Диссертация (1174248)
Текст из файла
Федеральное государственное автономное образовательное учреждениевысшего образования «Российский национальный исследовательскиймедицинский университет имени Н. И. Пирогова»Министерства здравоохранения Российской ФедерацииНа правах рукописиАВЕТИСОВА Кристина ГригорьевнаВНЕКЛЕТОЧНАЯ ДНК У БЕРЕМЕННЫХ ПРИ ПРЕЭКЛАМПСИИ ИПЛАЦЕНТАРНОЙ НЕДОСТАТОЧНОСТИ14.01.01 – Акушерство и гинекологияДиссертацияна соискание ученой степеникандидата медицинских наукНаучный руководитель:доктор медицинских наук, профессорКлименко Петр АфанасьевичМосква – 20192ОГЛАВЛЕНИЕВВЕДЕНИЕ ..................................................................................................................... 3Глава 1.
ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ: преэклампсия, плацентарнаянедостаточность (современное состояние вопроса, молекулярнобиологическая основа преэклампсии) .................................................................... 11Глава 2. ХАРАКТЕРИСТИКА КЛИНИЧЕСКОГО МАТЕРИАЛА ИМЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ .................................................................................. 372.1.
Клиническая характеристика наблюдений .......................................... 382.2. Методики исследования ........................................................................... 472.3. Определение молекулярно-биологических факторов ........................ 48Глава 3.
РЕЗУЛЬТАТЫ СОБСТВЕННЫХ ИССЛЕДОВАНИЙ И ИХОБСУЖДЕНИЕ ........................................................................................................... 503.1. Изменение концентрации циркулирующей внеклеточной ДНК и еехарактеристик в крови при нормальной беременности ...........................
503.2. Изменение концентрации циркулирующей внеклеточной ДНК и еехарактеристик в крови при преэклампсии ................................................. 603.3. Изменение концентрации циркулирующей внеклеточной ДНК и еехарактеристик в крови при плацентарной недостаточности и задержкероста плода .........................................................................................................
69ЗАКЛЮЧЕНИЕ ........................................................................................................... 81ВЫВОДЫ ............................................................................................................ 99ПРАКТИЧЕСКИЕ РЕКОМЕНДАЦИИ ...................................................... 100СПИСОК СОКРАЩЕНИЙ ..................................................................................... 101СПИСОК ЛИТЕРАТУРЫ .......................................................................................
102Приложение А ............................................................................................................ 1203ВВЕДЕНИЕАктуальность темы исследованияПлацентарная недостаточность и ассоциированные с ней осложнения, такиекак преэклампсия, задержка роста плода (ЗРП), антенатальная гибель плода,преждевременная отслойка плаценты обусловлены патологией формированияплаценты. Данные осложнения являются основными причинами перинатальнойзаболеваемости и смертности [Сухих Г. Т., Серов В. Н., Адамян Л. В., 2018;Стрижаков А.
Н., Мирющенко М. М., Игнатко И. В. и др., 2017; Айламазян Э. К.,2014; Samantha E. P., 2014]. Преэклампсия и плацентарная недостаточность влюбом проявлении могут приводить к серьёзным изменениям как в организмематери, вплоть до полиорганной недостаточности, так и плода, приводя кгипоксии.В настоящее время, по данным ВОЗ преэклампсия осложняет 2,2%беременностей, и имеется тенденция роста частоты ее встречаемости. В структурематеринской смертности преэклампсия занимает 2-е место после кровотечений, вРоссийской Федерации согласно данным статистики – 3-е место. Плацентарнаянедостаточность приводит к росту перинатальной смертности до 10% средидоношенных новорожденных и до 49% среди недоношенных, а также к задержкероста плода, частота которой варьирует в широком диапазоне: от 5 до 22%.Преэклампсиюневсегдасопровождаетединообразнаяклиническаякартина.
По данным Савельевой Г. М. и соавт. (2010), артериальная гипертензиявыше 160/100 мм рт. ст. определяется лишь в 25,5% эклампсии, а в остальныхнаходилась в пределах 130/90–150/100 мм рт. ст. и ниже. Протеинурия не былаподтверждена в 25% при эклампсии. Выявлены большие различия в тяжестиотечного синдрома в характере субъективных симптомов. Наличие всех трехсимптомов отмечено только в 58,8% наблюдений [Савельева Г.
М., Шалина Р. И.,Курцер М. А. и др., 2010]. Проспективное исследование [Douglas K. A., Redman C.W., 1994] при эклампсии показало, что у 38% беременных приступы развились дотого, как появились и были диагностированы протеинурия и артериальная4гипертензия. К «атипической преэклампсии» относят наблюдения с отсутствиемодного или более симптомов [Sibai B. M., Stella C. L., 2009].В последние годы, с целью диагностики хронических полиорганныхнарушений,сталииспользоватьвкачестведополнительныхпризнаковповреждения тканей исследование протеом, ДНК и других нуклеотидов.Обнаружено повышение вкДНК при аутоиммунных заболеваниях [Козлов В.
А.,2013; Galeazzi M., Morozzi G., Piccini M. et al., 2003; Leon S. A., Revach M., EhrlichG. E. et al., 1981], остром инфаркте миокарда [Destouni A., Vrettou C., Antonatos D.et al., 2009], у больных, перенесших острый инсульт [Rainer T.
H., Wong L. K. S.,Lam W. et al., 2003; Lam N Y., Rainer T. H., Wong L. K. et al., 2006, N 68, p. 71–78],в онкологии при наличии характерных для канцирогенеза мутаций, таких каконкогены KRAS, HER2, BRCA1, APC, PIK3CA, BRAF и др. [Васильева И. Н,Беспалов В. Г., 2013; Dorval P., Laurent, 2010].В акушерстве имеется небольшое количество работ, в которых показано,что вкДНК полезна в диагностике преэклампсии и плацентарной недостаточности[Логутова Л. С., Радьков О. В., Калинкин М. Н. и др., 2012; Баев О. Р., КарапетянА.
О. и др., 2018]. В этом случае необходимо определять не конкретныймутантный ген, а общую концентрацию вкДНК в материнской крови. Основнымисточником вкДНК плода в крови матери считают гибнущие в результате некрозаили апоптоза клеток плаценты [Smid M., 2011]. Обнаружена высокая корреляциямежду концентрацией в плазме матери последовательностей материнского геномаи вкДНК плода [Lo Y.
M., 1999]. В акушерской практике роль вкДНК и еехарактеристиквдиагностикеполиорганныхсистемныхзаболеваний,донастоящего времени мало изучена, а результаты исследований противоречивы.Степень разработанности темы исследования.Своевременная и ранняя диагностика, грамотная оценка степени тяжестипреэклампсии и плацентарной недостаточности, их лечение или родоразрешениепозволят снизить частоту материнской и перинатальной заболеваемости исмертности. Существует целый комплекс субъективных причин, затрудняющихоценку степени тяжести этих осложнений беременности: отсутствие точных5знаний об этиологии и патогенезе, высокая частота встречаемости атипичнопротекающих преэклампсии и плацентарной недостаточности, узкий диапазонхарактеристик, ориентированных на небольшое количество критериев, непринадлежащих к специфическим из доказательной медицины: АД, протеинурия,тесты функциональной диагностики, антропометрия, доплерометрия и др.Изменения концентрации внеклеточной ДНК и ее характеристик в кровибеременных при преэклампсии и плацентарной недостаточности мало изучены идо сих пор не являются признаками болезни.Цель исследованияПовыситькачестводиагностикитяжелыхформпреэклампсиииплацентарной недостаточности во время беременности с помощью определенияпараметров внеклеточной ДНК.Задачи исследования1.
Определить концентрацию вкДНК, уровень активности ДНКазы 1,соотношение вкДНК/ДНКазы 1, количества мтДНК в составе вкДНК у здоровыхбеременных во 2-м и 3-м триместрах беременности.2. Выявить корреляцию между концентрацией вкДНК в материнской кровии общепринятыми клинико-лабораторными маркерами преэклампсии и ЗРП(САД, ДАД, отеки, белок в моче, вес плода, степень ЗРП, ультразвуковое идопплерометрическоеисследованиекровотокавматочномиплодово-плацентарном бассейнах).3.
Исследовать концентрацию вкДНК, уровень активности ДНКазы 1,соотношение вкДНК/ДНКазы 1 количества мтДНК в составе вкДНК у пациентокс преэклампсией различной степени тяжести.4. Выявить диагностическую значимость показателей концентрации вкДНК,уровня активности ДНКазы 1, количества мтДНК в составе вкДНК, прикритической форме ПЭ.5.
Определить концентрацию вкДНК, уровень активности ДНКазы 1 приЗРП различной степени тяжести.66. Оценить значимость показателей концентрации вкДНК и уровняактивности ДНКазы 1 в диагностике плацентарной недостаточности, ЗРП,хронической гипоксии плода.Научная новизна результатов исследованияПолученные нами результаты показывают, что высокий уровень активностисистемы элиминации вкДНК затрудняет и искажает результаты анализаконцентрации вкДНК при беременности, особенно при патологии. Видимо,поэтому литературные данные об изменении концентрации вкДНК при патологиибеременности столь противоречивы. Обнаружено, что при преэклампсиисущественно изменяется как вкДНК, так и ее характеристики. Они коррелируют склиническими признаками болезни.Показано, что если учитывать три показателя – концентрация вкДНК,активность ДНКазы I и отношение вкДНК/ДНКаза I, то можно определятьуровень гибели клеток в организме беременной. Эти показатели даютинформацию об эффективности работы системы элиминации, которая включаетДНКазу I и другие значимые при беременности компоненты.
Характеристики
Тип файла PDF
PDF-формат наиболее широко используется для просмотра любого типа файлов на любом устройстве. В него можно сохранить документ, таблицы, презентацию, текст, чертежи, вычисления, графики и всё остальное, что можно показать на экране любого устройства. Именно его лучше всего использовать для печати.
Например, если Вам нужно распечатать чертёж из автокада, Вы сохраните чертёж на флешку, но будет ли автокад в пункте печати? А если будет, то нужная версия с нужными библиотеками? Именно для этого и нужен формат PDF - в нём точно будет показано верно вне зависимости от того, в какой программе создали PDF-файл и есть ли нужная программа для его просмотра.
![](https://s.studizba.com/z.php?f=/templates/si/i/noavatar.png&w=100&h=100&t=1"){kind=avatar}
