Диссертация (1174206), страница 17
Текст из файла (страница 17)
В таблице 7 приведены данные по соответствию характера неврологическихрасстройств (неврологического дефицита) и функциональных тестов и шкал.78Таблица 7 - Соответствие характера неврологических расстройств (неврологического дефицита) и выбранных нами функциональныхтестов с оценкой по КФЖТестРасстройствамышечнойсилыСенсорныерасстройстваНарушениеравновесия икоординациидвиженийОбщаядвигательнаяактивностьРефлексыДомены по КФЖb730-b749ФУНКЦИИ МЫШЦb2СЕНСОРНЫЕФУНКЦИИ ИБОЛЬb750-b789ДВИГАТЕЛЬНЫЕ ФУНКЦИИd4МОБИЛЬНОСТЬb750МоторнорефлекторныефункцииШкала mNSS(Modified Neurological Severity Scores)+++-+Тест установки позы (Bracing test)+-+--Угловой тест (Corner test)+----Тест с вытягиванием лапы (Placing test)+++--Тест - хождение по балке (Ledged TaperedBeam)+-+--Бедерсон тест (Bederson test)++++Шкала Гарсия++++«-» - оценку по данному тесту не предусмотрена в приведённом тесте.«+» - данная характеристика оценивается по приведенному тесту.-79Оперативные вмешательства проводились под анестезией с использованием хлоралгидрата 430 мг/кг, внутрибрюшинно.Критерии включения: 1) вес крысы 200–250 г; 2) отсутствие неврологического или иногофункционального дефицита, оценнного с помощью выбранных тестов до исследования; 3)кровоток в ЛСМА до ее окклюзии по данным УЗ допплерографии на уровне 30–60 см/с.Критерии исключения: 1) Наличие кровотока в СМА во время ее окклюзии по даннымдопплерографии; 2) Отсутствие кровотока в СМА после удаления филамента по даннымдопплерографии (феномен «no-reflow»); 3) любые дыхательные расстройства во времяоперативного вмешательства; 4) резкое и необъяснимое изменение показателей кровотока вовремя наблюдения; 5) инфекционные осложнения после операции.Схема эксперимента: 1) тестирование и отбор крыс с помощью выбранных шкал и тестов; 2)моделирование фокальной филаментной окклюзии СМАна 30 минут по методике J.
Koizumi [163,245, 253] или проведение «ложной операции» без ишемии – то есть введения филамента в группеложнооперированных не проводилось; 3) Оценка неврологических расстройств у крыс спомощью неврологических оценочных шкал и тестов на 2, 7, 14, 21 и 28 дни постишемическогопериода.Моделирование фокальной ишемии головного мозга по методике J. Koizumi [163, 245, 253]происходило стандартно по методике, описанной ранее. Для доказательства морфологическогоповреждения головного мозга крыс на вторые сутки после окклюзии СМА в отдельной группепроизводилась окраска головного мозга с применением ТТХ, которая позволила выявить зонуишемического некроза.Группы экспериментальных животных: 1) Контроль – ложнооперированные крысы,проведенные через все этапы эксперимента за исключением введения филамента в ЛСМА (n=10);2) Опыт – крысы, которым воспроизводилась ишемия головного мозга (n=10).Оценка функционального повреждения головного мозга крыс после моделированияишемии производилась в два этапа.
На первом этапе изучение производилось физикально, безприменения шкал и балльной оценки. Регистрировали характер неврологических расстройств(чувствительных, нарушений произвольных движений, нарушений координации, выпадениерефлексов), сочетание синдромов и их выраженность. На втором этапе оценка повреждениямозга производилась с применением известных неврологических шкал и тестов:1. Хождение по балке (Ledged Tapered Beam) Для этого теста была необходима тренировка(около 1 недели) до тех пор, пока крыса не начнет успешно проходить по балке без поворотовназад и без промахов лапами. Этот тест наиболее чувствителен в оценке расстройств движениязадних лап. Во время теста крыса ходила по неподвижной сужающейся горизонтальной балке.80Число промахов противоположной задней конечности считалось наряду с общим количествомшагов этой лапой и выражался как доля (в %) промахов к общему количеству шагов [278, 279].2. Тест установки позы (Bracing test).
Данный тест позволил выявить расстройствадвигательной активности передних лап и координации движений в целом. Исследовательрасполагал свою руку с одной стороны от крысы и начинал мягко перемещать ее вбок по гладкойповерхности на 90 см со скоростью 20 см/с. Здоровые крысы были способны регулировать своюпозу, производя множество движений передними конечностями.
Считалось количество шагов,выполненных передней лапой на той стороне, с которой толкают крысу. Данный тествыполняется дважды в каждом направлении [278, 279].3. Угловой тест (Corner test). Данный тест позволил оценить расстройства восприятияпространства (такое как неглект) и «парез взора». Крыса в домашней клетке помещалась междудвумя планками размерами 30×20×1cm3. Здоровые крысы могли поворачиваться как вправо, таки влево, случайно. У животных с церебральным ишемическим поражением развивалось«игнорирование» половины пространства (неглект) и/или «парез взора», поэтому ониповорачивались преимущественно в «здоровую сторону» (без симптомов).
В 10 попыткахсчиталось число поворотов в каждую сторону [278, 279].4.Тест с вытягиванием лапы (Placing test). Данный тест позволил диагностироватьрасстройства двигательной активности передних лап. Крысу держали таким образом, чтобы еепередние лапы свисали без опоры. Затем крысу поднимали и подносили к краю стола так, чтобыее вибриссы касались поверхности края стола параллельного ее телу.
В 10 попытках для каждойлапы считали число раз, когда крыса успешно поднимает свою переднюю конечность наповерхность стола [231].5.Шкала mNS (Modified Neurological Severity Scores). Данная шкала представлена в таблице 8.Она включает в себя тесты на выявление расстройств двигательной активности (неестественныедвижения и функция мышц), сенсорной сферы (зрительной, проприоцептивной и тактильной),координации движений и рефлексов Максимальное количество баллов mNSS – 14, минимальное– 0 баллов [178].Таблица 8 - Шкала mNS (Modified Neurological Severity Scores)ТестПодвешивание крысы за хвост1 - Сгибание передней лапы1 - Сгибание задней лапы1 - Поворот головы более 10°относительно вертикальной оси через 30 секундБаллы381Ходьба по поверхности (normal=0; maximum=3)0 - обычная ходьба1 - невозможность идти прямо2 - ходьба по кругу в сторону поражения3 - падение на паретическую сторонуBeam – балансный тест(норма - 0; максимум поражения – 6 баллов)0 - устойчивая поза1 - зажимание края балки2 - обнимание балки и падение одной конечности с балки3 - обнимание балки и падение двух конечностей с балки, или вращение набалке (>30 seconds)4 - попытка удержаться на балке, но падение (>20 seconds)5 - попытка удержаться на балке, но падение (>10 seconds)6 - падение без попытки удержаться на балке или зависание на балке <10secondsОтсутствие рефлексов1 - Pinna-рефлекс (встряхивание головой при прикосновении к наружномуслуховому проходу)1 - корнеальный рефлекс (моргание глазом при легком прикосновении кроговице тканью)Максимум баллов362146.
Бедерсон тест (Bederson test) [162].Крысу подвешивали за хвост на высоте 1 метр над полом и наблюдали за сгибанием переднихконечностей. Здоровая крыса тянула обе передние конечности к полу. При отсутствии другихневрологических симптомов эта крыса получала 0 баллов. При неврологических симптомахкрыса сгибала переднюю конечность, противоположную пораженному полушарию. Еслиположение лапы варьировало от незначительного сгибания в пястье и приведения в плече сразгибанием в локте до выраженного полного сгибания в пястье, локте и приведения свнутренней ротацией в плече, то она оценивалась в 1 балл.
Далее крысы помещались на листмягкой покрытой пленкой бумаги, которую можно схватить когтями. Держа крысу рукою захвост, производили мягкое давление сбоку позади плеча крысы до тех пор, пока передниеконечности не проскользят несколько миллиметров.
Это задание повторялось несколько раз вразных направлениях. Здоровое животное или животное с легкой дисфункцией сопротивлялосьскольжению одинаково в обоих направлениях. Животные с более серьезными нарушениямиутрачивали способность противостоять боковому толчку и получали оценку в 2 балла. Далееживотных помещали в «открытое поле» для оценки «хождения по кругу». Если у крысынаблюдалось «Игнорирование» стороны повреждения, то это оценивалось в 3 балла.Интерпретация теста: 1.