Диссертация (1174206), страница 37
Текст из файла (страница 37)
Как и было показано при доплерографическом исследовании,окклюзия ОСА блокирует коллатеральный кровоток в мозге, что предотвращает уменьшение«зоны нарушения перфузии» за счет саногенетических механизмов сосудистой коллатеральнойадаптации и компенсации.
То есть блокируется развитие феномена «коллатеральнойреперфузии».207Рисунок 35 - Определение размера «зоны нарушения церебральной перфузии» («зона риска»)в трех группах сразу после окклюзии только ЛСМА, комбинации окклюзий ЛСМА и ЛОСА, атакже комбинации окклюзий ЛСМА и ООСА (р<0,01, в группах 2 и 3 по сравнению с группой 1)Особенность церебрального кровотока в головном мозге крысы заключается в быстройкомпенсации церебральной перфузии при окклюзии артерий головного мозга и шеи, чтовероятнее всего связано с развитой сетью коллатерального кровообращения.
Эти данныесвидетельствуют о необходимости контроля кровотока в головном мозге крыс примоделировании ишемии, а при создании моделей инсульта следует учитывать компенсаторныевозможности церебрального кровотока у крыс. Эта особенность кровотока отличается отмеханизмов у человека.20811.3 РЕЗУЛЬТАТЫ ИЗУЧЕНИЯ РАЗМЕРА ЗОНЫ НАРУШЕНИЯ ПЕРФУЗИИ, ЗОНЫНЕКРОЗА, НЕВРОЛОГИЧЕСКОГО ДЕФИЦИТА И ОТЕКА ГОЛОВНОГО МОЗГАПРИ МОДЕЛИРОВАНИИ ИШЕМИИ, ВЫЗВАННОЙ ЛИГИРОВАНИЕМ СРЕДНЕЙМОЗГОВОЙ АРТЕРИИФормирование зоны инфаркта мозга происходит при всех пяти модификациях моделей, воснове которых заложена перевязка СМА.Некротические изменения в ткани мозга, полученные при витальной окраске срезов сприменением ТТХ, выявляются не ранее 24 часов после моделирования ишемии и достигаютмаксимальных размеров к 48 часам.
Через 72 часа невозможно определить размер ишемическогоповреждения с окраской ТТХ, что согласуется с литературными данными [252, 306]. Независимоот применяемых модификаций моделей ишемии, инфаркт располагался только в коре головногомозга и не затрагивает подкорковые ядра. Дистантных ишемических изменений не быловыявлено. При длительном использовании окклюзий (более 60 минут) или при грубомобращении с ОСА, в месте наложения клипсы (на ОСА) возможно образование пристеночноготромба, который при снятии клипс с ОСА может стать причиной тромбоэмболии.Экспериментатору необходимо контролировать образование тромба для предотвращениявозникновения дополнительного повреждения в виде инфарктов, например, в противоположномполушарии.Окклюзии ЛСМА (Группа 1) на 40 минут приводит к формированию инфаркта мозга, которыйрасполагался только в первых двух срезах.
Его размер был крайне небольшим и составлял 0,25[0,04; 0,36] % объёма мозга и дисперсия тоже была незначительной – 0,0461 (Рисунок 36).Фиксации ЛСМА на нитях приводила к высокой вероятности разрыва артерий, что былосущественным недостатком данной модели. При перевязке только одной ЛСМА (Группа 2)размер инфаркта и дисперсия были - 0,33 [0; 0,71] % и 0,18, соответственно, что значимо неотличалось от группы 1 (р=0,931), несмотря на то, что в группе 2 моделировалась ишемия безреперфузии. Вероятность разрыва ЛСМА в группе 2 была значительно меньше, чем в группе 1.Она зависела от навыка экспериментатора и в опытных руках исследователя – не былапроблемой.
При маленьком объёме некроза (как в группах 1 и 2) размер инфаркта зависел от того,как проходило препарирование мозга. Так, в случаях маленького участка повреждения - инфарктвообще не попадал в срез мозга. Это приводит к ошибке при подсчёте объёма инфаркта сиспользованием ТТХ и делает результат эксперимента необъективным.
При одновременнойперевязке ЛСМА и ОСА в группе 3 происходит блокирование коллатерального кровообращенияв бассейне ОСА, что приводит к формированию большего размер инфаркта, чем в группе 1 и 2,где постоянно или временно лигировалась только одна ЛСМА (р<0,0001), – 5,98 [2; 8] % объёмаголовного мозга. Участок некроза, полученный при окраске с использованием ТТХ, в группе 3209выявлялся в двух или трех срезах мозга, но отмечался значительный разброс данных (дисперсия– 11,5). Одновременное лигирование ЛСМА и двух ОСА в группе 4 без восстановления кровотокапозволяло сформировать самый большой размер повреждения мозга объёмом 14,6 [11,41; 17,91]% (по сравнению с группой 3 и 2 - р=0.0191 и р<0.0001, соответственно), который можно быловыявить во всех срезах, но дисперсия данных была также большой (57,91).
Одновременнаяокклюзия ОСА приводит к развитию ишемии не только передних отделов головного мозга, но имягких тканей головы, что приводит к повышению риска местных осложнений, например, кзамедлению заживления послеоперационной раны или ее нагноения. Основным недостаткоммоделей перманентной ишемии (без реперфузии), вызванной перевязкой ЛСМА и ОСА, то естьгруппы 3 и 4, является большой разброс данных морфологического повреждения мозга,оцененного в результате витальной окраски ТТХ. При организации исследований, например,нейропротективных лекарственных средств этот недостаток может быть скорректирован за счётбольшой выборки. В группе 5 (модель ишемии мозга по L.
Zhao), моделировалась окклюзияЛСМА и транзиторной окклюзии обеих ОСА на 40 минут, что приводило к формированиюишемического некроза, как в группе 4 (р=0,2) – 11,3 [10,1; 14,23] %. В группе 5 была показанасамая большая однородность данных (дисперсия – 4,73). Мы предполагаем, что необходимоболее 40 минут на открытие лептоменингиальных анастомозов для связи с вертебральнобазилярным бассейном [Brozici, M.
et al., 2003, Шмонин А.А. и соавт., 20012 и 2011]. В группе 5эмпирическим путём, создателями модели инсульта [316] был подобран интервал времени - 40минут, необходимый для блокирования компенсаторного кровотока за счет окклюзии ОСА. Так,использованиитранзиторнойишемиипозволяетполучитьболееоднородныйивоспроизводимый размер морфологического повреждения, что дает преимущества передмоделью, представленной в группе 4.210Рисунок 36 - Размер инфаркта во всех группах второго этапа через 48 часов послемоделирования ишемии (уровень значимости приведен для сравнения с группой 1)p<0,05p<0,05p<0,05р=0,931Полушария одинаковы по размеру, и поэтому в норме - без повреждения мозга - коэффициентасимметрии равен единице. Коэффициент асимметрии будет больше единицы, если размерпораженного полушария будет больше за счет отека вследствие ишемического повреждения.
Приперманентной перевязке ЛСМА в группа 2 и транзиторной окклюзии ЛСМА на 40 минут в группе1 статистически значимой асимметрии полушарий не было получено – 1,0[0,97; 1,0] и 1,0[0,87;2111,0], соответственно, что говорит об отсутствии церебрального отека при не большом размереочага. При совместной окклюзии ЛСМА и ЛОСА в группа 3, коэффициент асимметриистановится больше, что коррелирует с увеличением размера ишемического некроза по сравнениюс группой 1 (р=0,002) и составляет – 1,09 [1,06; 1,12]. Перевязка двух ОСА и ЛСМА в группе 4, атакже одновременная окклюзия ООСА на 40 минут и перманентная окклюзия ЛСМА в группе 5приводит к увеличению отека головного мозга по сравнению с группой 2, где изолированноперевязывалась только ЛСМА (р=0,0041 и 0,0021, соответственно), а коэффициент асимметриисоставил 1,121 [1,04; 1,17] и 1,12 [1,08; 1,16], соответственно.
Между группами 3, 4 и 5 не быловыявлено статистически значимой разницы, но в группе перевязки ЛСМА и ЛОСА в группе 3дисперсия данных была больше, чем в группах 4 и 5 (дисперсия – 0,0791, 0,0051 и 0,0031,соответственно). Так, модели перевязки ЛСМА с постоянной или 40-минутной окклюзией ООСАв группах 4 и 5 оказались наиболее подходящим для оценки отека мозга, так как они позволяютполучить наиболее выраженный отек при наименьшем разбросе данных.Рисунок 37 - Оценка неврологического дефицита по шкале Гарсия во всех группах второгоэтапа через 48 часов после моделирования ишемии (уровень значимости приведен для сравненияс группой ложнооперированных).р=0,003p=0,001p>0.05p>0.05p>0.05Наибольшее внимание в данном исследовании было уделено клиническим проявленияминсульта у крыс, то есть неврологическому дефициту.
В исследованиях было показано, чтоможет быть несоответствие между нейропротективным эффектом лекарственного вещества,212проявляющимсявуменьшенииразмеровструктурногоповрежденияирегрессомневрологических проявлений и признаков [284]. Согласно данным литературы, существуютнейропротективные препараты, которые влияют на неврологический дефицит без уменьшенияструктурного повреждения, и наоборот. Также в исследованиях ни один из современныхлекарственных средств не доказал своей эффективности в третьей фазе клинических испытаний,хотя демонстрировал выраженный нейропротективный эффект при ишемии на доклиническомэтапе исследования [191, 305, 310].Шкала неврологического дефицита Гарсия представлена в таблице 9 [212].
![](https://s.studizba.com/z.php?f=/templates/si/i/noavatar.png&w=100&h=100&t=1"){kind=avatar}
