Диссертация (1174203), страница 12
Текст из файла (страница 12)
В случаеотсутствия каких-либо сомнений в диагнозе после дерматоскопии, он считалсяокончательным. Во всех остальных ситуациях (42,1%) диагноз устанавливалсяпосле эксцизионной биопсии и патоморфологического исследования НОК. Поитогамобследованияопределеначувствительность,специфичностьидиагностическая точность клинического (визуального) осмотра с применениемстандартной дерматоскопии как рутинного метода диагностики, доступного наамбулаторном приеме. В качестве показателя гиподиагностики рассчитанпоказатель NNT (number need tested) — т.е. количество человек, которыхнеобходимо обследовать с использованием метода дерматоскопии, чтобы«пропустить» одну меланому.2.7 Одномоментное исследование СИАграфических изображениймеланоцитарных новообразований кожиКонечнаяточка:диагностическаяточность,чувствительностьиспецифичность СИАсокпии новообразований кожи.Участникиисследованияиметодынабора:Проведеноспектрофотометрическое интрадермальное исследование 200 новообразований вслучаях сложной дифференциальной диагностики.
В выборку включены больные63с диагнозом доброкачественные меланоцитарные невусы (n=74), диспластическиеневусы (n=62), меланома кожи на ранних (I-II) стадиях течения опухолевогопроцесса (n=14), меланома кожи на поздних стадиях (n=48), беспигментнаямеланома кожи (n=2).Продолжительность: с 2014 по 2016 годы.Критерии включения: наличие гистологического заключения.Критерии исключения: отсутствие данных гистологического исследования,неинформативностьбиопсийногоматериала,потеряданныхпатоморфологического заключения.Методы исследования: применение методавнутридермальногоповерхностныханализаслоев(СИАскопии)кожи.В—процессеспектрофотометрическогонеинвазивногоизученияспектрофотометрическогомультиспектрального сканирования с последующей компьютерной обработкойаппарат для СИАскопии формирует карты (изображения) распределенияпоглощающих свет хроматофоров (гемоглобин, коллаген, меланин) в эпидермисеидерме.
Полученные изображения называютсяСИАсканы(СИАграфы)распределения общего меланина в новообразовании, дермального меланина,СИАскан гемоглобина, СИАскан коллагена. То есть медицинское оборудованиедля спектрофотометрического анализа позволяет получить пять изображенийновообразования кожи — дерматоскопическое изображение, четыре СИАскана.Этиизображениядаютинформациюоналичииираспределениипигментированных структур, гемоглобина и коллагена в разных слоях кожи наглубине до 2 мм, а их последующая обработка с применением программныхалгоритмов позволяетсвысокойчувствительностьюиспецифичностьюдиагностировать различные пигментированные новообразования кожи, включаязлокачественные.Контактная СИАскопия проводится с применением специальной аналоговойкамеры, которая прикладывается к участку кожи (примерно 12x12 мм) дляполучения снимков крайне высокого разрешения.
Контактный принцип методапозволяет получить информацию обо всех типах структур на максимальной для64метода глубине. Предварительно на место сканирования наносится иммерсионноемасло.ДляСИАскопиииспользованооборудованиемедицинскоедерматоскопическое: диагностический сканер для контактной СИАскопииSIAscope V в комплекте Mole Mate, для бесконтактной СИАскопии - цифроваязеркальная фотокамера Canon EOS с поляризационным фильтром в комплекте MoleView (Astron Clinica, Cambridge, UK), регистрационное удостоверение № ФСЗ2008/01206.Прием пациентов проведен в многопрофильной клинике «Уральская», г.Екатеринбург.2.8 Одномоментный кластерный сравнительный анализ оценкиСИАграфических изображенийПроведен одномоментный кластерный сравнительный анализ оценкиСИАграфических изображений дерматологами с различным клиническим опытомработы.Конечнаяточка:диагностическаяточность,чувствительностьиспецифичность оценки СИАграфических изображений дерматовенерологом,имеющим клинический опыт работы менее трех лет, и дерматовенерологом,имеющим стаж работы более пяти лет.Участники исследования: 4 дерматовенеролога, имеющие стаж менее 3 лет,и4дерматолога, имеющиестажработыболеепятилет,оценивалиСИАграфические изображения 200 меланоцитарных новообразований кожи.Критерии включения: клинический опыт работы менее трех лет и более пятилет.Методы исследования: кластерный метод [212] с использованием среднихкластерных величин для сравнения диагностической точности заключений.652.9 Создание собственной системы анализа и математической моделиобработки СИАскановКонечнаяспецифичностьточка:диагностическаяоптико-электронныйточность,цифровойчувствительностьанализСИАскановибезсубъективного вмешательства.Участники исследования: СИАсканы 200 новообразований кожи, средикоторых было 74 доброкачественных невуса, 62 диспластических невуса, 14меланом кожи на ранних стадиях течения опухолевого процесса, 48 меланом наболее поздних стадиях и 2 беспигментные меланомы кожи.Методыисследования:длясозданиясобственнойсистемыавтоматизированной обработки СИАсканов меланоцитарных новообразованийбыла применена простая бальная система СИАскопической диагностики меланомыкожи, разработанная Moncrieff M., Powell J.
[183]. Данная система предусматриваетавтоматическую оценку таких критериев как возраст больного, максимальныйдиаметр подозрительного на меланому кожи меланоцитарного новообразования,присутствие различных цветов на СИАскане дермального меланина (зеленый цвет— 1, голубой цвет — 2, красный — 3, черный — 4 балла), наличие коллагеновыхдыр,присутствиеэритематозногоободкасосветлымучасткомвнутриисследуемого новообразования. По проведенному анализу определяется суммабаллов путем сложения числа лет больного, диаметра новообразования,умноженного на 20, показателя уровня дермального меланина (x30), наличиеколлагеновых дыр (1x20), наличие эритематозного ободка (1x25).Новообразование кожи с рассчитанной суммой баллов более 120расценивалось как меланома кожи.662.10 Одномоментное исследование диагностической значимостиконфокальной лазерной сканирующей микроскопии для диагностикимеланоцитарных новообразований кожиКонечнаяточка:диагностическаяточность,чувствительностьиспецифичность исследования диспластических невусов и меланомы кожи спомощью метода конфокальной лазерной сканирующей микроскопии.Участники исследования: 15 пациентов с подозрением на меланому (всего 18меланоцитарных новообразований).Критерии включения: случаи сложной дифференциальной диагностикимеланоцитарных новообразований кожи.Методы исследования: проводилась конфокальная лазерная сканирующаямикроскопия диспластических невусов и меланомы кожи.Конфокальная микроскопия позволяет получить изображение эпидермиса иповерхностной части дермы.
При конфокальной микроскопии контрастноеизображение получается за счет различий в индексе преломления органелл идругих клеточных микроструктур, которые выглядят более светлыми на фонеподлежащих структур.КМ показывает горизонтальные слои кожи с максимальной глубиной 350микрон. Разрешение, которое дает КМ при изучении кожи, вполне сравнимо стаковым при гистологическом исследовании — латеральное разрешениесоставляет менее 1 мкм, а вертикальное — от 3 до 5 мкм.Конфокальнаялазернаясканирующаямикроскопиямеланоцитарныхновообразований кожи является прижизненным (in vivo) неинвазивным методомдиагностики, позволяющим получить изображения эпидермиса и сосочкового слоядермы с разрешением, приближенным к обычной световой микроскопии.Исследование проведено с помощью медицинского оборудования —клинического конфокального микроскопа Vivascope 1500 (Lucid Inc, США) врежиме реального времени в ГБУ СО «Уральский научно-исследовательскийинститут дерматовенерологии и иммунопатологии», г.
Екатеринбург. В приборе67используется диодный лазер с длиной волны 830 нм и мощностью не более 35 мВтна поверхности кожи. В качестве иммерсионной среды между линзой объектива иадгезивным окошком использовали плотный гель для ультразвука (Германия). Наисследуемое новообразование наносилось специальное косметическое масло(Contacting agent STS, Mavig, Германия) с оптимальным индексом рефракции.Данный микроскоп позволяет прижизненно сканировать кожу на глубину до 400мкм, достигая сетчатого слоя дермы [33].
Сканирование происходит с помощью 30кратного иммерсионного объектива с фокусным расстоянием 5,3 мм. Каждоеполученное изображение соответствует горизонтальному срезу на выбраннойглубине с полем наблюдения площадью 0,5 x 0,5 мм, поперечным разрешением 1,0мкм и продольным разрешением 3-5 мкм [27; 202]. Для каждого новообразованиябыл получен массив изображений (конфокальные срезы), начиная с рогового слояи заканчивая сосочковым слоем. В случае больших по размеру новообразований,которые не полностью попали в поле наблюдения, сканирующее устройствоперемещалось в несколько локализаций.
Для каждого новообразования получалиболее100специальноеснимков,обучениекоторыепоинтерпретировалиськонфокальнойавтором,микроскопиивпрошедшимдепартаментедерматологии университета г. Модена и региона Эмилия (Италия, 2014).2.11 Одномоментное исследование сыворотки крови на белки S100 иsCD44std.Конечнаяточка:диагностическаяточность,чувствительностьиспецифичность исследования онкомаркеров S100 и sCD44std для диагностикимеланомы кожи.Участники исследования: выборку составили больные, у 6 (25%) из которыхдиагностирована меланома кожи, а также 18 (75%) больных с диспластическиминевусами кожи.Критерии включения: случаи сложной дифференциальной диагностики.68Методыисследования:врезультатепроведенногоинформационно-аналитического поиска установлено, что диагностики меланомы кожи на раннихстадиях имеет значение определение онкомаркеров S100, CD44, что может бытьиспользовано в дерматологической практике.
Исследования онкомаркеровпроведены в лаборатории многопрофильной клиники «Уральская».Для определения в сыворотке крови уровня S100 использован твердофазныйнеконкурентный иммуноферментный метод (модификация — прямая «сандвич»технология) на основе тест-системы «CanAg S100 Е1А» («Fujirebio Diagnostics»,Швеция). Анализ представляет собой высоко чувствительный ELISA (enzymelinked immunosorbent assay) метод, основанный на использовании двухмоноклональных антител (МКАТ) — S23 и S53, специфичных для двух различныхэпитопов, экспрессированных на S100B (выявляющих только формы S100A1B иS100BB).НапервомэтапебиотинилированнымиисследуемыйспецифическимиантигенS100связываетсяМКАТ(анти-S100),скоторыеиммобилизуются на покрытой стрептавидином поверхности полистироловогомикропланшета. На втором этапе реакции добавленные анти-S100 антитела,конъюгированные с пероксидазой хрена («вторые» антитела), связываются симмобилизованным комплексом «антиген-антитело».