Диссертация (1174225), страница 18
Текст из файла (страница 18)
Типичная кривая хемилюминограммыткани яичника представлена на Рис. 2.3.2IНАДН1,8IХЛ× 103, имп/с1,61,41,21Люцигенин0,8I00,6НАДН0,40,20455565Время, мин7585Рис. 2.3. Хемилюминограмма ткани яичника в присутствии люцигенина: I0 - люцигенин-активированная хемилюминесценция (собственное свечение ткани), IНАДН- НАДН- стимулированная хемилюминесценция (отражает «запас» имеющегосяантиоксидантного фермента НАДН-зависимой цитохром b5-редуктазы), КА=I0/IНАДН (отражает антиоксидантную активность НАДН-зависимой цитохромb5-редуктазы).Статистическая обработка данных проводилась с помощью методов параметрической и непараметрической статистики. Проверка нормальности распределения осуществлялась согласно критерию Шапиро-Уилка. Для статистически значимого определения достоверности различий в двух независимых выборках прираспределении, отличном от нормального рассчитывался U-тест Манн-Уитни.Для оценки различий качественных признаков рассчитывался критерий хиквадрат.
При малых объемах выборок пациенток вычислялся точный критерийФишера. Все вычисления проводились в программе MedCalc.94Клиническая характеристика пациенток, включенных в первый этап исследованияСредний возраст пациенток с НГЭ (n=36) составил 32,5 ± 2,8 года, из нихпервичное бесплодие было диагностировано у 30 обследованных, вторичное бесплодие — у 6. При анализе акушерского анамнеза было установлено, что средипациенток, страдающих эндометриоз-ассоциированным бесплодием, у 30 пациенток беременность отсутствовала, у 1 пациентки были отмечены роды через естественные родовые пути, у 5 наблюдаемых был искусственный аборт.
При сборегинекологического анамнеза было установлено, что хронический сальпингоофорит на основании хронических тазовых болей был выявлен у 21 пациентки, гиперпластические процессы эндометрия выявлялись у 3 пациенток, фоновые заболевания шейки матки были отмечены в анамнезе 8 пациенток с НГЭ. У 9 пациенток с эндометриоз-ассоциированным бесплодием гинекологический анамнез небыл отягощен. Во время проведения лапароскопии распространенность эндометриоза, оцененная по классификации американского общества фертильности(1996г.) соответствовала I–II стадии у 24 пациенток, III–IV стадии – у 12.
Во время оперативного вмешательства всем пациенткам была произведена деструкцияэндометриодных гетеротопий (биполярная коагуляция и/или иссечение). У 11 пациенток операция была дополнена вылущиванием одно- или двусторонних эндометриоидных кист различных размеров.Средний возраст пациенток с ТПБ (n=11) составил 34,8 ± 4,1 года. Из нихпервичное бесплодие было выявлено у 4 женщин, вторичное бесплодие - у 7. Из 7пациенток, имевших в анамнезе беременность: самопроизвольные или оперативные роды были отмечены у 4 пациенток, внематочная беременность была у 1 пациентки, искусственный аборт по желанию пациентки был произведен в 3 наблюдениях, самопроизвольное прерывание беременности было у 1 пациентки. У 6 пациенток группы ТПБ гинекологический анамнез был отягощен перенесеннымострым воспалением придатков, причиной которой была урогенитальная инфекция, у 4 пациенток производились гистероскопии с раздельным диагностическимвыскабливанием по поводу гиперпластических процессов эндометрия, у 2 паци-95енток была выявлена патология шейки матки.
Отсутствие указаний на перенесенные гинекологические заболевания в анамнезе была выявлено у 2 пациенток.Оперативное вмешательство в объеме сальпингоовариолизиса было выполнено у6 пациенток, сальпингостомия была произведена у 5 обследованных.Средний возраст пациенток с СПКЯ (n=9) составил 28,1 ± 1,9 года. У всехпациенток в группе с СПКЯ было диагностировано первичное бесплодие. Из гинекологических заболеваний среди обследованных с бесплодием, обусловленнымСПКЯ, у 2 пациенток были выявлены фоновые процессы в шейке матки, гиперпластический процесс эндометрия у 1. Гинекологический анамнез у 6 пациентокэтой группы не был отягощен. В ходе лапароскопии у пациенток СПКЯ монополярным игольчатым электродом выполнялась каутеризация (n=6) и дриллинг(n=3) яичников.Клиническая характеристика пациенток, включенных во второй этап исследованияВо второй этап исследования было включено 38 пациенток.
Впервые оперативное лечение по поводу эндометриодных кист было выполнено у 28 пациенток(у 18 – вылущены односторонние, у 10 – двусторонние кисты), таким образом было исследовано 38 образцов стенки эндометриодной кисты и 38 образцов тканейяичников, прилежащих к эндометриодной кисте. Средний возраст пациенток сэндометриодными кистами составил 31,1±4,3 года. Длительность бесплодия намомент проведения лапароскопии была равна 3,3±0,3 года. Частота первичногобесплодия составила 75,6 % (31 пациенток), вторичного – 24,4 % (10 пациенток).Среди пациенток с вторичным бесплодием у 6 в анамнезе были современные роды, у 4 - искусственный аборт. Размер эндометриодных кист варьировал от 2 до 9см, при этом кисты менее 3 см были выявлены в 12 наблюдениях, более 3 см – в26 наблюдениях. В 12 наблюдениях помимо изучения стенки эндометриодной кисты был оценен прооксидантный потенциал содержимого эндометриодной кисты.Ткань яичника пациенток с эндометриозом сравнивалась с контрольнойгруппой (n=10).
В контрольную группу вошли 4 пациентки, которым проводилась96операция создания искусственной непроходимости маточных труб, 1 пациентка скистой желтого тела, 3 пациентки с параовариальными кистами и 2 пациентки смиомой матки. Средний возраст пациенток контрольной группы составил34,1±4,3 года. У 8 из 10 пациенток в анамнезе были роды, искусственные абортыбыли проведены 5 пациенткам.
У всех пациенток контрольной группы в гинекологическом анамнезе отсутствовало указание на наличие доброкачественных образований яичников или оперативных вмешательств на придатках матки. Показатели овариального резерва были сохранены у всех пациенток группы сравнения(АМГ более 1,1 нг/мл).2.3. Антиоксидантный профиль плазмы крови и перитонеальной жидкостиу пациенток с эндометриоз-ассоциированным бесплодиемНа первом этапе исследования была изучена антиоксидантная активностьплазмы крови и перитонеальной жидкости.
На Рис. 2.4 представлены хемилюминограммы антиоксидантного профиля плазмы крови и перитонеальной жидкостиу пациенток с различным генезом бесплодия. Нами оценивались два параметра:площадь подавления свечения S, отражающее действие сильных антиоксидантовплазмы крови и перитонеальной жидкости мочевой кислоты и аскорбата, и прирост стационарного уровня, вызванный прооксидантной активностью альбуминаза счет реакций единственной тиоловой группы. Параметр ∆I характеризовал уровень окислительной модификации альбумина: чем сильнее было выражено окисление альбумина, тем меньшим было значение ΔI.9742,523IХЛ *10³ имп/сIХЛ *10³ имп/с3,52,51,521,510,50,5010НГЭ5001000Время, сГидросальпинкс15000СПКЯ0НГЭа5001000Время, сГидросальпинкс1500СПКЯбРис. 2.4. Хемилюминограммы плазмы крови (а) и перитонеальной жидкости (б)пациенток с различным генезом бесплодияТак как прирост стационарного уровня был обусловлен в основном альбумином, а именно его тиоловой группы, а показатель ∆I характеризовал уровеньокислительной модификации альбумина, то интересно было провести сопоставление параметров S и ∆I.
Была выявлена слабая прямая корреляция между этимидвумя показателями в плазме крови и прямая умеренная корреляция в перитонеальной жидкости (Рис. 2.5)3,0п/I ПЖ , им с2,52,01,51,00,50,0200300400500600SПЖ , имп/с700800Рис. 2.5. Корреляция между параметрами S и ∆I хемилюминограмм в перитонеальной жидкости.98У пациенток с НГЭ были вычислены следующие показатели антиоксидантного профиля плазмы крови: медиана Мe SПЛАЗМА =371 (352-405), Me ∆IПЛАЗМА=1,5 (0,9-1,9) (Табл.
2.2). При ТПБ показатели были схожими: Me SПЛАЗМА =339(270-418), Me ∆IПЛАЗМА =0,7 (0,5-1,5). Такие же параметры антиоксидантной активности плазмы крови были и у пациенток с СПКЯ: Me SПЛАЗМА = 308 (267-440),Me ∆IПЛАЗМА =1,3 (0,8-1,6). Все различия между группами не достоверны p>0,05.Табл. 2.2.
Антиоксидантный профиль плазмы крови при различных причинах бесплодияПоказатели хемилюминограммыПричина бесплодияНГЭ(n=36)ТПБ(n=11)СПКЯ(n=9)SПЛАЗМА,×103имп/с, Ме (МР)371(352-405)339(270-418)∆IПЛАЗМА,×103имп/с, Ме (МР)1,5(0,9-1,9)Количество пациенток со сниженной антиоксидантной емкостью, %47,2%Достоверностьразличий*p междуНГЭиТПБ*p междуТПБиСПКЯ308(267-440)p>0,05p>0,050,7(0,5-1,5)1,3(0,8-1,6)p>0,05p>0,0545,4%44,4%p>0,05p>0,05Количество па30,5%36,3%33,3%p>0,05p>0,05циенток с повышенной антиоксидантной емкостью, %Практически у всех пациенток (вне зависимости от генеза бесплодия) выявлялись изменения свободно-радикального гомеостаза плазмы крови как в сторонуснижения антиоксидантов (окислительный стресс), так и повышения антиоксидантов (антиоксидантный стресс).
Окислительный стресс был выявлен у 47,2%пациенток с НГЭ, у 45,4% с ТПБ и 44,4% с СПКЯ, антиоксидантный стресс у30,5%, 36,3%, и 33,3% соответственно.99Различия в показателях свободно-радикального гомеостаза перитонеальнойжидкости также были недостоверными между тремя группами пациенток (табл.2.3).Табл. 2.3 Антиоксидантный профиль перитонеальной жидкости при различномбесплодииПоказатели хемилюминограммыПричина бесплодияДостоверностьразличийНГЭ(n=36)ТПБ(n=11)СПКЯ(n=9)*p междуНГЭ иТПБ*p междуТПБ иСПКЯSПЖ, ×103 имп/с,Ме (МР)400(322-458)372(348-426)373(322-462)p>0,05p>0,05∆IПЖ, ×103 имп/с,Ме (МР)1,2(1,0-1,5)0,9(0,7-1,4)1,0(0,5-1,6)p>0,05p>0,05Количество пациенток со сниженной антиоксидантной емкостью, %33,3%45,4%44,4%p>0,05p>0,05Количество пациенток с повышенной антиоксидантной емкостью, %41,7%27,3%33,3%p>0,05p>0,05Были рассчитаны следующие параметры кинетических кривых в перитонеальной жидкости: при НГЭ - (Me) SПЖ =400 (322-458), Me ∆IПЖ =1,2 (1,0-1,5); приТПБ - (Me) SПЖ =372 (348-426), Me ∆IПЖ =0,9 (0,7-1,4); при СПКЯ - (Me) SПЖ =373(322-462), Me ∆IПЖ = 1,0 (0,5-1,6).