в ворсистыйтрофобласт (EVT) и вторгаются в децидуа спиральных артерий, а затеммиометрий. Этот процесс связан с экспрессией молекул, находящихся на19поверхности, таких как: хемокиновый рецептор (CCR10), адгезии сосудистыхклеток (α6β4, αVβ6, E-cadherin, CD324 в αVβ3, α1β1, VE-cadherin, CD 144, VCAM1, CD106, ECAM-1, адгезии тромбоцитов CD31, протеолитических ферментовMMP, матричных металлопротеиназ 1, 2, 3, 9 и 14 и катепсинов. Все это приводитк деградации внеклеточного матрикса.
По данным [Laresgoiti-Servitje E., GomezLopez N., Olson D. M., 2010; Cartwright J. E., Fraser R., Leslie K., 2010], активаторурокиназного плазминогена (сериновая протеаза) активирует ММР и вызываетмиграцию трофобластов. [Laresgoiti-Servitje E., Gomez-Lopez N , Olson D. M.,2010; Cartwright J. E., Fraser R., Leslie K., 2010] установили, что в процессемиграции трофобласт взаимодействует с несколькими типами клеток, такими какестественные киллерные клетки матки (uNK), стромальные клетки, лимфоциты,иммунные клетки и др.
Физиологический процесс модификации артерий зависитот сбалансированного взаимодействия между несколькими цитокинами исопутствующейтрофобласта.экспрессиейuNK-клеткирецепторов,выделяютактиваторовцитокины,такиеиингибиторовкакIL10,IL8,гранулоцитарный макрофагальный колонии стимулирующий фактор (G-CSF1 и 2)и фактор некроза опухоли α (α-TNF) [Hanna J., Goldman-Wohl D., Hamani Y. et al.,2006]. Кроме того, клетки uNK активируют «про» и «анти» ангиогенные факторы,трансформируют: фактор роста β (TGFβ), фактор роста эндотелия сосудов(VEGF), фактор роста плаценты (PGF). uNK-клетки также способствуют инвазиипутем взаимодействия со следующими рецепторами: киллерные иммуноглобулиноподобные рецепторы (KIR), рецепторы гетеродимералектина C-типа(CD94 иNKG), рецепторы цитотоксичности естественного киллера (NCR) итранскрипты, подобные иммуноглобулину (ILT) с молекулами класса IHLA(человеческого лейкоцитарного антигена), выраженными на EVT как HLA-G,HLA-C и HLA-E.
Патологические нарушения во всех этих взаимодействияхприводят к изменению продукции цитокинов, снижению секреции ММР исохранению пролиферативного трофобласта вместо инвазивного фенотипа.Ремоделирование спиральных артерий бывает настолько изменено, что вконечномитогенарушеннаяплацентацияприводиткпреэклампсии.20Недостаточное кровоснабжение плаценты вызывает хроническую гипоксию вмежворсинчатом пространстве, генерирует окислительный стресс, приводящий кплацентарному клеточному апоптозу с преувеличенными воспалительнымиреакциями.Ангиогенные факторы. Ангиогенез – это образование кровеносныхсосудов из ранее существовавших. Он является важным шагом плацентарнойваскуляризации,иопосредуетсясинергическимдействиемпро-иантиангиогенных факторов.
Факторы роста VEGF и плаценты (PIGF) являютсяпервыми, тогда как рецепторы VEGFR-1 и VEGFR-2 относятся к последним.VEGF взаимодействуют с антиангиогенными рецепторами, тогда как PIGFсвязывается только с VEGFR-1. Они помогают в образовании кровеносныхсосудов и регулируют функции трофобластов. VEGFR-2 является киназнымдоменным рецептором (KDR), Flk-1 – фетальной киназой печени-1, VEGFR-1 –fms-подобный рецептор тирозинкиназы 1 (Flt-1).
Растворимый эндоглин (sEng),еще один антиангиогенный фактор – усеченная форма эндоглина. sEngобнаруживается в синцитиотрофобласте и эндотелиальных клетках и образуеткорецептор в трансформирующем факторе роста (TGF) β1 и β3. Он регулируетпроизводство NO, сосудорасширяющего средства. Растворимая форма Flt-1 (sFlt1), секретированная из плаценты, связывается с VEGF и PIGF и являетсявариантом сращивания Flt-1. Результаты [Polsani S., Phipps E., Jim B., 2013; StaffA.C., 2011; Carty D. M., Delles C., Dominiczak A. F., 2008] свидетельствуют о том,что плацентарные антиангиогенные факторы в материнском кровообращениивызывают нарушения в эндотелии сосудов матки и гипертонию.
Прибеременности с преэклампсией наблюдаются низкие значения VEGF и PIGF иповышенныеуровниsFlt-1иsEngвматеринскойциркуляции.Этиантиангиогенные белки в плаценте связывают и нейтрализуют VEGF и PIGF,которые влияют на гомеостаз эндотелиальных клеток и вызывают клиническиесимптомы преэклампсии. Изменение этих белков было замечено и до появленияклинических симптомов. Несколько отчетов поддерживают PIGF в качествераннего предсказателя, тогда как многие исследования не могут доказать эти21отношения. Низкие значения PIGF наблюдались на 15–19-й и 17–21-й неделях убеременных, которые позже развивали преэклампсию. [Polsani S., Phipps E., JimB., 2013] были опубликованы разнородные отчеты о VEGF в прогнозированиипреэклампсии. В исследованиях сообщалось о 2-м триместре предсказаниязаболевания, тогда как другие исследования могли прогнозировать правильнотолько в течение 5 недель развития болезни.
Тем не менее, другие группы несмогли обнаружить концентрации VEGF ниже < 30 пг / мл. 8 sFlt-1 и sEng – дваантиангиогенных фактора, которые показали высокий уровень циркуляции допоявления клинических симптомов. Повышение sFlt-1 обнаруживалось даже до 56 недель клинической фазы, тогда как sEng всплывал от 2 до 3 месяцев и далее.Изменение обоих пептидов коррелировали с тяжестью заболевания. Levine et al.предположили, что отношение sFlt1: PIGF и (sFlt 1 + sEng): PIGF может бытьлучшим предиктором преэклампсии [Staff C., 2011; Grill S., Rusterholz C., ZanettiDallenbach R.
et al., 2009]. Развитие маточно-плацентарного кровообращениятребует сложного взаимодействия между pro-angiogenic сосудистым факторомэндотелиального роста (VEGF) и плацентарным фактором роста (PlGF) с ихродственными рецепторами VEGF 1 (VEGFR-1, и VEGFR-2) [Pare E., 2006].Известно, плацента – богатый источник этих факторов [Bodnar L. M., 2000; FeigD.S., 2006; Bigelow C.A., 2013]. В дополнение к регулированию гомеостазакровеносного сосуда VEGF, PlGF и flt-1 рецепторы являются ключевымикомпонентами в регулировании выживания трофобласта и сохранения егофункции [Lecarpentier E., 2013; Bramham K., 2012].Плацентарныеклеткитакжесекретируютизоформуflt-1,котораяпроизводится посредством альтернативного соединения РНК посредника идействует как антиангиогенный фактор, взаимодействуя и нейтрализуя PlGF иVEGF [Hirose N., 2014].
Есть убедительные доказательства [Goodwin A. A., 2005;Combs C. A., 1993; Bramham K., 2011, Spracklen C. N., 2014; Lin J., 2005], чтоболее высокий уровень sflt-1 снижает уровень PlGF и VEGF при повторенныхисследованиях у пациентов с преэклампсией.
На основании этого делаетсяпредположение, что часть избытка циркулирующего sflt-1 происходит от22плаценты [Cohen D., 2010]. Уровни sflt-1в материнской крови возрастают снарастанием симптомов преэклампсии, тогда как VEGF и PlGF были уменьшеныу больных с тяжелыми симптомами по сравнению с нормальными беременнымиили у пациентов со слабо выраженными симптомами преэклампсии [GoodwinA. A., 2005; Combs C.
A., 1993; Abou-Nassar K., 2011]. Изменения в sflt-1 и PlGFбыли более явными в начале заболевания по сравнению с поздними проявлениямипреэклампсии [Abou-Nassar K., 2010]. У беременных крыс внешнее введение sflt-1инициировало гипертонию и протеинурию, сродни признакам преэклампсии[Goodwin A. A., 2005]. На основании этого было сделано заключение о том, чтоматеринскаяэндотелиальнаянеустойчивостьюОтклоняющиесяуровней,уровнидисфункцияприциркулирующихплазмыилипреэклампсиивызываетсяангеонгенныхфакторов.сывороткиsflt-1,VEGFиPlGFдействительно могут свидетельствовать о скрытом течении преэклампсии[Lisonkova S., 2013; Skjaerven R., 2002; Mostello D., 2008; Trogstad L., 2009; XiongX., 2002; Trogstad L., 2004].Во время беременностей с нормальным давлением уровни sflt-1 остаютсяотносительно стабильными до 8 недели беременности, затем они постоянноувеличиваются. Было зарегистрировано более явное увеличение sflt-1 во времябеременностей, заканчивающихся преэклампсией, которое может являтьсяскринингом приблизительно за 5–8 недель до того, как возникнут признакипреэклампсии [Xiong X., 2002; Trogstad L., 2004].Разрешимый Эндо-Глин.
![](https://s.studizba.com/z.php?f=/templates/si/i/noavatar.png&w=100&h=100&t=1"){kind=avatar}
